司昌德
- 作品数：93 被引量：389H指数：10
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：黑龙江省科技攻关计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项黑龙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生建筑科学更多>>
- 仙台病毒RT—PCR检测方法的建立
- 根据GenBank发表的SeV的基因组序列，设计合成2对特异性引物扩增Sev片段，通过PCR反应体系的优化，选取1对引物建立了仙台病毒PCR检测技术。经敏感性和特异性试验，本方法对仙台病毒核酸的最小检出量为1.1pg，对...
- 刘家森蒋良丰李兰兰姜骞郭冬春司昌德曲连东
- 关键词：仙台病毒基因组序列病毒检测副粘病毒
- 文献传递
- 猪圆环病毒Cap蛋白羧基端特异性单克隆抗体的制备被引量：6
- 2006年
- 利用IPTG诱导表达含有猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白羧基端421-37nt的重组大肠杆菌pGEX-PCV421-37,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)粗分离,免疫BALB/c小鼠,利用PCV2感染PK15细胞筛选PCV2特异性单克隆抗体。共获得5株,腹水的IFA效价范围为1∶1600～1∶8000;除单抗26H5-A3为IgG1亚型外,32A8-G5、33G10-F4、12B5-G3和14E12-A6全部为IgM型;全部轻链都属κ型。
- 马贯中韩凌霞朴范泽刘怀然司昌德姜骞曲连东
- 关键词：PCV2IFA
- 鸡源REV对HBK-SPF雏鸭的感染试验被引量：5
- 2009年
- 为研究鸡源网状内皮组织增殖病病毒(REV)对HBK无特定病原体(SPF)鸭的致病性,利用鸡源REV现地分离株REV-HN,分别接种鸭胚成纤维细胞(DEF)、鸭胚(尿囊腔和卵黄囊腔接种)和雏鸭(口腔接种),试验设空白对照组,雏鸭还设有同居感染组。接种REV后不同时间收获DEF和胚体,及雏鸭的外周血淋巴细胞(PBL)和免疫器官,提取基因组DNA,通过RT-PCR和PCR方法检测REV前病毒env基因。结果在DEF中未检测到特异性的env基因片段,而在卵黄囊接种后72h鸭胚胚体和试验感染的雏鸭PBL中检测到。接种后30d,在1羽感染REV的雏鸭肾、胸腺和法氏囊中检测到REV前病毒。本研究为利用SPF鸭研究REV提供了依据。
- 牛成明韩凌霞司昌德曲连东
- 番鸭细小病毒和鹅细小病毒PCR诊断方法的建立
- 目的建立番鸭细小病毒(MDPV)和鹅细小病毒(GPV)的鉴别诊断方法。方法根据MDPV和GPV病毒的基因组非同源序列各设计引物MDPVF1／R1和GPVF1／R1,分别对鹅细小病毒(GPV)／番鸭细小病毒(MDPV)／鸭...
- 刘家森姜骞司昌德韩凌霞曲连东
- 关键词：番鸭细小病毒鹅细小病毒PCR
- 文献传递
- 仙台病毒黑龙江省地方株的分离与鉴定被引量：4
- 2006年
- 目的自本省普通级实验动物中分离并鉴定出仙台病毒地方毒株,为建立仙台病毒血清抗体检测方法奠定基础。方法通过鸡胚尿囊腔传代自普通级小鼠肺脏分离病毒,经血凝实验、血凝阻断实验和结构基因序列测定对分离得到的病毒进行鉴定;大量繁殖病毒并通过蔗糖密度梯度离心纯化,免疫动物制备阳性血清,用标准试剂盒检测阳性血清效价。结果自150份小鼠肺脏分离到2株有血凝性的病毒,经形态学、血清学和结构基因序列测定鉴定为仙台病毒,命名为SV-HLJ。SV-HLJ与标准毒株Fushimi核蛋白基因(N)的核苷酸、氨基酸同源性分别为99·6%和99·0%。结论分离并鉴定出了仙台病毒黑龙江省地方毒株,为检测试剂盒的研制奠定了基础。
- 刘怀然张龄张天聪姜骞李昌文关云涛韩凌霞司昌德管海迪曲连东
- 关键词：仙台病毒
- HBK-SPF鸭生化位点检测方法的建立被引量：4
- 2010年
- 为了明确HBK-SPF鸭群的群体遗传学多态性,试验采用生化标记位点,参照国家标准《实验动物近交系小鼠、大鼠生化标记检测方法》GB14927.1—2001,应用乙酸纤维素板,建立了HBK-SPF鸭生化标记位点的检测方法,对连续2个世代的HBK-SPF鸭进行检测。结果表明:酯酶-1(Es1)、转铁蛋白酶(Trf)、碳酸酐酶-2(Car2)、葡萄糖磷酸异构酶-1(Gpi1)、磷酸葡萄糖转位酶(Pgm1)、酯酶-10(Es10)等6种同工酶可以用于鸭的生化标记检测,重复性较好,对HBK-SPF鸭群进行分析发现存在多态性。
- 韩凌霞肖兵兵牛成明司昌德曲连东
- 慢病毒基因转移载体、其制备方法和应用
- 本发明公开了一种马传染性贫血病毒(EIAV)基因转移载体、其构建方法及其用途。本发明载体包含：CMV/R/U5启动子、5’非翻译区引导序列、部分5’gag基因编码区序列、中央聚嘌呤序列和EIAV的Rev反应元件、CMVI...
