汤黎明
- 作品数：15 被引量：66H指数：5
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 真核绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C3-B7-2的构建被引量：1
- 2005年
- 目的:构建含人B7-2基因的绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C3-B7-2。方法:应用RT-PCR、巢式PCR方法从重症肌无力患者胸腺组织中扩增出人B7-2cDNA基因片段,经回收、纯化、酶切后,依次连接到质粒pGEM-T和pEGFP-C3上。结果与结论:酶切及测序证实成功构建了克隆载体pGEM-B7-2和真核绿色荧光表达载体pEGFP-C3-B7-2。
- 路静王明臣赵军宋谦崔自由赵继敏杨洪艳黄幼田汤黎明赵国强董子明
- 关键词：绿色荧光蛋白真核表达载体克隆
- 人芽囊原虫感染小鼠肠黏膜超微病理变化观察被引量：3
- 2005年
- 目的探讨人芽囊原虫人工感染后对肠黏膜的损伤情况。方法将昆明小鼠60只随机分为5组,一组为空白对照,其它四组分别经口感染104、204、304、404剂量的虫体。7天后处死动物,取回盲部,用电镜观察肠黏膜超微结构的改变。结果扫描电镜和透射电镜下观察,空白对照组小鼠未发现虫体寄生,肠黏膜结构正常。感染104、204剂量的小鼠有少量的虫体寄生,黏膜上皮细胞破损,部分微绒毛脱落,线粒体局部水肿,嵴排列紊乱。感染304、404剂量的小鼠可见有大量虫体侵入肠黏膜,黏膜上皮细胞破损严重,呈网状,蜂窝状,并有成片的肠黏膜脱落。线粒体膜开始溶解,嵴断裂、扭曲、黏连,呈空泡样变,粗面内质网囊泡变,黏膜表面细胞间的紧密连接融合。结论人芽囊原虫对回盲部肠黏膜有损伤作用,且与感染剂量有关,随感染剂量的增加病理变化越明显。
- 王东汤黎明李文苏云普张红卫薛长贵
- 关键词：人芽囊原虫扫描电镜透射电镜
- 家兔失血性休克的实验教学探讨被引量：2
- 2017年
- 家兔失血性休克实验是医学病理生理学实验教学中的重要内容。文章探讨如何提高实验教学水平、帮助学生成功复制实验模型、让学生在实验操作中加深对休克理论知识的理解,增强学生探索知识的兴趣并培养临床观察能力。
- 赵继敏江亚南刘康栋陈新焕杨婉景杨洪艳许燕汤黎明黄幼田
- 关键词：病理生理学失血性休克实验教学
- 人CD154基因真核表达载体的构建及在Eca109细胞中的表达
- 2005年
- 目的:构建人CD154基因真核表达质粒pcDNA3.1-CD154,初步观察转染该质粒后Eca109细胞的细胞生物学特性。方法:人外周血单个核细胞体外经PHA激活后提取总RNA,用RT-PCR技术扩增人CD154cDNA全长并构建真核表达质粒pcDNA3.1-CD154。用LipofectamineTM2000介导pcDNA3.1-CD154质粒转染食管癌Eca109细胞株,RT-PCR检测转染细胞中CD154mRNA的表达,观察细胞生长特征。结果:用T7/SP6通用引物测序证实重组质粒中插入片段为正向插入的人CD154基因。pcDNA3.1-CD154转染Eca109细胞后细胞异型性明显改善,生长速率减慢。结论:pcDNA3.1-CD154构建成功;转染该质粒的Eca109细胞生物学特性发生改变。
- 汤黎明赵勤何炜朱涵王志举张文豪赵国强董子明
- 关键词：CD154真核表达载体ECA109细胞
- 人B7-2基因修饰的食管癌细胞瘤苗抗肿瘤的免疫效应被引量：3
- 2005年
- 目的:研究人B7-2基因修饰的食管癌细胞作为瘤苗的抗肿瘤作用。方法:将真核荧光表达载体pEGFP-C3-B7-2,通过脂质体转染技术转染人食管癌细胞株EC9706。外周血来源的树突状细胞(DC)负载肿瘤抗原后,与自体T淋巴细胞共培养3d,获得细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测CTL对转染和未转染pEGFP-C3-B7-2的人食管癌细胞EC9706的杀伤活性。结果:CTL对转染pEGFP-C3-B7-2的肿瘤细胞的杀伤活性大于转染pEGFP-C3和未转染细胞的杀伤活性(P<0.05)。结论:人B7-2基因修饰的EC9706肿瘤细胞瘤苗,可诱导出明显的抗EC9706细胞的免疫效应。
- 赵国强汤黎明路静赵军宋谦崔自由杨洪艳赵继敏黄幼田董子明
- 关键词：绿色荧光蛋白肿瘤疫苗免疫效应
- 人野生型DNA聚合酶β在NIH3T3细胞中的定位
- 2005年
