李柏生
- 作品数：8 被引量：40H指数：4
- 供职机构：华中科技大学同济医学院公共卫生学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程生物学自动化与计算机技术更多>>
- PCDFs的Ah受体结合能力的定量结构效应关系被引量：5
- 2004年
- 应用单苯环氯取代方法取G1～G10 10个分子结构描述符,通过正向逐步线性回归方法构建对于Ah受体结合能力的定量结构-性质相关(QSAR)模型.与有关文献相比,此模型能更好地预测多氯代二苯并呋喃(PCDFs)竞争结合Ah受体logEC50值,各自变量间不存在共线性.模型可以较好地反映PCDFs分子Ah受体结合能力与其分子氯取代位点之间的关系.
- 李芳孙晞李柏生王小利徐顺清
- 银染增强的纳米金探针技术检测微量核酸被引量：20
- 2006年
- 利用银染增强的纳米金技术建立了一种简单快速的核酸定量方法.该方法基于纳米金与烷巯基修饰的寡核苷酸分子共价键合作用,将纳米微粒报告基团标记在与靶核酸一端序列互补的寡核苷酸上,同时生物素化修饰另一端互补序列.靶核酸与两段寡核苷酸探针杂交后,借亲和素固定在酶标板孔内,通过纳米金催化的银染放大效应产生高灵敏的识别信号,适时记录其吸光度值从而实现核酸分子的定量.该检测方法检测单链核酸分子的灵敏度达0.1fmol/L,双链分子为10fmol/L.
- 赵立凡李柏生黑笑涵李晓波李媛媛徐顺清
- 关键词：纳米金核酸检测
- 金纳米颗粒修饰寡核苷酸适配子对蛋白质进行比色检测方法被引量：4
- 2006年
- 目的利用核酸适配体(aptamer)建立一种检测与疾病有关蛋白质的新方法。方法用金纳米颗粒(AuNP)修饰的寡核苷酸适配子与蛋白质结合,同时另一个生物素化的寡核苷酸适配子也结合于蛋白质,构成一个三明治形式的复合物,接着三明治复合物被卵白素结合于酶标板上,利用银离子强化技术对复合物上的蛋白质浓度信息进行放大,然后用酶标仪对吸光度进行检测。结果(1)本研究可以得到吸光度与PDGF-BB浓度的剂量-效应关系曲线,在一定的浓度范围内(1fM^1μM),吸光度与PDGF-BB浓度的对数值呈线形相关,决定系数R2=0.9801;(2)本方法可以检测出1fmol/L的靶蛋白质。结论本方法有较高灵敏度,不需要复杂的仪器,易于操作,是一种新颖而应用前景的蛋白质标志物分析方法。
- 张迟李柏生赵立凡张丽君徐顺清
- 关键词：蛋白质
- 应用Aptamer分子提高实时定量PCR的特异性
- 2006年
- 目的探讨Aptamer应用于普通Taq酶扩增的实时定量(Real-time)PCR反应体系能否提高反应的特异性,减少引物二聚体的产生。方法在使用SYBR Green I作荧光染料,普通Taq酶扩增的Real-time PCR反应体系中添加一定量的Aptamer,与未加Aptamer的PCR反应体系和采用了热启动酶的反应体系同时在Reche Light-Cycle 2.0中进行扩增。结果添加了Aptamer和采用热启动酶的反应体系,引物二聚体得到有效的控制,而未加Aptamer的反应体系,融解曲线中,在产物峰前面有明显的代表引物二聚体的“肩峰”出现。结论Aptamer分子可以有效的抑制引物二聚体的产生和非特异性产物的扩增。
- 李柏生李芳王先良张迟徐顺清
- 关键词：聚合酶链式反应二聚体特异性
- 垃圾焚烧炉飞灰中苯并[a]芘分析方法研究被引量：1
- 2005年
- 用丙酮作溶剂超声波抽提垃圾焚烧炉飞灰中苯并[a]芘有机物,再用固相萃取纯化,然后利用配ODS3C18色谱柱的高效液相色谱仪,在以90%乙腈+10%水为流动相,流速为1mL/min,激发波长246nm和发射波长431nm的条件下测定了垃圾焚烧炉飞灰中的苯并[a]芘含量。结果表明:该方法检出限为0.01ng/mL,苯并[a]芘的回收率90.8%,方法的RSD(相对标准偏差)为3.89%。
- 黑笑涵李芳李柏生孙唏徐顺清胡涌刚
- 关键词：苯并[A]芘垃圾焚烧炉飞灰超声波提取固相萃取
- 利用高效液相色谱-电化学法检测尿液8-羟基脱氧鸟苷被引量：5
- 2006年
- 目的观察利用高效液相色谱-电化学法（HPLC—ECD）检测尿液8-羟基脱氧鸟苷（8—OH—dG）的效果。方法尿液经前处理后，利用美国Varian Prostar高效液相色谱仪检测8—OH—dG水平。结果8—OH—dG峰与杂质峰分离良好，8—OH—dG浓度在1～25ng／ml之间呈良好线性，流动相最佳pU为3．5，最佳工作电压为0．80V，最低检测浓度为0．39ng／ml，回收率在89．1％和86．1％之间，批内差异（CV）均低于8％。结论该HPLC—ECD法是一种灵敏度高、重复性好的尿液8—OH—dG简便检测方法，值得推广。
- 鲁文红刘爱玲王先良李柏生徐顺清
- 关键词：8-羟基脱氧鸟苷
- 一种新的基于适体和酶切保护分析的超灵敏蛋白质检测方法被引量：3
- 2005年
- 以凝血酶适体(aptamer)为例,利用适体和核酸外切酶特性,通过定量PCR扩增建立一种高灵敏的蛋白质检测方法.首先合成3段寡核苷酸序列即凝血酶适体探针,上游连接子和下游连接子.将适体探针与凝血酶温育结合后,再加入核酸外切酶I降解未能结合的探针.接着将保护下来的探针与连接子杂交、连接和对连接产物进行定量PCR .分别建立连接产物标准品浓度与Ct 值的标准曲线和凝血酶浓度与连接产物浓度的标准曲线,通过定量PCR对凝血酶进行定量.结果显示,基于适体的外切酶保护凝血酶检测方法灵敏度较高,连接产物标准品浓度的对数值和Ct 值之间的方程为y =- 2 95x + 33 6 5 (R2 =0. 990 ,P <0 .0 1) ;凝血酶浓度和连接产物浓度对数值之间的方程为y =0 94x - 0 . 2 9(R2 =0 . 998,P <0 . 0 1) ,还对可能影响检测的有关参数举行了探讨.
- 王先良王小利苏艳华张迟张莉君李芳李柏生李晓波徐淑雷李媛媛徐顺清
- 基于GIS技术的环境健康管理信息系统的建立被引量：2
- 2006年
- 徐淑雷李柏生王先良沈杰徐顺清
- 关键词：管理信息系统环境健康GIS地理信息系统环境因素
