李彬
- 作品数：330 被引量：646H指数：12
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生经济管理更多>>
- 一种丝瓜杂交育种方法
- 本发明涉及一种丝瓜杂交育种方法，属于植物育种技术领域。以江苏省南京市地方品种“南京长条”为原始资源，经8代自交选育出的自交系ZZS；以江苏省姜堰市地方品种“五叶香”为原始资源，经8代自交选育出自交系SX香丝瓜；以自交系Z...
- 袁希汉苏小俊庄勇李彬
- 文献传递
- 猪轮状病毒NJ2012株VP8基因序列分析及原核表达被引量：3
- 2020年
- 为深入研究猪轮状病毒VP8蛋白的结构和功能,以及研制新型猪轮状病毒疫苗,利用生物信息学软件DNAStar对本研究室保存的1株A组G9P7型猪轮状病毒NJ2012的VP8基因序列进行核苷酸和氨基酸同源性分析;设计并合成1对引物,采用RT-PCR方法扩增VP8蛋白编码基因,用限制性核酸内切酶对目的片段与pET28a(+)原核表达载体进行双酶切,构建了重组原核表达载体,用IPTG诱导表达,并进行Western blot验证。结果显示:NJ2012毒株的VP8基因序列与参考毒株序列的核苷酸同源性为53.9%~99.2%,氨基酸同源性为42.1%~97.5%;VP8基因克隆成功,经测序与目的基因完全一致;经鉴定,构建的重组原核表达质粒pET28a-VP8能够在DE3宿主菌中表达,该蛋白以包涵体形式存在;Western blot结果显示该蛋白可与抗His-tag鼠单克隆抗体发生特异性反应。本研究实现了VP8蛋白在原核系统中稳定表达,为调查该蛋白的免疫原性及研制安全、高效的猪轮状病毒亚单位疫苗提供了参考。
- 常新见周金柱范宝超郭容利朱琳赵永祥牛家强何孔旺李彬
- 关键词：猪轮状病毒蛋白纯化原核表达
- 通用引物检测志贺毒素和紧密素多个基因亚型
- 目的：志贺毒素和紧密素是大肠杆菌致病群最主要的毒力因子之一,本文旨在是建立能够同时检测志贺毒素和紧密素多个基因变型的二重PCR快速检测技术,更好的适应临床和实验室等的检测需求。方法：以志贺毒素2(Shiga toxin2...
- 张雪寒叶青汪伟倪艳秀温立斌李彬王小敏周俊明何孔旺
- 关键词：动物疾病大肠杆菌志贺毒素基因检测
- 文献传递
- SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测类猪圆环病毒P1的引物
- 本发明涉及一种利用SYBR Green I实时荧光定量PCR检测类猪圆环病毒P1的方法，属于分子生物学领域。本发明方法包括特异性引物的设计、标准质粒的构建、实时荧光定量PCR扩增方法的建立和优化、样本DNA提取及结果检测...
- 温立斌何孔旺高晓静王小敏李彬郭容利俞正玉茅爱华倪艳秀张雪寒吕立新周俊明胡屹屹汪伟叶青祝昊丹于洋沈江萍周萍
- 文献传递
- 猪链球菌2型江苏分离株菌毛相关基因特点及菌株毒力鉴定被引量：1
- 2012年
- 利用PCR技术对猪链球菌2型(SS2)江苏分离株的菌毛相关基因进行扩增,根据菌毛相关基因分布特点对菌株分型,并进行动物试验评估。结果 24株SS2中A型占70.8%,B型占29.2%。其中从病猪分离的13株SS2均为A型;而从健康猪扁桃体中分离的11株SS2 A型占36.3%,B型占63.7%。动物试验结果表明A型菌株的毒力强于B型。以上结论说明猪链球菌2型江苏分离株可以根据菌毛相关基因特点进行分型,并利用分型结果来评估菌株的毒力强弱及潜在危害性。
- 虞凤何孔旺肖琦倪艳秀周俊明茅爱华祝昊丹汪伟吕立新俞正玉温立斌张雪寒李彬郭容利王小敏范红结
- 关键词：猪链球菌2型毒力
- 表达 PCV2密码子优化ORF1和ORF2串联基因的重组病毒
- 本发明涉及一种PCV2密码子优化ORF1和ORF2串联基因的重组病毒，属于生物制药领域。人工合成密码子优化的PCV2ORF1和ORF2基因，命名为YHsfORF1-2。将YHsfORF1-2克隆入杆状病毒表达载体pFas...
