王保全
- 作品数：21 被引量：67H指数：5
- 供职机构：河南大学淮河医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程生物学文化科学更多>>
- 脉络宁对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性的影响研究被引量：8
- 2014年
- 目的研究脉络宁(玄参、牛膝、石斛、金银花等)对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性的影响,初步探讨其可能的机制。方法 72只成年健康雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,依达拉奉对照组,脉络宁高、中和低剂量组。脑缺血再灌注大鼠模型采用线栓法阻断大脑中动脉缺血2 h后再灌注24 h的方式建立。TTC法测定脑梗死体积;伊文思蓝法检测血脑屏障通透性;Western blot法检测脑微血管内皮细胞紧密连接相关蛋白紧密连接蛋白-1和闭合蛋白的表达。结果脉络宁能显著降低缺血再灌注大鼠脑梗死体积,明显降低血脑屏障通透性,可使紧密连接蛋白-1和闭合蛋白的表达增加。结论脉络宁可降低脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性的机制可能与上调脑微血管内皮细胞间连接蛋白紧密连接蛋白-1和闭合蛋白的表达有关。
- 庞晓斌谢欣梅王保全李晓婷
- 关键词：脉络宁脑缺血再灌注血脑屏障紧密连接蛋白
- 提取超氧化物岐化酶的方法和试剂盒
- 本发明涉及一种提取超氧化物岐化酶的方法，其特征在于，包含去除杂蛋白的步骤，其中使用丙烯酸聚合物作为杂蛋白沉淀剂。本发明还涉及用于提取超氧化物岐化酶的试剂盒，其特征在于，包括所述作为杂蛋白沉淀剂的丙烯酸聚合物。
- 董先智王保全李昭华
- 文献传递
- 壳聚糖螯合凝胶层析法纯化血液超氧化物歧化酶被引量：2
- 2014年
- 首先利用不同相对分子质量聚丙烯酸钠从动物血液中分离纯化出超氧化物歧化酶(SOD),探索不同相对分子质量聚丙烯酸钠对SOD提取酶活性的影响。鉴于离子交换层析和凝胶过滤层析纯化时所用材料较昂贵,探索出一条适合工业化大规模生产的纯化方法。利用壳聚糖、亚氨基二乙酸(IDA)和环氧氯丙烷等材料合成一种新填料,根据亲和层析原理去除杂蛋白质,获得电泳纯级超氧化物歧化酶,使酶活性进一步提高,并和离子交换层析和凝胶过滤层析方法相对照,以期自制填料能代替Sephedex,DEAE-sepherose-fast flow等传统昂贵填料,以适合工业化生产。结果显示,低相对分子质量聚丙烯酸钠在血液SOD提纯工艺中更为适用,超滤后的粗酶液经离子交换层析、凝胶过滤层析和壳聚糖亲和层析纯化后经SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳后呈明显的单一条带,单亚基分子量16 kD,比活力达5 585 U/mg和6 148 U/mg,4 739 U/mg;产品得率分别为18.1%和13.7%,15.5%;纯化后活性回收率分别为61.2%,50.8%,42.6%。表明壳聚糖亲和层析方法在新工艺后续纯化工艺中有望代替Sephedex DEAEsepherose-fast flow为基础的传统纯化方法,适合工业化大规模生产。
- 王保全平娟张永州黄继海李昭华董先智庞晓斌李梅基
- 关键词：相对分子质量聚丙烯酸钠血液超氧化物歧化酶
- Aptamer-siRNA核酸复合物对人慢性粒细胞白血病(CML)小鼠模型凋亡信号转导的影响
