朱迎春
- 作品数：46 被引量：170H指数：9
- 供职机构：中国人民解放军海军总医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 从半合成抗体库克隆抗TNF-α人单链抗体被引量：14
- 1999年
- 通过噬菌体抗体库技术，不经免疫克隆抗ＴＮＦ－α人单链抗体，用固相化的人重组ＴＮＦ－α抗原对半合成噬菌体抗体库进行了４轮“吸附－洗脱－扩增”的筛选，可见到明显富集，从第３轮和第４轮洗脱下来的克隆中获得两株可特异结合ＴＮＦ－α的克隆，其可变区分别属于ＶＨ１、ＶＨ３和Ｖλ１亚群。
- 王琰刘群英化冰陈宇萍朱迎春陈晓穗
- 关键词：噬菌体抗体库TNFΑ
- 抗乙肝病毒表面抗原单链抗体在大肠杆菌中的高效表达被引量：2
- 1999年
- 目的：在大肠杆菌中高效表达抗乙肝表面抗原的单链抗体。方法：通过ＰＣＲ将单链抗体基因重组到原核细胞表达载体ｐＴ７中，构建单链抗体高效表达载体ｐＴ７ＳＣ。将ｐＴ７ＳＣ质粒转化大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３），ＩＰＴＧ诱导进行表达。结果：获得了ＳｃＦｖ的高效表达，表达产物占菌体总蛋白的２８％以上。竞争抑制性ＥＬＩＳＡ检测诱导后的细菌培养上清，证明所表达的ＳｃＦｖ具有抗体活性。进一步将ｃＭｙｃ十肽连接在ＳｃＦｖ的羧基端，使所表达的ＳｃＦｖ易于检测。结论：在大肠杆菌高效表达抗乙肝ＳｃＦｖ。
- 高荣凯王琰刘群英朱迎春化冰陈宇萍
- 关键词：单链抗体HBSAG乙型肝炎大肠杆菌
- 抗人胃癌3H11人-鼠嵌合抗体的构建及表达被引量：7
- 1998年
- 为了降低抗人胃癌鼠单抗3H11的免疫原性,以利于该单抗在临床中的应用。我们构建并表达了3H11的人-鼠嵌合抗体,将3H11的轻、重链可变区基因分别插入到含有人k链及IgGl重链恒定区基因的真核细胞表达载体中,构建了3H11人-鼠嵌合抗体轻、重链表达载体。应用Lipofectin方法先将嵌合轻链表达载体转染到Sp2/0细胞中,经用含霉酚酸的选择培养基筛选及克隆化培养,获得稳定分泌3H11人-鼠嵌合轻链的转染细胞株。再将嵌合重链表达载体转染该细胞系,用含有组氨醇的选择培养基筛选,获得组氨醇抗性细胞株,经亚克隆后得到可稳定分泌人k链和人IgGl的转染细胞系,经ELISA检测该细胞系所分泌的上清含有可与人胃癌细胞系803结合的人IgG抗体活性,RT-PCR结果显示该细胞株有人-鼠嵌合抗体mRNA的转录,证明已获得分泌3H11人-鼠嵌合抗体的细胞系。
- 李竞王卓智王琰刘群英化冰陈宇萍朱迎春董志伟
- 关键词：人-鼠嵌合抗体胃肿瘤真核基因
- 重组人铜锌超氧化物歧化酶脂质体的制备
- 1994年
- 应用反相蒸发法制备出重组人铜锌超氧化物歧化酶(rh Cu/Zn SOD)脂质体,其包封率为49.1%,在大鼠体内半衰期为3.45 h,体外模拟胃酸、胃蛋白酶、胰酶耐受力分别为90.3%、86.2%.79.8%;在小鼠体内脾、肝、肺脏中分布最高.