- 王小敏何孔旺汪伟周忠涛俞正玉倪艳秀温立斌张雪寒郭容利吕立新李彬周俊明茅爱华叶青周萍沈江萍
- 文献传递
- 猪IFN-δ5的表达纯化及其抗PEDV感染的作用分析
- 2022年
- 【目的】试验旨在建立大量表达及纯化猪δ5干扰素(pIFN-δ5)的方法,并对其抗猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染的作用进行分析。【方法】根据GenBank中pIFN-δ5序列(登录号:NM_001164854.1)设计引物,以猪肝脏组织cDNA为模板进行PCR扩增;将目的基因连接入经EcoRⅤ和HindⅢ双酶切的线性化pET-32a(+)载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,优化诱导表达条件,并进行SDS-PAGE和Western blotting检测;pIFN-δ5蛋白大量表达后使用镍离子亲和层析柱纯化,并测定蛋白纯度;采用细胞病变抑制法检测pIFN-δ5的干扰素效价,采用CCK8方法检测pIFN-δ5的细胞毒性,进一步测定其抗PEDV的感染能力。【结果】试验成功构建了重组表达质粒pET-pIFNδ5,经诱导条件摸索发现,在D值为0.5~0.6、IPTG浓度为0.8 mmol/L、37℃诱导条件下,目的蛋白pIFN-δ5主要表达于菌体裂解上清中;经大量表达并纯化后可获得纯度>95%的pIFN-δ5蛋白。使用VSV/MDCK细胞滴定系统检测pIFN-δ5的比活性为5×10^(4)U/mg;CCK8检测表明pIFN-δ5的细胞毒性较小。实时荧光定量PCR、Western blotting和间接免疫荧光检测结果表明,pIFN-δ5具有显著抗PEDV感染能力。【结论】本试验建立了表达和纯化pIFN-δ5的方法,通过一系列的体外抗病毒试验证实pIFN-δ5具有良好的抗PEDV感染的活性,为将pIFN-δ5作为抗病毒药物及临床应用奠定了基础。
- 宋诗莹郭玮璐夏学峰张雪毕振威张雪寒范宝超董海龙李彬
- 关键词：抗病毒活性
- 丝瓜的主要病虫害及其防治被引量：5
- 2001年
- 李彬苏小俊袁希汉
- 关键词：丝瓜苗期猝倒病病毒病瓜绢螟瓜蚜
- 猪胸膜肺炎放线杆菌血清8型菌株的分离鉴定及耐药性研究被引量：9
- 2019年
- 为了确定引起2018年5月江苏泰州某规模化养猪场育肥猪发病死亡的病原,本试验无菌采取病死猪肺脏组织,通过病原分离培养、染色观察、生化试验、PCR扩增等方法进行鉴定,随后对分离菌株进行致病性和耐药性试验。结果显示,该分离菌株在病原分离培养过程中,需在含有NAD的培养基中才能生长;该分离菌通过革兰氏染色,显微镜观察细菌呈红色,可判定新分离的菌株为革兰氏阴性菌;根据生化试验和PCR结果可判定该分离菌株为猪传染性胸膜肺炎放线杆菌;PCR血清型分型结果显示,分离菌株为猪胸膜肺炎放线杆菌血清8型菌株;小鼠毒力试验结果显示,当分离株菌液浓度达到3×10^8 CFU/mL时便可引起BALB/c小鼠死亡,浓度为2×10^9 CFU/mL时对BALB/c小鼠的致死率达到100%,表明该分离菌株对BALB/c小鼠有较强的致病力及致死性;药敏试验结果表明,该分离菌株对头孢噻吩、头孢噻肟、氨曲南、头孢吡肟、头孢曲松、氧氟沙星等14种抗菌药物高度敏感,对氨苄西林中度敏感,对链霉素耐药。综合以上试验结果表明该猪场存在猪胸膜肺炎放线杆菌血清8型菌株感染情况。
- 王丹丹陈国强张常印俞正玉祝昊丹周俊明吕立新何孔旺李彬倪艳秀
- 关键词：药敏试验
- 同时检测肠出血性大肠杆菌O45和O145的纳米PCR试剂盒及其应用
- 本发明提供同时检测肠出血性大肠杆菌O45和O145的纳米PCR试剂盒及其应用，涉及出血性大肠杆菌的检测技术领域。该试剂盒，包括第一引物对和第二引物对，所述第一引物对包括序列如SEQ ID No：3和SEQ ID No：4...
- 张雪寒葛东红张碧成王警郭芸芸俞正玉倪艳秀温立斌李彬汪伟胡屹屹周俊明祝昊丹肖琦范宝超朱雪娇
- 文献传递