- 目的:研究人野生型DNA聚合酶β(wtDNApolβ)在NIH3T3细胞内的定位。方法:将携带人wtDNApolβ的真核绿色荧光表达载体pEGFP-C3-polβ,用脂质体介导的方法转染NIH3T3细胞株,用荧光倒置显微镜观察转染细胞,观察wtpEGFP-C3-polβ融合基因表达。以转染空质粒pEGFP-C3的NIH3T3细胞为对照。结果:转染细胞均有GFP表达,说明转染成功。转染pEGFP-C3-polβ的细胞胞核荧光强度较胞浆强,而空质粒转染细胞胞浆胞核荧光强度无差别。结论:wtDNApolβ在NIH3T3细胞中定位于胞核内。
- 赵军赵勤赵国强秦冰路静宋谦崔自由赵继敏杨红艳黄幼田汤黎明董子明
- 关键词：转染蛋白质定位NIH3T3细胞
- 食管正常、癌前及癌变组织中DNA聚合酶βmRNA检测被引量：7
- 2005年
- 目的:观察不同演进过程食管组织中DNA聚合酶β(polβ)mRNA的表达。方法:采用含有内对照的半定量RT-PCR方法,检测31例食管浸润癌(鳞癌27例,腺癌4例)、4例原位癌、6例不典型增生以及31例正常食管黏膜组织中polβmRNA的表达。结果:食管浸润癌、原位癌和不典型增生组织中polβmRNA的表达水平差异无统计学意义(P>0.05),但均高于正常食管黏膜组织中的表达水平(P均<0.05)。食管鳞癌和腺癌组织中polβmR-NA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结果:在食管癌组织中存在着polβ的高表达,且发生于癌变早期。
- 赵国强王涛赵明耀何炜杨红艳王明臣汤黎明赵继敏赵勤董子明
- 关键词：DNA聚合酶Β食管肿瘤
- 人食管鳞状细胞癌基因表达变化的cDNA芯片研究
- 李沛凌志强路红显冯婷马俊芬乔宪丽王慧荣赵继敏汤黎明刘斌董子明张晓艳
- 主要内容：为了鉴定涉及食管癌发生的分子和可用作诊断标志物及新药和免疫疗法靶标的分子，该研究采用含886个肿瘤相关基因的Cdna微阵列，利用项目建立的LCM-GMA-microArray(激光捕获显微分离-高可信度全基因组...
- 关键词：
- 关键词：食管鳞状细胞癌基因表达免疫疗法
- 小鼠内源性抗原提呈树突状细胞疫苗的抗瘤作用被引量：6
- 2002年
- 目的 :将pcDNA3 hCEA真核表达质粒和肿瘤来源的RNA分别转染小鼠骨髓树突状细胞 (dendriticcell,DC) ,观察内源性抗原提呈DC疫苗诱导BALB/C小鼠对CT2 6 hCEA+ 的抗肿瘤免疫效应。方法 :采用细胞因子rmGM CSF和rmIL 4诱导培养法制备小鼠骨髓DC ,利用Lipofectamine将pcDNA3 hCEA和肿瘤来源的RNA分别转染DC ,制备能够内源性表达CEA的DC疫苗。使用DC疫苗预防免疫BALB/C小鼠 ,观察其对于荷CT2 6 hCEA+ 小鼠的抗肿瘤效应。结果 :内源性抗原提呈DC疫苗明显延长荷CT2 6 hCEA+ 瘤小鼠生存期 ;与其他方法制备的DC疫苗相比 ,有较强的针对性抗肿瘤免疫效应和较长的持续效应。结论 :对于免疫逃逸的肿瘤 。
- 黄幼田赵明耀杨洪艳郑智敏马俊芬汤黎明董子明
- 关键词：小鼠树突状细胞抗瘤作用免疫逃逸
- 小鼠一体多瘤模型复制与S180脉冲致敏树突状细胞抗瘤特异性观察被引量：2
- 2002年
- 目的 :复制一种新的荷瘤动物模型 ,同一小鼠皮下 ,不同部位荷 3种不同类型肿瘤 (S180、H2 2、EAC瘤株 ) ,继之以一种肿瘤抗原 (冻融S180细胞 )脉冲刺激的树突状细胞 (DC)免疫治疗 ,观察其效应。方法 :昆明小鼠随机分为 5组 ,6只 /组 ,1、2、3组分别荷单一瘤株S180、H2 2和EAC瘤细胞 ;4、5组荷以上 3种瘤株 ;所接种的 3种瘤细胞数均为 6× 10 6,接种部位二侧后腿腋下和背部 ,分别交替接种 3种瘤细胞株 ,其中每 2只接种部位相同 ,第 5组另接受肿瘤抗原 (冻融S180细胞 )脉冲刺激DC行免疫治疗。观察接种后瘤体大小和特异的淋巴细胞毒杀伤活性(CTL)。结果 :1～ 4组组间相比 ,单一荷瘤与复合荷瘤的相同瘤株在肿瘤生长速度上基本相同 (P >0 .0 5 ) ,4组荷瘤鼠生存期相近 (P >0 .0 5 )。与 1～ 4组荷同一瘤株鼠比较 ,脉冲DC免疫治疗鼠 (第 5组 ) ,S180、H2 2和EAC瘤株的增生速度明显减缓 ,荷瘤第 3周时 ,S180、H2 2增生减缓更为明显 (P <0 .0 1) ;EAC瘤株亦呈同样变化趋势 ,但幅度较小。CTL结果显示 ,T淋巴细胞对S180和H2 2瘤细胞株均有很强杀伤活性 (78% ,72 % ) ,而对EAC瘤株杀伤活性较弱 (34% )。结论 :同一小鼠体内同时荷 3种移植瘤株即一体多瘤动物模型可行 ;
- 赵明耀杨洪艳黄幼田郑智敏陈宁汤黎明董子明
- 关键词：树突状细胞肿瘤免疫治疗小鼠
