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基于ITS条形码序列早期筛选枸杞种内杂交种被引量：3: 2017年; 利用核糖体内转录间隔区(ITS)条形码序列,对枸杞杂交育种种内杂交种进行早期筛选研究。采用改进的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法提取枸杞叶片DNA,利用合成的特异引物对其DNA中的nr DNA ITS区进行扩增、克隆,对目的片段进行测序分析。结果表明:以宁夏枸杞种内的品种宁杞1号、宁杞2号、白花枸杞作为父母本,选配杂交组合,基于ITS条形码序列对其种内杂交育种产生的杂交后代进行聚类分析,分析杂交后代与父母本的亲缘关系与差异,对其杂交后代进行早期筛选。由结果可知,基于ITS条形码序列可以作为早期筛选杂交育种后代的方法之一,对建立分子标记辅助育种技术、缩短育种周期具有重要意义。; 石志刚马婷慧万如李彦龙王亚军; 关键词：枸杞属 ITS序列 DNA测序杂交育种

宁夏枸杞主要品种psbA-trntH的DNA条形码鉴定的初步研究被引量：3: 2016年; 对宁夏枸杞主要品种psbA-trntH的DNA条形码序列进行分析,从分子水平对枸杞做出鉴定。采用改进CTAB法提取枸杞叶片DNA,利用合成的特异引物对其叶绿体间隔序列进行扩增、克隆,对目的片段测序分析,克隆到枸杞主要品种psbA-trntH片段,并获得其碱基序列(总长为545bp)。; 石志刚万如李彦龙王亚军马婷慧; 关键词：枸杞属 PSB DNA测序

应用AFLP标记分析枣品种亲缘关系被引量：5: 2013年; 从分子水平研究宁夏红枣品种系统发育和亲缘关系,为宁夏枣种质资源的保护和利用提供科学依据。利用AFLP标记方法对原产宁夏地区7个枣品种和6个从区外引种的枣品种基因组DNA进行分析。筛选出的5对AFLP引物组合对13个供试材料共扩增出351条DNA带,其中301条为多态带(占85.75%),平均每个引物扩增多态性带70条。13个材料间的遗传相似系数为0.376～0.957。UPGMA聚类表明,13个材料在相似系数0.85处被划分为5个类。宁夏地域相对狭小,品种交流频繁,从而造成该产区枣品种间亲缘关系较近,演化关系复杂。枣虽然品种资源丰富、分布范围广泛,但遗传多样性相对较小。; 李百云李彦龙魏天军; 关键词：枣树亲缘关系 AFLP

枸杞炭疽病菌滤液对枸杞愈伤组织生长及分化的影响被引量：2: 2012年; 采用Czapek-Dox培养液,通过振荡培养、过滤、离心,获得枸杞炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides Penz.)培养滤液,配制含不同比例粗毒素液的枸杞愈伤组织培养与分化培养基,研究培养滤液对枸杞叶片愈伤组织生长和分化的影响。结果表明:枸杞炭疽病菌粗毒素液具有较强的生物活性,对枸杞愈伤组织生长及分化均具有一定的毒害和抑制作用;多步正选择法与一步正选择法相比,经过由低到高的选择压力逐级筛选后,可相对提高叶片愈伤组织对毒素的抗性,抗性细胞系筛选的上限浓度可定为浓度50%(v/v),抗性细胞变异系分化培养基中的粗毒素液含量可定为20%(v/v)。; 曲玲石志刚焦恩宁李彦龙张宗山曹有龙; 关键词：培养滤液愈伤组织毒害作用

利用SSR标记构建枸杞品种分子身份证被引量：14: 2018年; 以16个枸杞品种为材料,利用SSR标记构建枸杞分子身份证,为枸杞品种鉴定和保护提供参考。从600对SSR引物中筛选出多态性高、稳定性好、均匀分布在枸杞12条染色体上的24对引物,对16个枸杞品种进行扩增,共检测到等位基因155个,每对引物检测到等位基因数在3-10,平均为6.5个;共检测到基因型208个,每对引物检测到基因型在3-14个,平均为8.7个;多态信息含量(PIC)变幅在0.461-0.848,平均为0.682;Shannon’s信息指数变幅在0.939-2.055,平均为1.487。基于最少引物鉴定最多种质的原则,筛选出等位基因数、基因型数和PIC值均大于平均值,且Shannon’s信息指数> 1.7引物,最终确定出引物LBSSR0052和LBSSR0423组合可区分全部供试品种。根据这两对引物对所有品种扩增获得等位基因按照由小到大排序,然后将每个品种在这两个SSR位点的赋值依次组合,构建16个枸杞品种的分子身份证。结果表明SSR标记技术可以作为枸杞品种鉴定和分子身份证构建的有效技术手段。; 尹跃赵建华安巍李彦龙何军曹有龙; 关键词：枸杞 SSR 分子身份证

