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小鼠细胞因子实时定量PCR检测方法的建立及应用被引量：3: 2009年; 采用荧光SYBR GreenⅠ建立小鼠细胞因子mRNA实时定量PCR的检测方法；并利用建立的实时定量PCR的检测方法对感染H5N1禽流感病毒的BALB／c小鼠不同时间采集的肺脏组织中几种重要致炎细胞因子及趋化因子mRNA表达水平进行了检测。对H5N1禽流感病毒感染的BALB／c小鼠肺脏细胞因子的检测具有高度的特异性，检测的灵敏度为10^1～10^2拷贝数。H5N1禽流感病毒感染BALB／c小鼠后，小鼠肺脏中IL-1β、IL-6、TNFα、MIG、IP-10、RANTES、MIF和HMGB1细胞因子mRNA表达水平与对照组小鼠相比均有明显差异。建立的实时定量PCR能在基因转录水平敏感和特异地反应细胞因子的表达水平，该技术在基础和临床免疫研究中，具有良好的应用价值。; 张亮亮侯小强高玉伟杨松涛夏咸柱张敏; 关键词：小鼠细胞因子实时定量PCR

大豆凝集素的分子结构及其抗营养作用研究进展被引量：4: 2006年; 概述了大豆凝集素的研究情况,总结归纳了大豆凝集素的分子结构、理化特性及其对动物和人类造成的抗营养作用。; 王利民秦贵信胡海霞刘林娜张玲玲张亮亮王涛; 关键词：大豆凝集素分子结构抗营养作用

胃蛋白酶、胰蛋白酶对大豆凝集素稳定性的影响: 本试验以纯化的大豆凝集素(SBA)为研究对象，体外研究了动物体内两大主要蛋白消化酶，胃蛋白酶和胰蛋白酶对其降解作用。试验通过SDS-PAGE凝胶电泳方法分析了SBA 经蛋白酶酶解后的降解程度;通过间接竞争ELISA方法测...; 张亮亮; 关键词：大豆凝集素胃蛋白酶胰蛋白酶降解作用免疫活性; 文献传递

胃蛋白酶和胰蛋白酶对大豆凝集素的稳定性研究: 2009年; 本研究以纯化的大豆凝集素(SBA)为研究对象,体外研究了动物体内两大主要蛋白消化酶即胃蛋白酶和胰蛋白酶对其酶解作用。试验通过SDS-PAGE方法分析了SBA经蛋白酶酶解后的降解程度;利用间接竞争ELISA方法测定其在酶解过程中的活性变化。结果表明:SBA可缓慢地被胃蛋白酶降解,SBA浓度越高,完全降解需要的时间越长;随着SBA的降解,SBA的活性也逐渐减小,随着酶解时间的延长活性消失速度也逐渐变慢,并且在本研究选取的酶浓度作用下,SBA浓度越高,活性减小的速度越快,但活性完全消失的时间延长。然而,SBA不能被胰蛋白酶降解,并且酶解过程中SBA的活性也保持完好,说明SBA对胰蛋白酶具有很好的稳定性。因本研究结果将为进一步揭示大豆凝集素在动物体内的消化动力学及其对机体的抗营养作用机理研究奠定理论基础。; 张亮亮侯小强王利民孙泽威刘林娜赵元秦贵信; 关键词：大豆凝集素胃蛋白酶胰蛋白酶降解生物活性

大豆凝集素在模拟猪胃肠环境中的稳定性研究被引量：1: 2009年; 为研究大豆凝集素在体外模拟猪胃肠环境中的稳定性,将纯品大豆凝集素设为1,2,3,4,5 mg/mL 5个浓度梯度,分别与等体积的模拟胃液或模拟肠液混合（37℃）,按时间梯度15,30,60 s和2,4,8,15,30,60 min准确记时并终止反应,采用SDS-PAGE凝胶电泳和间接抑制ELISA方法定量检测反应体系中剩余的大豆凝集素。结果表明：大豆凝集素在胃蛋白酶反应体系中的剩余量随底物浓度和反应时间的不同都呈显著性变化（P〈0.05）。胃蛋白酶降解大豆凝集素主要发生在反应的初始阶段,随着反应时间的延长降解速率逐渐变慢,但反应一直在进行;随着大豆凝集素浓度的增加,降解速率增大,但彻底降解所需的时间延长,底物浓度从1 mg/mL增加到5 mg/mL,完全降解的时间为9.5-23 min。胰蛋白酶对完整的大豆凝集素不产生降解作用。大豆凝集素在猪消化道内有一定程度的降解,但与大豆凝集素的浓度和通过胃的时间密切相关。; 王利民张亮亮王彬秦贵信; 关键词：大豆凝集素稳定性

三种亲和层析体系纯化大豆凝集素的比较研究被引量：7: 2007年; 用N-乙酰基-D-半乳糖胺-epoxy-Sepharose 6B、半乳糖胺-CH-Sepharose 4B和瓜尔胶三种亲和层析体系对大豆中的凝集素进行分离提纯,并进行了多方面的比较。结果显示:三种亲和层析体系纯化大豆凝集素的产率存在显著差异,依次分别为147±15、110±12和128±16mg/100g生大豆;三种亲和胶的亲和饱和度差异显著,分别为12.2±1.4、7.5±1.3和2.1±1.6 mg/mL凝胶。这一结果表明大豆凝集素最理想的纯化方法是N-乙酰基-D-半乳糖胺-expoxy-sepharose 6B亲和层析体系。; 王利民秦贵信刘林娜张亮亮张玲玲; 关键词：纯化大豆凝集素

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张亮亮