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鲈鱼白细胞介素-8 cDNA序列的克隆与原核表达被引量：1: 2010年; 采用RT-PCR方法扩增和克隆了鲈鱼白细胞介素-8(LjIL-8)的编码阅读框。该编码阅读框由300个核苷酸组成,编码由99个氨基酸组成前体蛋白。LjIL-8氨基酸序列与哺乳动物和鱼类IL-8类似物的氨基酸同源性分别为23%～48%和25%～92%。氨基酸序列分析表明,N端存在一长23个氨基酸的信号肽,含有形成2个链内二硫键的4个半胱氨酸。分子进化分析表明,LjIL-8与欧洲鲈鱼的亲缘关系最近。将LjIL-8编码序列克隆到原核表达载体pET-28a(+),转化E.coli BL21(DE3)后用IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE检测结果表明,预期分子量大小的小分子蛋白在大肠杆菌中成功表达,Western-blotting检测结果显示,目的蛋白能与抗6×His单克隆抗体发生特异性反应。; 陈吉刚杜海韬熊娟毛芝娟杨季芳; 关键词：鲈鱼白细胞介素-8 克隆原核表达

投喂低聚木糖对草鱼肠道菌群的影响被引量：4: 2011年; 投喂添加0.1%、0.2%、0.4%和0.6%低聚木糖的基础饲料56 d,对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肠道菌群进行了研究。分别在投喂前(0 d)和投喂后的第14、28、42和56天取样,对草鱼肠道大肠杆菌(E.coli)、气单胞菌(Aeromonas)和双歧杆菌(Bifidobacterium)数量进行了分析。结果表明:基础饲料中添加不同浓度的低聚木糖对草鱼肠道菌群有一定影响,大肠杆菌数量在28 d达最低值,其中0.4%组减少的幅度最大,与对照组比较显著减少(P<0.05);气单胞菌数量均有减少但与对照组比较差异并不显著;双歧杆菌数量均有增加,其中0.4%组在第14天时差异显著(P<0.05)。因此,饲料中添加0.4%低聚木糖效果最佳,有利于草鱼肠道菌群保持健康的状态。; 熊娟吴志新张朋曲艺付思思刘佳佳陈孝煊; 关键词：低聚木糖草鱼肠道菌群

锯缘青蟹呼肠孤病毒感染的组织病理和超微病理观察被引量：3: 2011年; 运用石蜡切片及超薄切片技术,对感染呼肠孤病毒的锯缘青蟹组织进行组织病理和超微观察。石蜡切片结果显示:SsRV的侵染导致青蟹的肝胰腺、鳃、肠、心、胃和肌肉组织中产生明显组织病理变化,其中以肝胰腺、鳃组织和肠组织的病理变化最为明显,主要包括肝胰腺基底膜破损、肝细胞坏死,鳃腔堵塞,肠上皮细胞脱落,心肌与足肌纤维排列紊乱、断裂等病理变化。超薄切片结果显示:SsRV在肝胰腺、鳃、肠、心等组织广泛分布,说明SsRV组织嗜性广泛;SsRV可导致靶器官细胞核染色质凝结、电子密度增高、髓样小体和溶酶体产生、线粒体组织结构破坏和粗面内质网扩张变形等明显细胞病理学变化。; 熊娟陈吉刚杨季芳陈孝煊; 关键词：锯缘青蟹呼肠孤病毒组织病理超微病理

柱状黄杆菌间接ELISA快速检测方法的研究被引量：6: 2009年; 应用间接酶联免疫吸附试验(Indirect-ELISA)技术,建立了快速检测柱状黄杆菌的方法。结果显示:根据棋盘试验,确定最佳抗原包被浓度和免疫血清最佳工作浓度分别为1×106cfu/mL和1∶5000,酶标抗体最佳工作浓度为1∶10000。在该条件下,所建立的间接ELISA能检测出5×104cfu/mL的柱状黄杆菌,且与爱德华氏菌、哈维氏菌弧菌、嗜水气单胞菌、副溶血弧菌等常见鱼类致病菌无交叉反应。结果表明,所建立的间接ELISA可不经细菌培养而直接检测人工感染后草鱼鳃组织中的柱状黄杆菌,该方法对柱状黄杆菌的检测具有快速、敏感、特异、实用的优点。; 夏君吴志新张鹏熊娟庞丽娇陈孝煊; 关键词：柱状黄杆菌间接ELISA

一株锯缘青蟹呼肠孤病毒的分离及其RNA聚合酶序列分析: 一株从锯缘青蟹中分离的呼肠孤病毒(Scylla serrata reovirus,简写为SsRV),基因组为13个节段的双链RNA.通过电子显微镜观察结果表明：完整的病毒粒子直径为70nm,与呼肠孤科其他已知病毒粒子大小...; 熊娟陈吉刚; 关键词：呼肠孤病毒

低聚木糖对草鱼非特异性免疫功能的影响被引量：14: 2010年; 本试验旨在研究低聚木糖对草鱼非特异性免疫功能的影响。将525尾规格、体重基本一致的健康草鱼随机分为5组(每组设3个重复,每个重复35尾),分别饲喂在基础饲料中添加0(A0组)、1(A1组)、2(A2组)、4(A3组)和6 g/kg(A4组)低聚木糖的饲料。分别于试验第0天、第7天、第14天、第28天、第56天检测草鱼血液中白细胞吞噬活性,血清溶菌酶、超氧化物歧化酶活性和补体C3含量。在养殖试验(56 d)结束后连续攻毒14 d,计算各组试验鱼攻毒后死亡率。结果表明,与对照组相比,在整个试验期内,各试验组草鱼的各项免疫指标均有不同程度的提高。其中,A3组的白细胞吞噬活性,血清溶菌酶、超氧化物歧化酶活性和补体C3含量均显著高于A0组(P<0.05),并分别于第28天、第28天、第7天、第28天达到最大值,而且其攻毒后死亡率最低。结果提示,饲料中添加低聚木糖可提高草鱼非特异性免疫功能,其最佳添加量为4 g/kg。; 庞丽姣吴志新熊娟张朋余剑敏曲艺何超军杨丽陈孝煊; 关键词：低聚木糖草鱼非特异性免疫功能

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熊娟