- 韩凌霞童光志曲连东司昌德于海波孟庆文姜骞刘家森孙成群
- 兔出血病病毒RT-PCR检测方法的建立及初步应用被引量：11
- 2006年
- 为快速检测兔出血病病毒,参照RHDV-TP株VP60基因序列(GenBank Ac-ession AF453761),在其5′端设计一对引物,扩增片段为386 bp,建立了检测兔出血病病毒的RT-PCR检测方法。经过对反应参数的优化,确定了反应的最佳条件。该方法在含多种已知病原的病料中,可特异性检出RHDV,检测病料的最高稀释度为10-5倍,且有很好的稳定性。临床样品检测结果显示,该方法的敏感性要高于血凝抑制试验,从而建立了RHDV特异、敏感的RT-PCR检测技术,可应用于RHDV临床诊断及流行病学调查。
- 胡迎东刘怀然司昌德刘家森韩凌霞姜骞曲连东
- 关键词：RT-PCR病原学检测
- 抗犬瘟热病毒重组核衣壳蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：9
- 2007年
- 以纯化的重组犬瘟热病毒（CDV）N蛋白免疫BALB/c小鼠,应用常规杂交瘤技术获得两株能稳定分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞系,分别命名为A4C6C12和A5B8H7间接ELISA检测腹水效价分别为1：106、1：105;亚类鉴定结果分别为IgG2a、IgG2b,轻链均为K型;Western blot和ELISA分析结果显示2株单克隆抗体均能与重组N蛋白和CDV发生反应,而与犬细小病毒及犬腺病毒等无交叉反应;ELISA叠加试验的增值结果表明两株单克隆抗体识别的抗原位点不同.特异性抗CDV-rN的单克隆抗体的获得,为进一步用于临床诊断研究奠定了基础.
- 周洁姜骞张洪英刘家森刘立奎陈洪岩韩凌霞司昌德曲连东
- 关键词：犬瘟热病毒单克隆抗体
- SPF巴马小型猪的培育及应用被引量：3
- 2017年
- 利用我国自有资源巴马小型猪群,完成了疫病净化,建立了无特定病原体巴马小型猪实验猪群。制定了饲育标准、实验猪遗传学检测标准和微生物质量控制技术标准,制订了黑龙江省地方标准《无特定病原体猪微生物学监测技术规范》,对建立的猪群进行了遗传学和微生物质量控制。建立了猪瘟病毒(CSFV)和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染巴马小型猪感染模型。扩增了巴马小型猪重要细胞因子及固有免疫相关的重要分子,从分子水平进一步证明巴马小型猪可以代替家猪进行猪病感染实验。目前建立的猪群已广泛应用在猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪圆环病毒等猪重要疫病防控及致病机理的研究,实现了共享利用。本项目的完成解决了实验用猪瓶颈问题,提升了动物疫病研究水平,提供了新型实验动物,实现了优质种质资源共享利用,加速了生命科学研究和生物制品产业发展,推动了农业实验动物的行业进步。
- 姜骞韩凌霞司昌德林欢高彩霞郭东春张伟刘家森曲连东
- 关键词：巴马小型猪无特定病原体
