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薄膜分散-探头超声法制备HV12p-rPA脂质体初探: 目的：将采用蛋白质工程技术获得的水蛭素12肽-瑞替普酶抗凝溶栓双功能融合蛋白（HV12p-rPA）制备成脂质体剂型。方法：采用薄膜分散探头超声法制备脂质体，通过正交设计优化处方和工艺;并分别采用BCA试剂盒法比较脂质体包...; 邓璇梁兰高漫路余蓉; 关键词：抗凝溶栓正交设计; 文献传递

一种新型抗凝溶栓双功能融合蛋白的高效表达: 本发明属于生物制药领域，具体涉及到一种新型抗凝溶栓双功能融合蛋白——水蛭素12肽和瑞替普酶融合蛋白(HV12p-rPA)的高效表达。高效表达法通过优化表达HV12p-rPA蛋白的大肠杆菌的7个培养条件，证明摇床转速即通风...; 余蓉梁兰杨继虞; 文献传递

透析法体外复性抗凝溶栓双功能HV12p-rPA融合蛋白被引量：7: 2009年; 探索表达于大肠杆菌中的抗凝溶栓双功能水蛭素12肽和瑞替普酶融合蛋白(The fusion protein of 12 peptide of hirudin and reteplase,HV12p-rPA)的体外复性方法。采用直接透析复性和氧化复性结合透析复性两种方式,并分析复性时间、温度、适宜的氧化-还原体系比例对复性率的影响。分别测定其体外抗凝活性和纤溶活性,确定复性效果。结果显示:将变性溶解的HV12p-rPA在含8mol/L脲,0.05mmol/LGSSG,0.7mol/LL-Arg的50mmol/LGly-NaOH(pH9.20)缓冲液中于25℃氧化复性6h后,再在含0.5mol/LL-Arg,1mmol/L胱氨酸,2mmol/L半胱氨酸的20mmol/LGly-NaOH(pH9.20)缓冲液中于4℃进行梯度脲浓度透析,每隔8h换液一次,透析48h,可获得具有抗凝活性为730ATU/mg,纤溶活性为19768IU/mg的可溶性蛋白质。; 梁兰余蓉邓璇李磊吴梧桐; 关键词：包涵体复性

正交实验法优化HV12p-rPA在大肠杆菌中的表达条件及其药效学初探: 目的：为优化抗凝溶栓双功能融合蛋白HV12p-rPA在大肠杆菌中的表达条件,并证明其复性后对体内血栓形成的抑制作用和对体内血栓的溶解作用,初步评价其药效学。方法：采用正交实验,选择L8(27),对培养基、接种...; 梁兰余蓉邓璇李磊张贵锋; 关键词：血栓治疗抗凝血药药效学大肠杆菌; 文献传递

一种抗凝溶栓双功能融合蛋白的脂质体制剂及制备方法: 本发明涉及生物制药领域，具体地说是涉及一种抗凝溶栓双功能融合蛋白——水蛭素12肽和瑞替普酶抗凝溶栓双功能融合蛋白(HV12p-rPA)的脂质体制剂及制备方法。由本研究室构建的抗凝溶栓双功能融合蛋白（HV12p-rPA），...; 余蓉邓璇梁兰

HV12p-rPA血栓靶向脂质体的制备及体内溶栓实验: 2011年; 将通过蛋白质工程获得的抗凝溶栓双功能蛋白水蛭素12肽-瑞替普酶(HV12p-rPA)制备成靶向脂质体,并考察其体内溶栓效果。用薄膜分散-超声法制备HV12p-rPA脂质体,通过正交设计优化处方,采用碳二亚胺法偶联抗纤维蛋白原单克隆抗体(McAbSZ-65)制备HV12p-rPA靶向脂质体,采用大鼠颈总动脉血栓模型,考察HV12p-rPA靶向脂质体的体内溶栓效果。结果:最佳处方中HV12p-rPA脂质体的粒径为(142.45±1.20)nm,Zeta电位为(-30.63±0.48)mV,平均包封率为(91.59±1.39)%。靶向脂质体组(0.48±0.083)mg在相同剂量下(80k IU/kg)与PBS空白对照组(2.04±0.114)mg、游离HV12p-rPA组(1.2±0.100)mg和普通HV12p-rPA脂质体组(0.74±0.089)mg分别比较,其血栓干重明显减轻(P<0.05);靶向脂质体组与5倍剂量(400k IU/kg)的游离HV12p-rPA组(0.52±0.084)mg比较,其血栓干重较之偏轻(P>0.05)。制备出的靶向HV12p-rPA脂质体具有体内靶向溶栓效果。; 邓璇梁兰高漫潞康丽梅余蓉苏志国吴梧桐; 关键词：脂质体

一种抗凝溶栓双功能融合蛋白的凝胶层析复性方法: 本发明属于生物制药领域，具体涉及一种抗凝溶栓双功能融合蛋白即水蛭素12肽和瑞替普酶融合蛋白包涵体的凝胶层析复性方法。该方法特征在于：先将变性蛋白进行一定时间氧化复性，然后采用Superdex75进行层析复性。层析复性时先...; 余蓉高玲苏志国张贵峰梁兰陈净刘永东; 文献传递

薄膜分散—探头超声法制备HV12p-rPA脂质体初探: 目的将采用蛋白质工程技术获得的水蛭素12肽-瑞替普酶抗凝溶栓双功能融合蛋白（HV12p-rPA）制备成脂质体剂型。方法采用薄膜分散探头超声法制备脂质体,通过正交设计优化处方和工艺;并分别采用BCA试剂盒法比较脂质体包封率...; 邓璇梁兰高漫路余蓉; 关键词：脂质体溶栓; 文献传递

一种抗凝溶栓双功能融合蛋白的脂质体制剂及制备方法: 本发明涉及生物制药领域，具体地说是涉及一种抗凝溶栓双功能融合蛋白——水蛭素12肽和瑞替普酶抗凝溶栓双功能融合蛋白(HV12p-rPA)的脂质体制剂及制备方法。由本研究室构建的抗凝溶栓双功能融合蛋白（HV12p-rPA），...; 余蓉邓璇梁兰; 文献传递

一种抗凝溶栓双功能融合蛋白的凝胶层析复性方法: 本发明属于生物制药领域，具体涉及一种抗凝溶栓双功能融合蛋白即水蛭素12肽和瑞替普酶融合蛋白包涵体的凝胶层析复性方法。该方法特征在于：先将变性蛋白进行一定时间氧化复性，然后采用Superdex75进行层析复性。层析复性时先...; 余蓉高玲苏志国张贵峰梁兰陈净刘永东; 文献传递

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梁兰