王志亮
- 作品数：598 被引量：2,471H指数：27
- 供职机构：中国动物卫生与流行病学中心更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金青岛市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体ELISA的研究 Ⅳ.与IDEXXELISA试剂盒及Westernblot的比较被引量：7
- 2006年
- 利用重组N蛋白抗原建立了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的ELISA方法并组装成试剂盒,将试制的3批试剂盒分别与IDEXX生产的试剂盒及Western-blot进行了符合率试验。试验结果表明,所研制的试剂盒与Westernblot的符合率达97.67%以上。对460份临床血清分别用自制的试剂盒和IDEXX公司生产的试剂盒进行检测,其中有37份不相符合,用Westernblot对这37份血清进行验证,有35份血清检测结果与自制的试剂盒检测结果一致。由此表明,自行研制的试剂盒,其特异性和敏感性均能满足目前临床上该疫病的流行病学分析或免疫抗体检测。
- 吴延功徐天刚王志亮张喜悦王君玮宋翠平刘佩兰徐培莲宋芳
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒BLOT
- 小反刍兽疫病毒N、H和F蛋白的真核表达被引量：2
- 2009年
- 目的构建小反刍兽疫病毒(PPRV)H、N、F、NF重组真核表达质粒并观察其在真核细胞内的表达情况。方法采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从病羊组织中扩增PPRV的N、H、F基因序列并克隆到真核表达载体pIRES1neo中,最后用PCR、酶切和序列分析对重组质粒进行鉴定;将重组质粒以磷酸钙介导法转染Vero细胞,用免疫荧光方法鉴定其在细胞中的表达。结果将RT-PCR产物电泳,得到与预期大小相符的特异性片段;重组质粒经pIRES1-N、pIRES1-H、pIRES1-F和pIRES1NF酶切后,均出现预期相符的片段;DNA测序表明插入片段的序列与小反刍兽疫病毒N、H、F蛋白基因序列完全一致,其大小分别为1575bp、1830bp和1641bp;将重组质粒感染真核细胞,经免疫荧光检测,证明所有蛋白均得到表达。结论成功构建了重组真核表达质粒pIRES1-N、pIRES1-H、pIRES1-F和pIRES1NF,为继续进行基因免疫研究奠定了基础。
- 田晓灵赵永刚包静月王志亮李金明吴树清
- 关键词：小反刍兽疫病毒真核表达重组质粒转染
- 施马伦贝格病自然传入中国的风险分析被引量：7
- 2013年
- 为有效防范施马伦贝格病的传入，了解其流行趋势。以2011年-2012年的世界动物卫生组织（OIE）官方疫情数据为基础，采用地理信息系统，对疫病传播的时空数据进行初步分析。经过评估表明，该病在每年7月～9月传播速度最快，虫媒传播是其主要传播方式；自然传入中国的风险较高，自然条件下通过虫媒传播的速度约800km／年，经反刍动物通道传入中国约需2年～3年时间。中国应密切关注施马伦贝格病疫情的发展态势，积极开展防控技术研究，并加强重点区域的监测工作。
- 李金明邹艳丽张志诚吴晓东王志亮
- 关键词：风险分析
- 鸡场细菌病的流行特点和控制方法被引量：4
- 1997年
- 鸡场细菌病的流行特点和控制方法■杜元钊朱万光范根成刘佩兰王志亮（农业部动物检疫所禽病防治研究中心２６６０３２）近年来，细菌性疾病在各大鸡场频频暴发，造成了较大的经济损失，据不完全统计，由细菌性疾病造成直接或间接经济损失占成本的５—１０％。细菌性疾病已...
