张丽颖
- 作品数：6 被引量：32H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 单克隆抗体捕捉猪瘟病毒抗原ELISA方法的建立被引量：22
- 2006年
- 分别用原核表达的猪瘟病毒(CSFV)主要抗原E2蛋白和猪瘟基因疫苗免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合与克隆筛选出5株稳定分泌CSFV抗体的杂交瘤细胞株1E2、1G7、3A2、3B7和4B6。间接免疫荧光和Western-blotting试验结果表明,5株单抗均与CSFV E2蛋白和全病毒抗原反应。将筛选的CSFV特异性单抗1E2、3B7和4B6纯化后等量混合后包被酶标板(捕捉抗体),与兔抗CSFV IgG(检测抗体)联合应用,建立起CSFV抗原捕捉ELISA(AC-ELISA)方法。随后采用方阵滴定法确定了单抗与多抗的最适工作浓度及判定检测结果的OD450临界值。最后以建立的AC-ELISA检测CSFV细胞培养物、CSFV攻毒死亡猪的病料和临床猪瘟组织样品,结果表明,该方法敏感、特异、重复性好,与病毒分离和RT-PCR方法符合率分别为86.2%和90.3%。
- 刘建文余兴龙张丽颖涂长春
- 关键词：猪瘟病毒单克隆抗体
- 牛病毒性腹泻病病毒Changchun184株E2基因的克隆及在大肠杆中的高效表达被引量：10
- 2005年
- 根据GenBank已发表的多个BVDV_1序列的比较分析结果设计引物 ,应用RT_PCR及套式PCR克隆得到包含Changchun184 (CC_184 )株E2基因的片段F2 /R2 ,克隆、测序分析结果表明该片段大小为 1391bp ,软件分析结果表明CC_184株E2基因长度为 112 2bp(GenBankaccessionnumber:AF5 2 6 380 )。通过基因操作构建得到表达完整E2蛋白和去除E2蛋白C_端疏水区的重组质粒 pET2 8a_BE2和 pET2 8a_BE2m ,转化大肠杆菌并诱导目的蛋白表达 ,SDS_PAGE检测结果表明重组菌能表达目的蛋白 ,其表达量分别占菌体总蛋白的 6 2 5 %和 35 7%。
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- 关键词：E2基因克隆
- 单克隆抗体捕捉猪瘟病毒抗原ELISA方法的建立
- 用原核表达的猪瘟病毒(CSFV)主要抗原E2蛋白和猪瘟基因疫苗分别免疫Balb/c小鼠,通过细胞融合与克隆筛选出5株稳定分泌CSFV抗体的杂交瘤细胞株1E2、1G7、3A2、3B7和4B6。间接免疫荧光和Western-...
- 刘建文余兴龙张丽颖涂长春
- 关键词：猪瘟病毒单克隆抗体
- 特异性siRNA抑制猪瘟病毒的增殖
- 应用计算机辅助设计和网络生物软件资源,设计了针对猪瘟病毒E2、N<'pro>、NS5A及NS5B基因的14个siRNA分子,合成其DNA序列并克隆到siRNA表达载体pSilencer中,得到14个siRNA表达质粒.将...
- 徐兴然查云峰余兴龙张丽颖涂长春
- 关键词：免疫荧光猪瘟猪瘟病毒RNA干扰
- 文献传递
- 单克隆抗体捕捉猪瘟病毒抗原ELISA方法的建立
- 用原核表达的猪瘟病毒(CSFV)主要抗原E2蛋白和猪瘟基因疫苗分别免疫Balb/c小鼠,通过细胞融合与克隆筛选出5株稳定分泌CSFV抗体的杂交瘤细胞株1E2、1G7、3A2、3B7和4B6。间接免疫荧光和Western-...
- 刘建文余兴龙张丽颖涂长春
- 关键词：猪瘟病毒单克隆抗体
- 文献传递
- 特异性siRNA抑制猪瘟病毒的增殖
- 应用计算机辅助设计和网络生物软件资源,设计了针对猪瘟病毒E2、Npro、NS5A及NS5B基因的14个siRNA分子,合成其DNA序列并克隆到siRNA表达载体pSilencer中,得到14个siRNA表达质粒。将siR...
- 徐兴然查云峰余兴龙张丽颖涂长春
- 关键词：CSFVRNAI免疫荧光
- 文献传递
