沈卫锋
- 作品数:57 被引量:109H指数:5
- 供职机构:浙江省农业科学院更多>>
- 发文基金:浙江省科技攻关计划国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学环境科学与工程轻工技术与工程更多>>
- 牛磺酸在制备提高中华鳖抗病毒性腮腺炎病能力的药物中的应用
- 本发明属于动物免疫增强剂制药技术领域,尤其涉及牛磺酸在制备提高中华鳖抗病毒性腮腺炎病能力的药物中的应用。牛磺酸在制备中华鳖治疗和预防病毒性腮腺炎病的药物中的应用。本发明所述的中华鳖为稚鳖,每只重量为20克的稚鳖以120‑...
- 沈卫锋刘莉吕孙建郭琦翁宏飚韩明明楼宝
- 虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei)SWP2基因的克隆、表达及其在虾类病害检测中的应用
- 2021年
- 虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)是虾类养殖过程中一种非常重要的病原微生物。目前常用的EHP检测方法是以核糖体18S基因为靶基因的PCR检测,但由于18S基因的高度保守性,该方法存在一定的非特异性扩增问题。本研究利用电子克隆方法,得到了特异性较高的EHP孢壁蛋白2(spore wall protein 2,SWP2)基因。该基因的cDNA全长为1019 bp,开放阅读框全长687 bp,编码229个氨基酸,预测相对分子质量为26.32 ku,5′非编码区为120 bp,3′非编码区为179 bp,系统进化分析表明与毕氏肠孢虫和绒螯蟹肠孢虫具有较近的亲缘关系。构建了重组表达载体pET15b-SWP2,利用原核表达得到SWP2蛋白,相对分子质量约为28 ku,并制备了该蛋白的单克隆抗体。采用常规PCR及Western blot方法对市售的商品虾进行了EHP感染情况检测,结果显示,两种方法均能准确地进行检测分析。本研究结果为虾农肝肠微孢子虫病的诊断提供了技术支撑,同时为SWP2蛋白功能的研究打下了基础。
- 沈卫锋郭琦刘莉牛宝龙翁宏飚楼宝
- 关键词:蛋白表达单克隆抗体病害检测
- 棉铃虫腺苷酸转移酶基因的克隆与分析被引量:3
- 2008年
- 腺苷酸转移酶(ANT)是线粒体内膜上负责能量分子传导的转运蛋白,在细胞凋亡调控网络中有重要作用。本研究以棉铃虫幼虫组织的mRNA为模板,根据鳞翅目昆虫ant基因编码区保守序列设计引物,进行RT-PCR分析,同时结合5′、3′RACE方法扩增出棉铃虫ant基因的全长cDNA序列,cDNA全长为1190bp(GenBank登录号AY253868),具有完整的开放阅读框架(ORF,133~1033bp),编码蛋白为300个氨基酸,其中N端22个氨基酸为信号肽,引导ANT蛋白定位于线粒体内膜。该蛋白具有3个保守的线粒体穿膜功能结构域,形成能量分子传导的转运通道,催化细胞质中ADP和线粒体内ATP间进行跨膜交换。通过与其他昆虫的腺苷酸转移酶蛋白序列比较,发现该基因具有高度的保守性,氨基酸序列同源性都在90%左右。
- 牛宝龙翁宏飚何丽华沈卫锋齐晓朋刘岩孟智启
- 关键词:棉铃虫克隆
- 一种对虾肝肠微孢子虫病的高灵敏度的靶基因、引物对、试剂盒和检测方法
- 本发本发明属于农业和动物检疫技术领域,具体涉及一种对虾肝肠微孢子虫病的高灵敏度的靶基因、引物对、试剂盒和检测方法。一种用于对虾肝肠微孢子虫病高灵敏度检测的靶基因;该靶基因的序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还提供了...
