杨胜
- 作品数：9 被引量：21H指数：3
- 供职机构：南华大学医学院病原生物学研究所更多>>
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- 日本血吸虫成虫cDNA表达文库的构建、鉴定及EST分析
- 目的:构建日本血吸虫成虫cDNA表达文库是获取日本血吸虫抗原、结构蛋白、酶等其它蛋白质和它们基因的一条重要途径,是深入研究中国日本血吸虫成虫抗原基因的结构和功能,阐明中国日本血吸虫生长、发育、遗传与变异的基因种类的重要基...
- 杨胜
- 关键词：日本血吸虫病原生物学表达序列标签
- 文献传递
- 日本血吸虫黏蛋白样蛋白部分基因的扩增及测序被引量：2
- 2004年
- 目的 体外扩增日本血吸虫中国大陆株黏蛋白样蛋白 (SjMLP)抗原的部分基因序列。 方法 利用PC GENE软件查找SmMLP的抗原决定簇 ;特定寡核苷酸引物的设计与合成 ;Trizol抽提日本血吸虫成虫总RNA ,逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)扩增目的基因 ,测序后与SmMLP进行同源性分析。 结果 RT PCR特异性扩增出SjMLP编码区基因序列 ,其片段大小为 75 6bp ,测序结果与SmMLP具有高度同源性。 结论 RT PCR扩增的SjMLP抗原编码区基因序列与预期相符合。
- 刘彦肖建华廖力曾谷清张愉快杨胜梁瑜
- 关键词：日本血吸虫基因扩增抗原逆转录聚合酶链反应
- 表达序列标签分析在血吸虫基因组研究中的应用被引量：3
- 2003年
- 表达序列标签分析是借助于 10 0～ 40 0个核苷酸长度的标记引物 ,在随机选取cDNA克隆 ,进行 5’端或(和 ) 3’端进行大规模一次性测序 。
- 杨胜
- 关键词：血吸虫基因组计划表达序列标签
- 日本血吸虫成虫cDNA表达文库的构建及鉴定被引量：8
- 2002年
- 目的 通过构建日本血吸虫成虫 c DNA表达文库 ,免疫筛选全长目的基因 ,研究其结构和功能。 方法 采用 TRIZOL试剂提取日本血吸虫成虫总 RNA,Oligotex m RNA Midi Kit分离 m RNA,并用 Stratagene的建库试剂盒构建日本血吸虫 c DNA表达文库。 结果 构建的日本血吸虫成虫 c DNA表达文库容量为 2× 10 6 pfu/ ml,扩增后文库的滴度为 1.4× 10 7pfu/ ml。文库的重组率达到 96%以上 ,插入片段平均长度为 1.4kb。
- 杨胜肖建华张愉快曾桥杨秋林刘传爱王可耕应康唐蓉
- 关键词：日本血吸虫CDNA文库
- PCR扩增日本血吸虫大陆株黏蛋白样蛋白(SjMLP)部分基因被引量：4
- 2003年
- 目的 体外扩增日本血吸虫中国大陆株黏蛋白样蛋白 (SjMLP)的部分基因序列。方法 利用PCGENE软件查找SjMLP的抗原决定簇 ;特定寡核苷酸引物的设计与合成 ;TRIZOL抽提日本血吸虫成虫总RNA ,RT -PCR扩增目的基因并进行DNA序列分析。结果 RT -PCR特异性扩增出SjMLP编码区部分基因序列 ,大小为 75 6bp ,测序结果显示与曼氏血吸虫MLP高度同源。结论 扩增到了SjMLP抗原编码区基因的部分序列 。
- 刘彦肖建华廖力梁瑜张愉快杨胜曾谷清
- 关键词：PCR扩增日本血吸虫基因序列血吸虫病抗原
- 日本血吸虫表达序列标签和新基因的获取和分析被引量：2
- 2004年
