平娟
- 作品数：13 被引量：30H指数：3
- 供职机构：河南大学淮河医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程生物学更多>>
- IMRT联合白蛋白结合型紫杉醇与吉西他滨治疗晚期胰腺癌的临床观察与效果评估被引量：1
- 2019年
- 胰腺癌是一种恶性程度极高,诊断和治疗都很困难的消化道恶性肿瘤疾病。截至目前,除了手术治疗外,尚未有其他很好的治疗措施[1,2]。基于胰腺癌难以治愈的特点,后续的放疗、化疗措施对延续患者的生存时间就显得十分重要[3-5]。白蛋白结合型紫杉醇(nab-paclitaxel,Nab-P)是新一代靶向紫杉醇制剂,它不需要合成的溶剂作为载体,不需要皮质固醇或抗组胺类药物等预处理,静脉滴注时间短(30 min),其利用了白蛋白的自然生物特性,临床前的研究模型证实了Nab-P与传统溶剂相比,抗肿瘤活性明显增强[6-11]。
- 张玉山王保全周黎明张永州郭建阔平娟史朝辉
- 关键词：IMRT白蛋白结合型紫杉醇吉西他滨晚期胰腺癌
- 基于纳米金修饰的核酸适体生物传感器用于环孢素浓度的体外测定
- 2016年
- 利用环孢素(CsA)的两条高亲和力核酸适体生物传感器用于环孢素浓度的体外测定,在柠檬酸三钠为还原剂条件下,以氯金酸为原料,制备纳米金(Au)溶液,并对其进行表征,将aptamer-Ⅰ经酰胺化反应共价结合到磁性纳米颗粒表面,以纳米金(Au)修饰aptamer-Ⅱ,以固定在磁性纳米颗粒表面的aptamer-Ⅰ与环孢素孵育,再与Au-aptamer-Ⅱ作用,形成磁性纳米颗粒/环孢素/纳米金三明治夹心结构,磁分离技术分离三明治复合物,210 nm处检测分离前后紫外吸收强度的变化,对环孢素进行定量检测。结果紫外检测结果显示,制备的纳米金溶胶在520 nm处呈现典型的吸收峰,JEM-4 000EX电镜结果显示,纳米金溶胶颗粒粒径分布均匀、形貌、分散度较好,粒径大小在30 nm左右,此法对环孢素的响应范围是50~1 500 ng/m L,其线性回归方程为Y=4×10^(-3)X+5.769×10^(-1),R=0.997 3。此法可在1~2 h内完成检测,有望用于血液环孢素浓度的测定。
- 王保全瞿静平娟黄继海张永洲孔开营郭昆鹏庞晓斌
- 关键词：核酸适体生物传感器环孢素血药浓度
- 阿霉素脂质体的制备及其体外抗肿瘤活性的初步研究被引量：2
- 2014年
- 目的:应用超声波分散法制备脂质体阿霉素,并比较脂质体阿霉素与游离性阿霉素抗肿瘤活性。方法:以卵磷脂和胆固醇为原料,将阿霉素包封于脂质体中,采用超声分散法制备脂质体阿霉素,对其在290-700nm范围内进行紫外扫描,用SephedexG-50柱分离脂质体阿霉素并计算其包封率。以昆明种小鼠为载体建立肿瘤模型(S180型肉瘤)和细胞荧光染色法研究脂质体阿霉素的抗肿瘤活性,以ZITA SIZER3000型表面电位与粒度测定仪测定其粒径分布。结果:脂质体阿霉素在480nm处有最大吸收峰值,包封率达91.3%,细胞荧光染色显示,脂质体及游离型阿霉素均对S180细胞有明显的抑制作用。结论:此法制备的脂质体阿霉素包封率高,粒径分布集中,脂质体阿霉素较游离型阿霉素有较强的抗肿瘤活性剂及较低的细胞毒作用,对阿霉素的临床应用有一定的参考价值。
- 张玉山平娟张永州苗久旺王保全
- 关键词：阿霉素脂质体抗肿瘤
- 黄芪多糖(Aps)与5-Fu联合对结肠癌细胞SW480凋亡诱导及分子机制研究
- 2023年
- 目的初步探讨黄芪多糖(Aps)提高结肠癌SW480细胞对氟尿嘧啶(5-Fu)的敏感性,促进结肠癌细胞凋亡的分子机制。方法选择SW480结肠癌细胞株为实验对象,将黄芪多糖100μmol·L-1和5-Fu 30μg·mL-1组单用或联用48 h作为药物实验组,另设不加药为对照组,分别采用实时定量PCR和Western-bloting检测各组细胞bcl-2、p21、caspase-3、caspase-9基因表达和蛋白表达情况,比较阈值法确定基因的相对表达量,以GAPDH为内参,半定量分析蛋白相对表达量,EMSA法检测各组细胞核因子-κB的DNA结合活性,多组间样本均数比较采用单因素方差分析,组间样本均数比较采用LSD检验。结果联合用药组caspase-3、caspase-9和p21基因表达与蛋白表达均高于对照组、黄芪多糖组和5-Fu组,联合用药组生存素与蛋白表达均低于对照组、黄芪多糖组和5-Fu组,差异均具有统计学意义(P<0.05),caspase-3、p21在两单药组的表达与对照组相比,差异也具有统计学意义(LSD检验,P<0.05)。结论黄芪多糖与低剂量的5-Fu联用对结肠癌SW480细胞凋亡诱导作用显著大于高剂量5-Fu单独应用的效果,可能是通过黄芪多糖抑制核因子-κB的DNA结合活性,进一步上调caspase-3、caspase-9、p21及下调生存素起作用,提示黄芪多糖对5-Fu抗结肠癌细胞的作用具有协同和增强作用,为临床上结肠癌疾病的辅助化疗提供了一个新思路,黄芪多糖可为结肠癌化疗提供辅助治疗。
