汪苏敏
- 作品数：6 被引量：23H指数：3
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金烧伤与复合伤国家重点实验室开放基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人端粒酶逆转录酶上调Cdx2表达促进胃黏膜肠化生被引量：1
- 2014年
- 目的探讨人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)在胃黏膜肠化生的作用及其可能存在的分子机制。方法 hTERT真核表达质粒构建成功后,用脂质体转染法转染人胃癌MKN45细胞。应用qPCR技术从RNA水平检测转染前后相关肠化生基因(Cdx1、Cdx2和Cdx4)的改变;进一步采用Western blot技术从蛋白水平证实其表达变化;继而构建Cdx2基因启动子,采用双荧光素酶实验分析hTERT与Cdx2的作用机制;采用Co-IP证实hTERT与p65结合情况;加入NF-κB抑制剂后,双荧光素酶实验和Western blot检测Cdx2表达变化情况。结果转染MKN45细胞hTERT基因后,qPCR证实肠化生相关基因Cdx1、Cdx2 mRNA表达明显上调,而Cdx4 mRNA则无明显变化;Western blot证实过表达hTERT后只有Cdx2的蛋白表达上调;双萤光素酶报告实验证实与对照组相比,hTERT组Cdx2的启动子活性明显增加(P<0.05);免疫共沉淀(CO-IP)实验证实hTERT与NF-κB亚基p65存在蛋白-蛋白相互作用;另外双荧光素酶实验和Western blot表明NF-κB抑制剂(Bay78-1102)能有效抑制hTERT对Cdx2的启动子的活性,并下调Cdx2蛋白的表达。结论 hTERT可以通过活化NF-κB信号通路促进Cdx2的表达,从而促进胃黏膜的肠化生的发生。
- 陈柏君周源肖煜峰胡长江谢睿何兵汪苏敏吴玉云凌贤龙杨仕明
- 关键词：人端粒酶逆转录酶肠上皮化生胃黏膜胃黏膜癌前病变
- 翻转课堂在临床教学中的实践及探索被引量：10
- 2019年
- 临床医学课程是医学生学习的必备课程,是对基础医学理论知识的进一步拓展和延伸,具有很强的实践性和应用性。而医学生的培养必须以临床技能为核心,同时也应重视学生的创新性、科研性及自主学习能力。信息化技术的不断发展,使得医学生获取知识的途径及学习方式多元化,而传统的以讲堂授课为主的教育模式难以满足现代医学教学的要求[1]。
- 唐波张琳景汪苏敏唐黎杨敏雷媛媛刘姚江汤旭东杨仕明
- 关键词：临床教学
- miR-1182调控胃癌细胞人端粒酶反转录酶的分子机制及其对迁移能力的影响被引量：4
- 2014年
- 目的研究miR-1182在胃癌细胞中调控人端粒酶反转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)的机制及对其迁移能力的影响。方法胃癌细胞MKN28中转染miR-1182类似物,qRT-PCR检测转染后细胞miR-1182的相对表达量,Western blot检测转染后细胞hTERT的表达变化;进一步通过生物信息学预测miR-1182与hTERT mRNA的结合位点,双荧光素酶实验分析miR-1182对hTERT mRNA的作用机制;Transwell实验检测转染miR-1182类似物对MKN28细胞体外迁移能力的影响。结果 qRT-PCR表明miR-1182组的miR-1182的相对表达量(10.168±2.645)明显高于对照组(1.008±0.167)(P<0.01)。Western blot结果显示在胃癌细胞系中过表达miR-1182后,hTERT的蛋白水平下调。双荧光素酶实验表明miR-1182可与hTERT mRNA的ORF区结合,且其主要结合部位为hTERT mRNA的ORF-1;在Transwell迁移实验中,miR-1182类似物转染细胞后,miR-1182组穿膜细胞数为(23.333±4.509)/视野,对照组穿膜细胞数为(71.000±4.582)/视野,miR-1182组细胞迁移能力明显低于对照组(P<0.01)。结论 miR-1182通过与胃癌细胞hTERT的ORF区结合,从而在转录后水平抑制hTERT的表达,并发现其可抑制胃癌细胞的迁移能力。
- 张丹郝宁波唐波吕沐瀚谢睿胡长江汪苏敏杨仕明
- 关键词：端粒酶反转录酶胃肿瘤肿瘤转移
- 抗肿瘤转移肝素酶特异性抗体的筛选及鉴定被引量：3