- 杜元钊朱万光范根成刘佩兰王志亮
- 关键词：养鸡场细菌性疾病
- 肉鸡热应激病理损伤与应激蛋白(HSP_(70))相关性研究被引量：54
- 2004年
- 通过血液临床病理学、组织学和免疫组织化学检测技术,对AA肉鸡进行了为期10 h的急性热应激,观察分析了高热应激状态下受试鸡组织损伤及其与HSP70的相关性。热应激受试鸡组织脏器在应激初期即开始出现较明显的组织病理学改变,表现为心肌纤维、肾小管上皮细胞等呈现不同程度的变性、坏死等退行性变化;外周血液中反映受试鸡心肌等细胞组织损伤的肌酸激酶(对照)活性显著升高;反映鸡体基础代谢水平的甲状腺素T3和T4、胰岛素则呈现不同程度的下降趋势。应激持续较长时间(10 h)后受试鸡外周血液中对照含量下降的幅度明显趋缓的现象可能与持续应激状态下心肌纤维内产生大量HSP70而产生保护性反应有关,HSP70在各组织脏器血管壁上的强阳性分布提示HSP70与血管功能密切相关。
- 鲍恩东龚远英J.Hartung付旭彬王小军张海涛王志亮
- 关键词：肉鸡热应激病理损伤应激蛋白病理形态学
- 貂、狐、貉群犬瘟热临床及病理学研究被引量：11
- 2009年
- 对2006年6～10月山东、河北等地区的部分毛皮动物养殖场发生疑似犬瘟热的疫情进行了流行病学、临床症状以及剖检病变观察和分析,对采集的病料进行了细菌分离鉴定、病毒特异性核酸检测,并选取肝、脾、肺、心、脑、膀胱和胃进行了病理组织学检查。结果表明,这起疫情主要是由携带CDV的貉、貂调运而促进病毒传播感染引起。发病动物剖检病变以全身脏器出血性变化为特征,病情及病变严重程度依次为貉>狐狸>水貂。病理学变化特征为肺泡壁增厚,大量炎性细胞浸润,且在脱落肺泡上皮细胞、膀胱上皮细胞胞浆内偶见嗜酸性的球形包涵体,支气管上皮变形、坏死、脱落,淋巴细胞浸润;非化脓性脱髓鞘性脑炎;脾脏、肾脏、心脏、肝脏、胃和肠道有不同程度出血、坏死等病变。通过对发病狐、貉、貂的肺、肝、脑、膀胱等脏器病理学比较,在病变程度上水貂与狐狸、貉有差异。但是同一种动物,依病程、病型及有无并发症等因素,病理学变化也存在差异。
- 王珺玮任炜杰姜平王志亮郭培元
- 关键词：犬瘟热组织病理病理变化毛皮动物
- 猪链球菌2型溶血素基因与38KDa蛋白基因克隆及联合表达被引量：3
- 2007年
- 目的:研究有效的猪链球菌病疫苗。方法:以四川株猪链球菌2型基因组DNA为模板分别扩增溶血素基因和38KDa基因主要功能区基因;并经连接、克隆及酶切鉴定。分别构建原核表达载体pET32a-Sly、pET32a-38KDa,提取阳性克隆质粒分别进行双酶切并纯化,通过PCR串联两片断,将目的片断定向克隆到表达载体pET32a中,经测序正确后,重组质粒转化入大肠杆菌BL21 (DE3),用IPTG进行诱导表达。结果:重组菌菌体裂解物经SDS-PAGE电泳可检测到相对分子量约为60Ku的重组蛋白,表达产物经纯化后,免疫印迹法(Western-blotting)证实该重组蛋白可以与SS2阳性血清发生特异性反应。结论:本研究为重组蛋白的免疫保护应用奠定基础。
- 王华王君玮陈义平赵永刚徐天刚赵云玲张维王志亮
- 关键词：猪链球菌2型溶血素克隆
- 鸡病毒性关节炎病毒的分离与鉴定被引量：9
- 1996年
- 将疑似病毒性关节炎病鸡关节炎炎性渗出物处理之后，在ＳＰＦ鸡胚上传代，第６代时鸡胚开始死亡，第９代以后呈现规律死亡，胚体出血，绒毛膜水肿。以此尿囊液接种Ｖｅｒｏ细胞出现明显的合胞体病变，继而产生严重的细胞脱落。电镜观察，病毒粒子呈六角形，无囊膜，直径约７０ｎｍ。琼扩试验中，该病毒与关节炎病毒特异抗血清呈明显阳性反应。回归试验中，该病毒能使１日龄ＳＰＦ鸡雏在７２ｈ内发生严重的关节炎病变，最终全部死亡。理化特性鉴定证明其核酸为ＲＮＡ，能抵抗乙醚和氯仿。结果表明该分离物为鸡病毒性关节炎病毒。
- 朱万光杜元钊刘佩兰范根成王志亮
- 关键词：鸡病病毒性关节炎病毒
- 2005年中国新城疫病毒分子流行病学研究被引量：40
- 2006年
- 采用2005年从国内不同地区、不同宿主分离到的NDV分离株，选取其中具有代表性的83株，用RT-PCR技术扩增其F基因重要的功能区片段，进一步进行序列测定。序列分析表明所扩增的目的片段长度为535bp，序列测定结果已经登陆到GenBank，登陆号为DQ439866-DQ439948。参照国内外已发表的部分毒株的F基因序列，构建了NDV的遗传进化树，分析毒株间的遗传进化关系。通过遗传进化分析表明83株NDV分离株中有65株属于基因Ⅶ型，9株属于基因Ⅱ型，5株属于基因Ⅰ型，3株属于基因Ⅵ型，1株属于基因Ⅲ型。表明我国目前ND的流行情况比较复杂，其中基因Ⅶ型新城疫病毒所引起的新城疫在国内呈流行趋势，同时也存在其它基因型的散发，从而为我国目前新城疫的防治提供了科学的参考依据。
- 刘华雷王志亮吴延功郑东霞孙承英宋翠平左媛媛王伟华
- 关键词：新城疫病毒分子流行病学基因型
- 一种鉴别小反刍兽疫病毒疫苗株和基因4系野毒株的方法
- 本发明提供了一种荧光定量RT-PCR方法用于鉴别小反刍兽疫病毒疫苗毒株和基因4系野毒株，其包括检测小反刍兽疫病毒的引物以及鉴别疫苗株和基因4系野毒株的TaqMan探针。先提取待检样品中的RNA，将其加入到含有上述引物和探...
- 李林吴晓东王志亮刘春菊王清华
- 文献传递