- 平娟周莉莉李东换王保全史朝辉李文倩王熠宁张永洲
- 关键词：黄芪多糖5-FU结肠癌
- SELEX技术筛选重组人超氧化物歧化酶核酸适体研究
- 2014年
- 运用指数富集配基系统技术(SELEX)筛选人超氧化物歧化酶(rhSOD)特异性核酸适体。体外化学合成长度为78 bp的中间含有35个随机序列的单链DNA文库,通过比较不对称PCR和生物素-链亲和素磁珠分离方法制备ssDNA文库的效果,确定以生物素-链亲和素磁珠分离方法制备ssDNA文库,采用硝酸纤维素膜为介质,以SOD蛋白为靶标,筛选其亲和性核酸适体,酶联仪测定定D450值,计算每轮ssDNA文库与靶分子的结合率。经过11轮筛选后,随机ssDNA文库与SOD的结合率从初始的0.47%上升到37.5%,随着筛选轮数的增加,ssDNA与靶分子结合率趋于稳定。初步筛选出具有高亲和力的SOD酶特异性核酸适体,为进一步开发和研究SOD新药及模拟药物提供参考。
- 王保全李霞平娟李峰张伟张永州庞晓斌
- 关键词：SELEX技术超氧化物歧化酶适体核酸
- 壳聚糖螯合凝胶层析法纯化血液超氧化物歧化酶被引量：2
- 2014年
- 首先利用不同相对分子质量聚丙烯酸钠从动物血液中分离纯化出超氧化物歧化酶(SOD),探索不同相对分子质量聚丙烯酸钠对SOD提取酶活性的影响。鉴于离子交换层析和凝胶过滤层析纯化时所用材料较昂贵,探索出一条适合工业化大规模生产的纯化方法。利用壳聚糖、亚氨基二乙酸(IDA)和环氧氯丙烷等材料合成一种新填料,根据亲和层析原理去除杂蛋白质,获得电泳纯级超氧化物歧化酶,使酶活性进一步提高,并和离子交换层析和凝胶过滤层析方法相对照,以期自制填料能代替Sephedex,DEAE-sepherose-fast flow等传统昂贵填料,以适合工业化生产。结果显示,低相对分子质量聚丙烯酸钠在血液SOD提纯工艺中更为适用,超滤后的粗酶液经离子交换层析、凝胶过滤层析和壳聚糖亲和层析纯化后经SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳后呈明显的单一条带,单亚基分子量16 kD,比活力达5 585 U/mg和6 148 U/mg,4 739 U/mg;产品得率分别为18.1%和13.7%,15.5%;纯化后活性回收率分别为61.2%,50.8%,42.6%。表明壳聚糖亲和层析方法在新工艺后续纯化工艺中有望代替Sephedex DEAEsepherose-fast flow为基础的传统纯化方法,适合工业化大规模生产。
- 王保全平娟张永州黄继海李昭华董先智庞晓斌李梅基
- 关键词：相对分子质量聚丙烯酸钠血液超氧化物歧化酶
- 人慢性粒细胞白血病融合蛋白BCR-ABL适配子筛选及结构分析被引量：3
- 2015年
- 目的:筛选、鉴定人慢性粒细胞白血病融合蛋白BCR-ABL适配子。方法:利用SELEX(Systematic evolution of ligands by exponential)技术,以高纯度融合蛋白BCR-ABL为靶分子,从体外化学合成的长度为90 bp的随机单链DNA文库中来筛选与融合蛋白BCR-ABL特异性结合的寡核苷酸适配子,并进行解离常数(Kd)值测定和适配子序列测定,再分别用Clustal W软件包和DNA Folding Sever分析适配子一级结构及二级结构,以酶联仪测定OD450值,根据OD值高低判定适配子亲和力大小。结果:经过13轮筛选,随机ss DNA文库与融合蛋白的亲和率从0.3%上升到47.1%,所有的一级结构没有共同的同源序列,二级结构分析结果显示,茎和环等二级结构可能是适配子和融合蛋白BCR-ABL结合的基础,其中,寡核苷酸适配子A2与BCR-ABL亲和力最高,kd值达72 nmol/L。结论:利用随机寡核苷酸文库筛选技术成功获得抗融合蛋白适配子,为临床上治疗和预防慢性粒细胞白血病提供一定的参考。