- 2011年
- 目的通过鉴定制备的人肝素酶单克隆抗体,筛选出具有抗肿瘤转移特异性的单克隆抗体株,并大量制备。方法采用Western blot技术,以HepG2、SGC-7901、MKN45、SW480、U2OS、MCF-7细胞总蛋白为样本,对已制备的3株人肝素酶单克隆抗体进行初步鉴定,筛选出能够与肝素酶蛋白特异性结合的抗体,并采用免疫细胞化学技术进一步验证筛选出的抗体特异性,然后通过Transwell体外侵袭实验观察筛选出的肝素酶单克隆抗体对肿瘤转移的抑制作用。结果已制备的3株人肝素酶单克隆抗体均能与不同肿瘤细胞肝素酶蛋白结合,其中12号抗体与商品化肝素酶单克隆抗体在MCF-7细胞中均检测出肝素酶弱阳性表达,其特异性最佳;免疫细胞化学结果也显示在SGC-7901、HepG2、MKN45、SW480和U2OS细胞中12号抗体能检测出肝素酶阳性表达,而在MCF-7细胞中检测出肝素酶弱阳性表达;Transwell体外侵袭实验结果显示12号抗体(100μg,浓度约1 mg/ml)作用于SGC-7901、HepG2、MKN45、SW480和U2OS细胞48 h后,其穿膜细胞数与正常小鼠IgG对照组相比明显减少(P<0.05)。结论纯化制备的人肝素酶单克隆抗体能够与肿瘤细胞表达的肝素酶蛋白特异性结合,并通过抑制肝素酶蛋白达到抑制肿瘤细胞的扩散与转移。
- 李宁陈伟张亚飞黎川吴玉云汪苏敏房殿春杨仕明
- 关键词：肝素酶单克隆抗体抗肿瘤转移
- 骨髓来源细胞参与肝脏损伤的修复被引量：4
- 2011年
- 目的探讨小鼠骨髓来源干细胞（bone marrow stem cells,BMSCs）在体内分化为肝细胞的可行性及BMSCs是否参与肝功能受损的修复。方法 30只雌性C57BL/6小鼠全身一次性接受10 Gy60Co射线照射后,立即接受同品系雄性小鼠骨髓干细胞移植。移植后21 d后以CCl4致骨髓嵌合小鼠肝功能受损,并于CCl4致伤后第2、3、4、7、14、21、28天取骨髓嵌合小鼠肝脏,冰冻切片行Y染色体FISH和白蛋白（albumin,ALB）免疫荧光双标染色法,检测BMSC阳性细胞在受体小鼠肝内的分化情况,ELISA法检测肝脏基质细胞衍生因子-1（stromal cell-derived factor1,SDF-1）及其趋化因子受体（CXCR-4）、肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）、干细胞因子（stem cell factor,SCF）的表达。结果伤后2、3、4、7、14、21、28 d骨髓嵌合小鼠肝内皆可见FISH和ALB共表达的双阳性细胞,计数Y染色体FISH与ALB双阳性的细胞数量为3.763%~5.578%。ELISA法检测相关干细胞因子发现,在肝损伤后同一批次各时相点肝脏组织匀浆标本中SDF-1、CXCR-4、SCF、HGF 4种因子均呈现增高趋势,并在肝损伤第21天达到高峰表现,与其他时相点相比显著增加（P〈0.05）,同FISH与ALB荧光双标记共表达计数结果一致。结论 BMSCs可通过直接分化为肝细胞及分泌相关细胞因子间接促进受体肝脏干细胞增殖参与受损肝脏的修复。
- 李长珠梁光萍汤旭东吴玉云汪苏敏赵晶京房殿春杨仕明
- 关键词：肝细胞
- hTERT调控Gli1的表达及其对胃癌细胞侵袭迁移的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse enzyme,h TERT)调控Gli1的表达及其对胃癌细胞侵袭迁移的影响。方法采用p IRES2载体构建h TERT过表达质粒,qRT-PCR和Western blot检测h TERT对Gli1表达的影响;构建Gli1启动子荧光素酶质粒,检测h TERT对Gli1启动子荧光素酶活性的影响;构建Gli1干扰质粒,并与h TERT过表达质粒共转染SGC-7901细胞;Transwell实验和划痕实验检测胃癌细胞的侵袭、迁移能力的变化;结果过表达h TERT显著上调Gli1 mRNA和蛋白的表达(P<0.01),并显著增加Gli1启动子荧光素酶的活性(P<0.01);而si-Gli1显著抑制Gli1的表达;干扰Gli1的表达,减弱h TERT对胃癌细胞侵袭、迁移能力的影响。结论 h TERT通过促进Gli1的转录,增加Gli1的表达,进而增强胃癌细胞的侵袭迁移。
- 李阳张丹胡长江唐波覃勇汪苏敏吴玉云董辉杨仕明
- 关键词：人端粒酶逆转录酶GLI1胃癌转录调控
