吴晓东
- 作品数:228 被引量:1,093H指数:16
- 供职机构:中国动物卫生与流行病学中心更多>>
- 发文基金:公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学哲学宗教更多>>
- 水貂朊蛋白前体基因的克隆与原核表达
- 通过设计克隆表达引物,PCR扩增了水貂朊蛋白前体基因,构建了水貂朊蛋白前体基因的表达载体并进行了测序分析.将所筛选出的阳性克隆质粒转化到表达菌BL21(DE3).纯化表达产物,WesternBlot鉴定表明获得了目的产物...
- 袁志栋王志亮刘雨田吴晓东刘海生
- 关键词:基因克隆基因序列原核表达PCR扩增
- 文献传递
- 德国牛精液输华携带施马伦贝格病毒入境风险评估被引量:3
- 2017年
- 为明确德国输入中国牛精液产品携带施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)的风险状况,基于世界动物卫生组织(OIE)风险评估的框架,结合贝叶斯统计推断的方法,开展德国输入中国牛精液产品携带施马伦贝格病毒的输入风险评估。释放评估显示,德国畜群存在施马伦贝格病毒病的释放风险,SBV的发生率分布在1.227e-006到2.297e-006之间(95%Confidence interval,CI),牛精液供体动物SBV阳性率分布在7.8e-008到5.2e-007之间(95%Bayesian credible interval,BCI)。精液输华携带SBV入境评估模拟显示,出口中国的一批次精液中可能的假阴性概率分布在5.4191e-007到0.0006之间(95%BCI),其意义为输入10 000批次的精液,假阴性检出的批次在97.5%概率内分布在6个批次以内,大于6个批次的假阴性概率小于2.5%,检出一个批次假阴性的概率大于73.77%。暴露评估显示,基于德国存在SBV释放风险,该国精液输入会对我国养殖畜群产生暴露风险。损失模拟显示,SBV一旦输入,保守估计损失超过100亿元人民币的可能性大于95%,超过320亿元人民币的概率小于10.71%,84.27%的置信度内(BCI)损失会在100亿元~320亿元之间。
- 张志诚吴晓东戈胜强徐天刚李兴元王树双王志亮
- 关键词:贝叶斯推断施马伦贝格病毒精液假阴性
- 蛋白质错误折叠循环扩增技术
- 2007年
- 目前发现有多种人类及动物疾病是由体内蛋白质的错误折叠引起的,其中朊毒粒病因具有传染性而备受关注。朊毒粒病研究的核心问题之一是正常细胞朊蛋白(PrPc)向异常致病朊毒粒(PrPSc)转变的机制。蛋白质错误折叠循环扩增技术(protein misfolding cyclic amplification,PMCA)就是最新发明的在体外诱导朊蛋白(PrPc)产生错误折叠生成朊毒粒(PrPSc)的技术。该文将概要介绍此项技术的原理、技术要点及在诊断与基础研究方面的应用前景。
- 周迅王志亮刘雨田吴晓东单虎
- 关键词:传染性海绵状脑病PRPSC错误折叠
- 中国西藏小反刍兽疫病毒China/Tib/Gei/07-30磷蛋白基因的分子特征及其编码蛋白特性分析被引量:4
- 2011年
- 对我国西藏小反刍兽疫病毒野生株China/Tib/Gej/07-30进行磷蛋白基因序列测定,并进行分子生物学特征分析。首先应用逆转录聚合酶链式反应扩增出病毒磷蛋白基因片段,对聚合酶链式反应产物进行直接测序,然后对测定的核苷酸和推测的氨基酸序列进行比较分析。小反刍兽疫病毒China/Tib/Gej/07-30磷蛋白基因由1 655个核苷酸组成,编码2个相互交叠的开放阅读框(ORF)。第一个ORF长度为1 530个核苷酸,编码的P蛋白长度为509个氨基酸。第二个ORF长度为534个核苷酸,编码的C蛋白长度为177个氨基酸。第一个ORF通过基因编辑在751位插入1个G核苷酸,转录生成第二个mRNA,长度为897个核苷酸,编码的V蛋白长度为298个氨基酸。小反刍兽疫病毒China/Tib/Gej/07-30的P蛋白与其他分离株氨基酸序列同源性为86.1%~97.3%,C蛋白氨基酸序列相似性为84.3%~94.9%,V蛋白为82.9%~96.3%。China/Tib/Gej/07-30的P蛋白第315~387位氨基酸是一段高度保守的七肽重复序列。
