翁宏飚 作品数:86 被引量:274 H指数:10 供职机构: 浙江省农业科学院 更多>> 发文基金: 浙江省科技攻关计划 国家自然科学基金 浙江省科技计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 经济管理 更多>>
家蚕MLP基因的克隆及其结构分析 被引量:2 2007年 利用生物信息学的方法快速获得家蚕MLP(Muscle LIM protein,MLP)基因cDNA电子序列,经RT-PCR生物验证正确,登录GenBank(No.DQ311195)。MLP基因cDNA长2327bp,ORF全长1485bp,编码产生494个氨基酸。该MLP基因组DNA含有11个外显子,10个内含子,所有内含子/外显子边界都符合典型的GT/AG剪切模式。MLP基因编码的蛋白富含Gly(14.4%),分子量约为53.03kDa,等电点(PI)为8.29。通过BLAST分析发现该基因编码的家蚕肌肉LIM蛋白,含有5个保守的LIM结构域,家蚕的另一种LIM蛋白(AAR23823)含一个LIM结构域,两者可能是通过可变剪切产生;后者可能通过竞争作用调节前者在肌细胞中的功能。MLP的克隆为进一步研究其体内功能奠定了基础。 刘岩 牛宝龙 翁宏飚 沈卫锋 何丽华 齐晓朋 孟智启关键词:家蚕 MLP LIM结构域 一种大规模饲养棉铃虫的方法 本发明提供一种大规模饲养棉铃虫的方法,依次包括以下步骤:步骤A:对卵面进行消毒保护;步骤B:待虫卵孵化后进行幼虫饲养至化蛹;步骤C:对蛹体进行消毒保护;步骤D:蛹体化蛾配对产卵。能够在棉铃虫大规模人工饲养过程中降低发病率... 何丽华 牛宝龙 翁宏飚 顾卫平 孟智启抗菌肽Cecropin B 在小鼠创面抗铜绿假单孢菌感染作用的研究 铜绿假单胞菌是烧伤及危重病常见的致病菌,且表现出对多种抗生素的耐药性。近年发现一种小分子的多肽类物质-抗菌肽(AMPs)具有广谱抗菌活性,且只对原核细胞有作用,而对真核细胞无害,具有与抗生素不同的杀菌机制、不易产生耐药性... 任海涛 韩春茂 张嵘 徐志江 孟智启 翁宏飚 牛宝龙关键词:抗菌肽 铜绿假单孢菌 抗菌活性 天蚕素 文献传递 ^(60)Coγ射线辐照对马尾松毛虫繁殖力的影响 被引量:5 2009年 人工饲养的马尾松毛虫老熟蛹经10~80 Gy剂量的60Coγ射线辐射后,调查辐射对松毛虫繁殖力的影响。结果表明老熟蛹辐照对成虫寿命和产卵量影响不明显,辐照后的雌性成虫与对照雄虫交尾所产卵的孵化率随着辐照剂量的加大而明显降低,经80 Gy以下剂量辐照的雄性成虫与对照雌虫交尾所产卵的孵化率随着辐照剂量的加大没有明显的下降。人工饲养的马尾松毛虫老熟蛹经80 Gy以上剂量辐照对雌雄成虫的繁殖力都有显著影响,对雌性的繁殖力影响大于雄性。 何丽华 翁宏飚 牛宝龙 沈卫锋 刘岩 孟智启关键词:马尾松毛虫 辐照 人工饲养 棉铃虫HaKettin1基因的全长cDNA克隆、序列分析和表达谱 被引量:3 2008年 【目的】为了克隆棉铃虫Helicoverpa armigera编码肌肉蛋白Kettin基因的全长cDNA序列以及鉴定该基因在棉铃虫发育周期内的表达模式。【方法】利用兼并引物,通过分段RT-PCR和5′-和3′-RACE的方法克隆全长cDNA序列。利用半定量RT-PCR进行表达谱分析。【结果】编码棉铃虫Kettin蛋白的基因HaKettin1全长cDNA序列为13805bp,包含一个13365bp的开放阅读框,编码4454个氨基酸,蛋白分子量约为504.3kD。组织表达结果显示HaKettin1基因在棉铃虫的整个生育周期都有表达,幼虫期的表达尤为显著。【结论】HaKettin1与家蚕的Kettin蛋白具有90%的同源性,表明鳞翅目昆虫的Kettin蛋白之间具有很高的保守性。表达谱结果显示HaKettin1基因在棉铃虫的整个发育过程中都发挥重要作用。 