- 沈卫锋牛宝龙翁宏飚杨颖
- 文献传递
- 一种基于PCR和测序技术的罗氏沼虾性别鉴定的方法
- 本发明公开了一种基于PCR和测序技术的罗氏沼虾性别鉴定的方法,该方法包括以下步骤:(1)以提取到的罗氏沼虾基因组DNA为模板进行PCR扩增,其中,扩增引物为:MrW‑F:5'‑CCCAACAGTTATGTTAGTCTAA...
- 任晋东楼宝牛宝龙沈卫锋翁宏飚杨颖俞奇力
- 文献传递
- 松材线虫病RNA干涉研究及其关键防控技术研发与应用
- 孟智启蒋平牛宝龙吾中良沈卫锋牟建军赵锦年翁宏飚陈卫平何丽华刘岩孙薇钟跃良王守先程洪宝齐晓朋胡荣达牟爱友
- 本研究以松材线虫病的病原--松材线虫及其媒介昆虫松褐天牛为研究对象,分别克隆了松材线虫、松褐天牛生长发育的关键基因。采用RNA干涉技术,突破了对松材线虫和松褐天牛生长发育相关基因的特异性抑制的关键技术;首次成功构建灰葡萄...
- 关键词:
- 关键词:RNA松褐天牛松材线虫病
- 表达小黄鱼生长激素的转基因家蚕品系构建
- 2022年
- 构建转小黄鱼生长激素基因的家蚕新品系,外源表达鱼生长激素。通过检索小黄鱼转录组序列,获得小黄鱼生长激素和转铁蛋白的编码序列,设计并合成以接头序列连接,N端为生长激素、C端为转铁蛋白的融合蛋白编码框。利用piggyBac转座子介导的转基因方法,将融合基因转入家蚕基因组中,转育得到可表达小黄鱼生长激素且人工饲料摄食性较好的转基因家蚕品系皓月-Fc,蛹体中小黄鱼生长激素表达量最高约为0.27 ng/mg,蚁蚕24 h疏毛率约为85%。构建的转基因家蚕品系为下一步小黄鱼功能性饲料添加剂的研发打下基础。
- 翁宏飚王红芬沈卫锋牛宝龙楼宝
- 关键词:家蚕生物反应器小黄鱼生长激素转基因
- 棉铃虫磷酸甘油醛异构酶基因Hatpi的克隆及分析(英文)
- 2009年
- 棉铃虫Helicoverpa armigera是一种严重危害棉花等经济作物的鳞翅目害虫,开展分子水平研究对防控害虫将具有重要参考意义。本研究利用RACE(rapid amplification of cDNA ends)技术克隆了棉铃虫磷酸甘油醛异构酶(triosephosphate isomerase)基因Hatpi(GenBank登录号为AY736358)。该基因cDNA全长为1149bp,编码248个氨基酸,预测等电点为5.82,分子量为16.4kD。HaTPI含有磷酸甘油醛异构酶类蛋白的典型(βα)8结构、保守的活性位点(Lys12,His94和Glu165)和小肽序列(AYEPVWAIGTG和GGASLKPEF)等。RT-PCR检测分析发现Hatpi在棉铃虫卵巢、幼虫、蛹、成虫均有表达,提示该基因可能在棉铃虫的不同发育阶段均起作用。
- 刘岩齐晓朋牛宝龙翁宏飚陈金娥何丽华沈卫锋孟智启
- 关键词:棉铃虫基因RACE
- 虾肝肠胞虫研究进展被引量:1
- 2020年
- 虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)是造成养殖虾类生长迟缓症状的主要病原。本文介绍EHP的分类地位、显微特征、发现史,综述传播途径、检测方法和防治技术研究进展。
- 郭琦沈卫锋楼宝
- 关键词:对虾微孢子虫
- 一种抗SWP2蛋白的单克隆细胞株及其应用
- 一种抗SWP2蛋白的单克隆细胞株及其应用,属于农业和动物检疫技术领域。本发明一方面提供了一种新的抗SWP2蛋白的单克隆细胞株和该单克隆细胞株分泌的SWP2单克隆抗体,另一方面提供了上述单克隆细胞株和SWP2单克隆抗体在制...
- 沈卫锋牛宝龙楼宝
- 文献传递