- 目的分离、鉴定和分析日本血吸虫表达基因序列,为日本血吸虫病提供侯选疫苗分子和药物靶点。方法筛选日本血吸虫成虫 cDNA 文库,对重组阳性克隆进行测序以获取的 EST;对可能成为新基金的克隆进行步移法测序获取全长 cDNA,并进行生物信息学分析。结果共获得149个 EST,分析发现某些 EST 与血吸虫的生活史的不同阶段和不同性别序列有一定的同源性。共获取18个日本血吸虫新基因,大部分为管家基因,其中部分基因可作为日本血吸虫的侯选疫苗分析和药物靶点。结论EST 技术可用于快速、经济地发现日本血吸虫成虫新基因。
- 曾桥肖建华万志刚张愉快杨胜刘传爱杨秋林
- 关键词：新基因表达序列标签成虫CDNA文库日本血吸虫病全长CDNA阳性克隆
- 日本血吸虫新基因BBC1的获得和分析
- 2004年
- 目的 从日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)成虫cDNA文库中获得并分析日本血吸虫新的蛋白基因 ,为日本血吸虫病的防治提供候选疫苗和药物靶点。方法 构建日本血吸虫成虫cDNA文库 ,挑取重组阳性克隆进行测序 ,对部分序列进行步移法测序获取全长cDNA ,并进行生物信息学分析和登录。结果 获得了 1个日本血吸虫新基因 -BBC1基因 (AY2 2 0 747) ,长 62 3bp ,编码 1 84个氨基酸 ,其编码蛋白的理论分子量为 60 .8kDa ,等电点为 5 .1 3。结论 步移法测序和生物信息学技术相结合有利于发现日本血吸虫新基因。
- 万志刚肖建华曾桥杨秋林张愉快杨胜
- 关键词：日本血吸虫CDNA文库生物信息学
- 表达序列标签法寻找日本血吸虫新基因
- 2003年
- 目的 运用表达序列标签(expressed sequence tag，EST)技术，从日本血吸虫成虫eDNA文库中筛选和鉴定日本血吸虫新基因，为寻找日本血吸虫新的候选疫苗奠定基础。方法 转化日本血吸虫成虫eDNA文库，随机挑取重组阳性克隆进行测序，获得Esr；用NCBI站点的GenBank对所获得的新基因序列进行同源性检索；利用BLASTP程序对同源性高的基因进行核苷酸和氨基酸水平的同源性比较。结果 发现xzw000008克隆的eDNA序列为日本血吸虫新基因并获得GenBank登录号。该eDNA序列与曼氏血吸虫polyubiquitin基因高度同源，核苷酸水平的同一性为87％；氨基酸水平的同一性为98％。结论 用EST寻找日本血吸虫新基因是一种可行的方法，所筛选到的日本血吸虫新基因长575bp，编码191个氨基酸，与曼氏血吸虫polyubiquifin基因高度同源，为进一步研究该基因的全序列及功能作准备。
- 梁瑜肖建华曾桥杨胜张愉快杨慧龄杨秋林伍和平
- 关键词：日本血吸虫新基因曼氏血吸虫表达序列标签DNA序列同一性
- 日本血吸虫钙调神经磷酸酶B基因的获得和分析被引量：4
- 2004年
- 目的 从日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)成虫cDNA文库中获得并分析日本血吸虫新的蛋白基因 ,为日本血吸虫病的防治提供侯选疫苗和药物靶点。方法 构建日本血吸虫成虫cDNA文库 ,挑取重组阳性克隆进行测序 ,对部分序列进行步移法测序获取全长cDNA ,并进行生物信息学分析和登录。结果 获得了 1个日本血吸虫新基因 -钙调神经磷酸酶 (Calcineurin ,CaN)基因B(AY2 2 0 75 1) ,长 12 6 6bp ,编码 16 9个氨基酸 ,含有 2个“EF -hand”Ca+2 结合区域 ,与曼氏血吸虫CalcineurinB有 84 %的同源性。
- 张愉快肖建华王可耕刘传爱曾桥万志刚杨胜杨秋林
- 关键词：日本血吸虫CDNA文库生物信息学基因
