李慕瑶
- 作品数:9 被引量:47H指数:4
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:中央级科研院所科技基础性工作专项黑龙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 猫泛白细胞减少症病毒FPLV/XJ-1的分离鉴定
- 2007年
- 目的自新疆省病猫中分离并鉴定出猫泛白细胞减少症病毒地方毒株,为建立猫泛白细胞减少症病毒血清抗体检测奠定基础。方法通过CRFK细胞传代猫肠内容物分离的病毒,经电镜观察、血凝试验、间接免疫荧光试验、结构基因序列测定及动物回归试验对分离病毒进行鉴定;结果分离的病毒能凝集猪红细胞,凝集效价为512;采用离子捕捉方法,电镜可观察到呈典型的细小病毒形态的病毒粒子;细胞培养物与FPLV单克隆抗体能够特异性结合,可见特异性荧光;动物回归试验表明,感染幼猫4d出现临床症状,7d内全部发病死亡,剖检有明显FPLV感染特征。对FPLV/XJ-1的vp2基因进行序列分析表明,与FPLV-GT2、JF3、ZF-5标准毒株核苷酸同源性达99%以上。分离的FPLV/XJ-1为猫泛白细胞减少症病毒。结论分离并鉴定出了猫泛白细胞减少症病毒新疆省地方毒株,为检测试剂盒的研制和今后供试验猫检测标准的制定奠定基础。
- 苏洁姜骞李慕瑶王静刘家森司昌德刘倪虹曲连东
- 关键词:猫泛白细胞减少症病毒
- 犬瘟热重组N蛋白抗原间接ELISA方法的建立及应用被引量:14
- 2008年
- 本研究以纯化的犬瘟热病毒(CDV)重组N蛋白为诊断抗原,建立了犬瘟热病毒抗体检测的间接ELISA诊断方法,将其命名为rN-CDV ELISA。确定最佳抗原包被量为0.167μg/孔,待检血清最佳稀释倍数为1∶100,其作用时间为45 min,羊抗犬酶标抗体稀释倍数为1∶2 000,作用时间为60 min,S/P值≥0.208者判为阳性,S/P值≤0.16者判为阴性,介于两者之间者判为可疑。该抗原不与犬细小病毒、犬传染性肝炎、犬副粘病毒、犬波特氏杆菌等4种疾病的阳性血清反应,具有良好的特异性;批内、批间重复试验,变异系数均小于15%,具有良好的重复性;检测血清样品96份,与进口诊断试剂盒的符合率为97.1%。本研究为现地免疫犬群抗体检测和进行CDV流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法。
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- 关键词:犬瘟热病毒重组N蛋白间接ELISA
- 犬细小病毒VP2基因的克隆、表达及在诊断应用上的研究
- 犬细小病毒病/(Canine Parvovirus disease/)是由犬细小病毒/(Canine parvovirus,CPV/)引起犬的一种急性传染病。本病在世界各地均有发生,各种年龄、品种的犬易感,尤其是断奶后幼...
- 李慕瑶
- 关键词:犬细小病毒间接ELISA单克隆抗体
- 文献传递
- 犬细小病毒重组VP2蛋白抗原间接ELISA方法的建立及应用
- 犬细小病毒感染(Canine parvovirus infection)是由犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)引起的犬的一种急性传染病,各种年龄的犬都能感染,其中以断奶后的幼龄犬最为易感,CPV传播...
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- 文献传递
- 犬瘟热病毒HLJ 2-07株的分离及H基因的序列分析
- 对从患病犬体分离到一株CDV,对其H基因序列进行了研究,为进一步开展犬瘟热的流行病学调查及分子生物学研究奠定了基础,对有效防治本病具有重要的实际意义。
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- 关键词:犬瘟热病毒病毒分离H基因抗体特异性
- 犬细小病毒ELISA抗体检测试剂盒的研制及应用被引量:9
- 2009年
- 本研究以纯化的犬细小病毒(CPV)重组VP2蛋白为包被抗原,建立了检测CPV抗体的间接ELISA方法,其抗原包被浓度为0.158μg/mL;待检血清稀释倍数为1∶100,作用时间为60min;羊抗犬酶标抗体稀释倍数为1∶2000,作用时间为60min;底物作用时间为10min;判定标准为S/P≥0.282时为阳性,S/P≤0.226时为阴性。该方法与犬瘟热、犬传染性肝炎、犬副粘病毒病、犬波特氏杆菌病等4种犬常见传染病阳性血清无交叉反应,具有较好的特异性;批内、批间重复试验变异系数均小于15%,显示该方法具有良好的重复性;与商品化CPVELISA试剂盒进行比较,符合率为96.5%。本研究为现地免疫犬群抗体监测和进行CPV流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法。
- 姜骞李慕瑶刘家森司昌德葛艳华郭东春韩凌霞孟庆文曲连东
- 关键词:犬细小病毒间接ELISA
- 犬细小病毒VP2基因的原核表达及间接ELISA方法的建立被引量:21
- 2007年
- 根据GenBank上发表的犬细小病毒(CPV)VP2蛋白基因序列,设计并合成1对引物,通过PCR扩增VP2基因全长。将其克隆到pET-30a载体中,构建了原核表达载体pET-VP2,转化大肠杆菌Rosetta,表达并纯化了重组蛋白,Western-blotting证明该重组蛋白具有免疫原性。利用重组蛋白为抗原,通过方阵试验确定了包被抗原的最佳包被量为15.8 ng/孔,血清的最佳稀释倍数为1∶100,建立了检测CPV血清抗体的间接ELISA方法。
- 李慕瑶姜骞刘家森司昌德韩凌霞曲连东
- 关键词:VP2基因原核表达纯化间接ELISA
- 猫泛白细胞减少症病毒XJ1-05株的分离及鉴定被引量:4
- 2008年
- 苏洁姜骞李慕瑶王静刘家森司昌德刘倪虹曲连东
- 关键词:猫泛白细胞减少症病毒犬细小病毒猫科动物急性传染病保护动物接触性
- 犬瘟热病毒HLJ 2-07株的分离及H基因的序列分析
- 引言和目的犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)属于副粘病毒科麻疹病毒属,是引起犬科、鼬科、浣熊科动物的一种急性、亚急性的高度传染性疾病,该病几乎呈世界性分布,尤为重要的是,近年来CDV自然感...
- 姜骞葛艳华司昌德刘家森江勇李慕瑶郭东春林欢曲连东