- 平娟赵娜申智慧阴明星张倩张伟马雪姗陈传波
- 关键词：SELEX技术慢性粒细胞白血病适配子
- 猪血超氧化物歧化酶分离纯化工艺改进及其抗氧化活性研究被引量：8
- 2010年
- 以新鲜猪血为原料,首次利用改进的新工艺提取分离超氧化物歧化酶,经过溶血,热变,丙酮沉淀,超滤浓缩,SephadexG-75凝胶过滤层析和DEAE-sepharose-fast flow离子交换层析纯化,冷冻干燥等步骤,得到高纯度酶,并对酶的相关性能进行研究。试验结果显示产品粗酶活性在3 000 U/mg左右,分别经SephadexG-75和DEAE-sepharose-fast flow层析纯化后,酶活分别达到5 585 U/mg和6 148 U/mg产品得率分别为13.4%和10.32%,SDS-PAGE凝胶电泳显示为单一条带达到电泳纯,其分子量在31 kD附近,其临苯三酚抗氧化活性明显。
- 王保全庞晓斌李昭华平娟王玲玲董先智
- 关键词：超氧化物岐化酶抗氧化
- 人慢性粒细胞白血病bcr-abl基因反义寡核苷酸对K562细胞株的凋亡诱导作用研究被引量：5
- 2015年
- 背景与目的：随着人类基因组计划的完成，人们的研究重点已转向基因功能的研究，反义核酸技术无疑为这项宏伟工程提供了一个新的发展方向。目前，国内关于反义寡核苷酸诱导K562细胞凋亡的实验研究很少。本实验在体外构建针对人慢性粒细胞白血病（chronic myelogenou leukemia，CML）bcr-abl融合基因mRNA的反义寡核苷酸，探讨bcr-abl反义寡核苷酸对K562细胞凋亡的诱导作用。方法：以bcr-abl融合基因mRNA翻译起始点融合前区19个寡核苷酸为作用靶点，设计反义寡核苷酸，以其反义寡核苷酸序列转染人慢性粒细胞K562细胞，采用Hoechst染色法观察不同浓度寡核苷酸对K562细胞株的凋亡情况，采用蛋白[质]印迹法（Western blot）检测自噬凋亡蛋白LC3-Ⅱ的表达情况，采用流式细胞术（flow cytometry，FCM）检测细胞周期变化，采用JEM-4000EX电镜术检测细胞凋亡形态变化，通过DNA琼脂糖凝胶电泳检测K562细胞凋亡情况。结果：Hoechst染色结果显示，bcr-abl反义寡核苷酸能显著促进K562细胞的凋亡，且呈现一定的浓度依赖性。Western blot检测结果显示，bcr-abl反义寡核苷酸各浓度组凋亡自噬蛋白LC3-Ⅱ表达水平明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0.05）。FCM检测结果显示，bcr-abl反义寡核苷酸作用于K562细胞后，细胞周期阻滞于G0/G1期。各组G0/G1期、S期细胞数量与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0.05）。在JEM-4000EX电镜下可见明显的新月型凋亡小体。DNA琼脂糖凝胶电泳显示，10、30μmol/mL bcr-abl反义寡核苷酸组可以明显观察到以180~200 bp碱基对整倍数出现明暗间隔的DNA梯状条带。结论：Bcr-abl反义寡核苷酸可显著诱导K562细胞凋亡，为临床上基因治疗人CML提供一定的参考。
- 平娟赵娜王保全申智慧阴明星庞晓斌陈传波
- 关键词：BCR-ABL基因反义寡核苷酸K562细胞凋亡诱导
- 用壳聚糖纳米磁性微球纯化血红细胞超氧化物歧化酶被引量：3
- 2014年
- 本研究旨在用壳聚糖-聚丙烯酸纳米磁性微球纯化血红细胞超氧化物歧化酶。采用了接枝共聚法,以K2S2O8为引发剂,使壳聚糖(CTS)与聚丙烯酸(PAA)进行自由接枝共聚合成含有两性基团(-NH3,-COOH)的壳聚糖-聚丙烯酸纳米微球。化学共沉淀法制备Fe3O4磁流体,以戊二醛为交联剂,制备壳聚糖-聚丙烯酸纳米磁性微球。用傅里叶变换红外光谱仪对磁性微球结构进行检测。JEM-4000EX电镜技术对微球粒径,形貌进行表征。SOD试剂盒测定各步骤Cu-ZnSOD酶活性。结果表明,壳聚糖-聚丙烯酸纳米磁性微球有较好的粒径分布、磁响应性及蛋白吸附特性。纯化后酶比活性达6 727 U/mg,产品得率21.1%,活性回收85.7%。壳聚糖-聚丙烯酸纳米磁性微球经血液纯化血红细胞SOD具有可再生性、易操作性,其纯化效果取决于金属Cu2+的螯合程度。
- 王保全平娟李峰张永州刘翠庞晓斌
- 关键词：聚丙烯酸超氧化物歧化酶纯化