- 包静月赵文姬李林王志亮吴国珍吴晓东刘春菊王清华王君玮刘雨田李金明王英丽
- 关键词:小反刍兽疫病毒磷蛋白C蛋白
- 单抗捕捉ELISA检测猪附红细胞体血清抗体方法的建立被引量:7
- 2009年
- 在制备针对猪附红细胞体病的特异性单克隆抗体的基础上,建立了单抗捕捉快速检测猪附红细胞体病抗体的ELISA方法,并对影响ELISA结果的各项反应条件进行了优化。结果表明,猪附红细胞体腹水单抗的最佳稀释度为1∶20 000,猪附红细胞体病抗原工作质量浓度为4.088 mg/L,血清稀释度为1∶40,HRP标记的兔抗猪IgG的工作浓度为1∶5 000。待检血清和酶标二抗的反应时间均为37℃1 h;底物在室温显色时间为10 min。已建立的ELISA方法与PCR平行检测50份样本,总符合率为92%,表明该方法特异性强、快速、敏感性高。用该法检测了各地采集的171份血清,阳性率为40.4%,与镜检的符合率为59.2%;阴性率为47.4%,与镜检的符合率为66.7%,总符合率为67.3%。
- 张浩单虎吴延功张守富吴晓东王志亮刘佩兰朱绍辉
- 关键词:猪附红细胞体病单克隆抗体抗体检测
- 巴西非洲猪瘟根除计划的经验与借鉴被引量:40
- 2017年
- 非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒引起的猪的急性、烈性、高度接触性传染病。该病可通过软蜱传播,感染野猪后可造成其长期无临床症状下排毒且无有效疫苗可用,故该病属于很难根除的疫病。1978年该病传入巴西,巴西政府在付出了前所未有的代价后,历时7年最终根除该病。为此作者就巴西非洲猪瘟根除计划的相关情况进行详细介绍,以期为我国非洲猪瘟的防控提供参考。
- 戈胜强吴晓东李金明张志诚王金叶王志亮
- 关键词:非洲猪瘟
- 适应非洲猪瘟病毒增殖的传代细胞系研究进展
- 2023年
- 非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)疫苗研发以及深入研究的一个很大障碍在于缺少可稳定有效增殖ASFV的传代细胞系。尽管如此,目前可增殖ASFV的传代细胞系研究取得了一定的进展,本文对应用于ASFV增殖的传代细胞系的种类、优缺点以及在疫苗研发的应用现状进行简要综述,以期为可增殖ASFV的传代细胞系研究及ASFV疫苗研制提供参考。
- 路皓东左媛媛戈胜强韩乃君王振忠张永强张永强吴晓东蔡玉梅
- 关键词:非洲猪瘟病毒病毒增殖
- 免疫层析试纸条(ICS)检测禽流感抗体的研究
- 以纯化的禽流感(AIV)核蛋白作为捕捉抗原,金标兔抗鸡抗体作为金标二抗,建立检测禽流感血清抗体的胶体金免疫层析试纸条(ICS).对标准阳性血清不同滴度进行检测,ICS试验的敏感性高于琼脂扩散试验(AGP).特异性试验证实...
- 张喜悦陈义平冯娟吴晓东刘春菊王志亮
- 关键词:禽流感禽流感抗体
- 文献传递
- 免疫层析试纸条(ICS)检测禽流感抗体的研究
- 以纯化的禽流感(AIV)核蛋白作为捕捉抗原,金标兔抗鸡抗体作为金标二抗,建立检测禽流感血清抗体的胶体金免疫层析试纸条(ICS)。对标准阳性血清不同滴度进行检测,ICS试验的敏感性高于琼脂扩散试验(AGP)。特异性试验证实...
- 张喜悦陈义平冯娟吴晓东刘春菊王志亮
- 关键词:禽流感抗体
- 文献传递
- 单抗捕捉ELISA检测猪附红细胞体血清抗体方法的建立
- 2008年
- 张浩单虎吴延功张守富吴晓东王志亮刘佩兰朱绍辉
- 关键词:ELISA检测血清抗体抗体方法家畜附红细胞体病ELISA方法