一种雄性不育枸杞丰产的栽培方法与应用: 本发明涉及一种雄性不育枸杞丰产的栽培技术、方法与应用，特别涉及与雄性不育选配的授粉树、混植比例和混植方法，以及此载培方法在提高雄性不育枸杞的座果率以及高产中应用，属于果树遗传育种领域。本发明选择宁杞1号为授粉树，以行间、...; 曹有龙秦垦樊云芳李彦龙; 文献传递

枸杞品种SSR荧光指纹图谱构建及遗传关系分析被引量：16: 2017年; 以12个枸杞栽培品种为材料,利用SSR荧光标记进行DNA指纹图谱的构建和遗传关系分析。11对SSR引物在12品种共检测到34个等位变异,平均每个位点为3.1个,位点平均有效等位变异数(Ne)、观测杂合度(Ho)、Shannon’s信息指数(I)和多态信息含量(PIC)分别为2.025、0.439、0.776和0.391。其中4对引物SF1、SF30、SF63和SF92可区分所有供试品种,为品种鉴别提供依据。NTSYS-pc2.10软件聚类表明,12个枸杞品种遗传相似系数变化范围是0.57~0.91,平均为0.68,表明枸杞品种间存在着丰富的遗传多样性。SSR荧光标记技术可以有效地用于枸杞品种资源指纹图谱构建及遗传关系研究。; 尹跃安巍赵建华李彦龙樊云芳曹有龙; 关键词：枸杞 SSR DNA指纹图谱

基于ITS条形码序列的枸杞属植物鉴定被引量：3: 2016年; 采用改进CTAB法提取枸杞（Lycium Chinense Mill.）叶片DNA,利用合成的特异引物对其DNA中nr DNA ITS区进行扩增,利用ITS条形码序列,对枸杞属种质资源进行鉴定,分析其亲缘关系。结果表明,测序得到了17份枸杞属近缘种的ITS条形码序列,整个ITS序列长度变异范围为603~632 bp,平均为624 bp,整个转录间隔区（ITS1＋ITS2）对位排列后总长度为480 bp,有194个变异位点,占40%;保守位点288个,占60%。聚类分析结果表明,17份种质资源可分为5个大类群。基于ITS条形码序列分析在鉴定枸杞属种质遗传多样性及其亲缘关系具有一定的优越性。; 石志刚万如李彦龙王亚军; 关键词：ITS序列 DNA测序

基于ITS条形码序列对枸杞杂交种的早期鉴定被引量：1: 2016年; 采用改进CTAB法提取枸杞（Lycium Linn）叶片DNA,利用合成的特异引物对其DNA中nr DNA ITS区进行扩增、克隆,对目的片段进行测序分析,以期利用ITS条形码序列对枸杞杂交种进行早期鉴定。结果表明,7份枸杞属不同种间杂交种的ITS序列长度变异范围为558~632 bp,平均为610 bp。排序后的总长度为632 bp,整个转录间隔区（ITS1＋ITS2）对位排列后总长度为478 bp,共有138个变异位点,ITS1和ITS2分别为85和53个,占28.9%;保守位点340个,占71.1%;有6个信息位点,占1.3%;51个转换位点,12个颠换位点,其中ITS1区的信息位点所占比例低于ITS2区,而ITS1区的转换位点与颠换位点比值高于ITS2区。通过对宁夏枸杞、北方枸杞、黑果枸杞及其种间杂交育种产生的杂交后代分析,得出基于ITS聚类分析能够初步判别杂交后代与父母本的亲缘关系与差异,可以作为早期鉴定枸杞属不同种间杂交种后代的方法之一。; 石志刚万如李彦龙王亚军; 关键词：ITS序列杂交育种

枸杞DNA的提取方法研究被引量：1: 2009年; [目的]寻求高质量枸杞DNA的有效提取方法,为开展我国枸杞种质资源准确的分子鉴定评价提供试验基础。[方法]针对枸杞组织中多糖严重干扰基因组DNA提取质量的问题,比较了常规十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法和改良CTAB法的处理效果。[结果]常规CTAB法提取DNA难以除去多糖类杂质,溶液极黏稠,致使移液枪吸取困难,取量不准;改良CTAB法提取DNA产率高,无明显降解,杂质少,OD260 nm/OD280 nm比值在1.80左右,表明DNA纯度高,污染少。通过基因组DNA-AFLP指纹图谱分析,改良CTAB法完全满足试验要求。并对改良CTAB法的关键步骤作了分析讨论。[结论]为枸杞DNA的有效提取提供了方法依据。; 樊云芳李彦龙曹有龙; 关键词：枸杞 DNA提取改良CTAB法

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