齐晓朋 牛宝龙 何丽华 翁宏飚 刘岩 沈卫峰 孟智启关键词:棉铃虫 克隆 结构域 表达谱 家蚕抗菌肽-死亡素杂合肽基因在大肠杆菌中的克隆与表达 被引量:15 2002年 A 44-residue hybrid peptide (CB (1-24)-Arg-Ser-Tyr-Tan (4-21)) incorporating 1-24 residues of cecropin B (CB) and 4-21 residues of thanatin (Tan) was designed and constructed. The CB-Tan gene was cloned into expression plasmid pGEX-3X and expressed in E.coli BL21. The fusion protein was purified by affinity chromatography. After digested with enterokinase the gene product released with antibacterial activity and gave one band in Tricine-SDS-PAGE. 翁宏飚 牛宝龙 孟智启 徐孟奎关键词:家蚕 大肠杆菌 CEC 抗菌活性 松毛虫DpKettin基因片段的克隆与初步定位研究 2007年 对于ZW型鳞翅目昆虫,雄性为ZZ,雌性为ZW;细胞内Z染色体数与常染色体组数之比在雌雄间存在差异,雄性为2Z∶2A=1.0,雌性为Z∶2A=0.5,如果某物种一个基因(假如K基因)位于Z染色体上,另一个基因(假如N基因)位于常染色体上,则雄体中2K∶2N=1.0,雌体中K∶2N=0.5。研究利用家蚕、棉铃虫等昆虫Kettin基因序列,克隆了松毛虫的同源基因(DpKettin)片段,并采用荧光定量PCR技术,以松毛虫的ANT基因为参照基因,检测松毛虫雌雄不同个体间DpKettin基因与腺苷酸转移酶基因(ANT)的拷贝数之比,结果表明:雄体DpKettin∶ANT=1.0,雌体DpKettin∶ANT=0.5,说明DpKettin基因位于松毛虫Z染色体上。 牛宝龙 翁宏飚 何丽华 沈卫锋 孟智启关键词:荧光定量PCR Z染色体 松毛虫 水产口服DNA疫苗研究进展 被引量:1 2020年 水产病害是阻碍水产养殖业健康可持续发展的重要因子,渔用疫苗的研发和应用是预防水产动物疾病最安全有效的措施。DNA疫苗是20世纪90年代初出现的一种新型疫苗,与传统的疫苗相比,DNA疫苗具有免疫效果好、生产成本低、保存方便等优点,是疫苗研究的热点,而口服免疫途径具有适用性广、受体鱼应激反应低等优点,是较为理想的免疫方式。本文综述口服疫苗的免疫机制及水产DNA疫苗的研究现状,旨为研究安全、高效的新型口服疫苗提供一定的参考信息。 翁宏飚 沈卫锋 牛宝龙关键词:口服 DNA疫苗 免疫机制 安全性 家蚕抗菌肽-死亡素杂合肽基因在大肠杆菌中的克隆与表达 设计并构建了家蚕抗菌肽-死亡肽杂合肽基因,编码44个氨基酸残基.将杂合肽基因克隆到表达质粒pGEX-3X中,在E.coil中进行融合表达,表达产物经亲和层析后,用肠激酶酶解,得到了具有抗菌活性的杂合肽CB-Tan. 翁宏飚 牛宝龙 孟智启关键词:抗菌肽 抗菌活性 文献传递 一种家蚕胚胎发育因子的分子克隆及分析 2007年 利用表达序列标签(Expression sequence tag,EST)和电子克隆等技术,克隆家蚕BmEDF基因cDNA电子序列,经RT-PCR生物验证正确,登录GenBank(DQ443161)。BmEDF基因cDNA长1098bp,ORF全长810bp,编码产生269个氨基酸。BmEDF基因编码的蛋白分子量约为30.7kDa,等电点(PI)为9.16。本研究将对今后分子水平分析胚胎发育提供研究基础。 刘岩 翁宏飚 何丽华 牛宝龙 沈卫锋 齐小朋 孟智启关键词:家蚕 胚胎发育 表达序列标签