- 谢帮铁工晶翼骆训懿李战青刘晓琳陈晓穗陈宇萍周丽君朱迎春
- 关键词：超氧化物歧化酶脂质体基因工程铜锌
- 抗HBsAg和抗红细胞双特异Diabody的构建及表达被引量：14
- 1998年
- 目的构建及表达抗乙肝病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和抗红细胞（ＲＢＣ）双特异Ｄｉａｂｏｄｙ，用于血清中ＨＢｓＡｇ的快速检测。方法将抗ＨＢｓＡｇ的人抗体轻重链可变区基因与抗红细胞的鼠抗体重轻链可变区基因交叉配对构建成两个杂合Ｄｉａｂｏｄｙ基因，并将两个配对基因组建在一个表达载体中，成为双特异Ｄｉａｂｏｄｙ表达载体，并在大肠杆菌中分泌表达。结果经ＥＬＩＳＡ检测和红细胞凝集实验测定，证明所表达的双特异性Ｄｉａｂｏｄｙ具有抗ＨＢｓＡｇ和抗ＲＢＣ双重功能，并可使含有ＨＢｓＡｇ的ＲＢＣ悬液产生血球凝集。结论所表达的双特异性Ｄｉａｂｏｄｙ具有双重抗体活性。
- 陈宇萍王琰化冰刘群英朱迎春高荣凯王卓智
- 关键词：双特异性抗体HBSAG红细胞聚集
- 抗胃癌单抗3H11可变区氨基端序列对抗体活性的影响被引量：5
- 1999年
- 采用 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ 方法， 利用第一骨架区通用引物扩增重链 Ｆｄ 段和κ链的基因， 克隆到 Ｆａｂ 表达载体中， 在大肠杆菌中获得了表达但未检测到抗原结合活性． 根据已克隆的３ Ｈ１１ Ｖ Ｌ、 Ｖ Ｈ 的真实序列， 重新设计κ链及 Ｆｄ 段５′端引物， 分别将骨架区引物在κ链及 Ｆｄ 段５′端所造成的氨基酸残基改变纠正为原始序列， 构建分别含有矫正后κ链或矫正后 Ｆｄ 以及二个链均得到矫正的 Ｆａｂ 表达载体， 这些载体在大肠杆菌中均获得类似水平的表达， 对任何一个链的矫正均可部分恢复 Ｆａｂ 段胃癌细胞的结合活性． 结果说明在构建小分子抗体时， Ｐ Ｃ Ｒ 引物引入的轻。
- 李竞王琰王卓智刘群英化冰陈宇萍朱迎春董志伟
- 关键词：免疫球蛋白可变区基因单克隆抗体
- 金属螯合亲和层析法对抗HBsAg Fab段的纯化被引量：1
- 1996年
- 为了对大肠杆菌表达的Fab段进行简便有效的纯化,我们在Fab段表达载体上插入了一段编码六个组氨酸的DNA片段,使所表达的Fab段在Fd段的羧基端带有六个连续的组氨酸,通过金属螯合亲和层析法对大肠杆菌表达的Fab段进行纯化,利用不同pH梯度缓冲液洗脱,一步即可达到95%以上纯度的纯化.
- 王琰刘群英化冰朱迎春王雅明徐建军
- 从人源性噬菌体抗体库分离出1株含有异常序列的抗HBsAg Fab克隆被引量：12
- 1998年
- 曾从人源性噬菌体抗体库中筛选出１株抗人乙肝表面抗原（ＨＢｓＡｇ）的Ｆａｂ克隆，为了筛选出新的抗ＨＢｓＡｇＦａｂ段，采用抗原屏蔽法，用已得到的Ｆａｂ段封闭相应的抗原决定基，对该抗体库进行了再次筛选，得到了１株新的人抗ＨＢｓＡｇＦａｂ段克隆，经序列分析发现其轻链可变区基因来源于Ｖκ１亚群和Ｊκ４基因，重链可变区基因来源于ＶＨ１亚群和ＪＨ４基因，但在ＶＨ第７７位和第７８位氨基酸残基之间出现了７个多余的氨基酸残基，经对基因数据库检索未能查到该序列的来源，但显然这段序列未影响抗体的抗原结合活性。
- 王琰刘群英化冰高荣凯陈宇萍朱迎春
- 关键词：噬菌体抗体库克隆
- 金属内肽酶底物Glutaryl－Ala－Ala－Phe－2NA的合成
- 1994年
- 文本以苯丙萘胺（Ｐｈｅ－２ＮＡ）为原料。
- 朱迎春赵忠刘东东王赋敏
- 抗胃癌鼠单抗3H11 scFv的包含体表达及柱上在位复性被引量：5
- 1998年
- 目的：在大肠杆菌高效表达抗胃癌单抗３Ｈ１１的ｓｃＦｖ。方法：利用ＰＣＲ技术将３Ｈ１１ｓｃＦｖ基因从分泌型表达载体转移至高效表达载体，获得３Ｈ１１ｓｃＦｖ包含体的表达，经超声裂解、洗涤、变性后，尝试透析复性和凝胶过滤色谱柱上在位复性，结果：透析复性未能得到有活性的３Ｈ１１ｓｃＦｖ，而柱上在位复性效果良好，获得有功能性的３Ｈ１１ｓｃＦｖ。结论：成功进行了３Ｈ１１ｓｃＦｖ的柱上复性，不同ｓｃＦｖ在表达和复性中显示出明显差异，在基因工程抗体研制中值得注意。
- 李竞王琰王卓智朱迎春董志伟
- 关键词：胃肿瘤基因转移