- 2016年
- SELEX技术筛选人慢性粒细胞白血病(CML)核酸适配子,合成aptamer-si RNA核酸复合物,观察aptamer-si RNA核酸复合物干预NOD/SCID小鼠慢性粒细胞白血病(CML)bcr-abl融合基因及P210、P53、TNF-α、bcl-xl相关因子表达水平。将K562细胞接种于全身照射后的裸鼠,待皮下成瘤后取出瘤块,制备成瘤细胞混悬液,再尾静脉接种于NOD/SCID小鼠,实验成功建立了全身播散型白血病模型,对实验小鼠行随机分组,以RT-PCR法检测aptamer-si RNA核酸复合物治疗小鼠体内bcr-abl融合基因表达水平,ELASA法检测小鼠P210、P53、TNF-α、bcl-xl表达水平。实验结果表明:Aptamer-si RNA核酸复合物可显著降低模型小鼠体内融合基因bcr-abl及融合蛋白P210表达水平,能提升P53表达,抑制TNF-α、bcl-xl过度表达,其抑制效果与aptamer-si RNA核酸复合物浓度有一定的相关性。aptamer-si RNA核酸复合物通过干预CMLbcr-abl融合基因及其表达的融合蛋白P210,影响细胞信号传导通路途径,有效阻断了CML传变的进展,揭示了aptamer-si RNA核酸复合物干预CML疾病的微观机理。
- 王保全孟涛瞿静李卫华郭建阔申智慧赵清辉庞晓斌
- 关键词：慢性粒细胞白血病
- 基于纳米金修饰的核酸适体生物传感器用于环孢素浓度的体外测定
- 2016年
- 利用环孢素(CsA)的两条高亲和力核酸适体生物传感器用于环孢素浓度的体外测定,在柠檬酸三钠为还原剂条件下,以氯金酸为原料,制备纳米金(Au)溶液,并对其进行表征,将aptamer-Ⅰ经酰胺化反应共价结合到磁性纳米颗粒表面,以纳米金(Au)修饰aptamer-Ⅱ,以固定在磁性纳米颗粒表面的aptamer-Ⅰ与环孢素孵育,再与Au-aptamer-Ⅱ作用,形成磁性纳米颗粒/环孢素/纳米金三明治夹心结构,磁分离技术分离三明治复合物,210 nm处检测分离前后紫外吸收强度的变化,对环孢素进行定量检测。结果紫外检测结果显示,制备的纳米金溶胶在520 nm处呈现典型的吸收峰,JEM-4 000EX电镜结果显示,纳米金溶胶颗粒粒径分布均匀、形貌、分散度较好,粒径大小在30 nm左右,此法对环孢素的响应范围是50~1 500 ng/m L,其线性回归方程为Y=4×10^(-3)X+5.769×10^(-1),R=0.997 3。此法可在1~2 h内完成检测,有望用于血液环孢素浓度的测定。
- 王保全瞿静平娟黄继海张永洲孔开营郭昆鹏庞晓斌
- 关键词：核酸适体生物传感器环孢素血药浓度
- 阿霉素脂质体的制备及其体外抗肿瘤活性的初步研究被引量：2
- 2014年
- 目的:应用超声波分散法制备脂质体阿霉素,并比较脂质体阿霉素与游离性阿霉素抗肿瘤活性。方法:以卵磷脂和胆固醇为原料,将阿霉素包封于脂质体中,采用超声分散法制备脂质体阿霉素,对其在290-700nm范围内进行紫外扫描,用SephedexG-50柱分离脂质体阿霉素并计算其包封率。以昆明种小鼠为载体建立肿瘤模型(S180型肉瘤)和细胞荧光染色法研究脂质体阿霉素的抗肿瘤活性,以ZITA SIZER3000型表面电位与粒度测定仪测定其粒径分布。结果:脂质体阿霉素在480nm处有最大吸收峰值,包封率达91.3%,细胞荧光染色显示,脂质体及游离型阿霉素均对S180细胞有明显的抑制作用。结论:此法制备的脂质体阿霉素包封率高,粒径分布集中,脂质体阿霉素较游离型阿霉素有较强的抗肿瘤活性剂及较低的细胞毒作用,对阿霉素的临床应用有一定的参考价值。
- 张玉山平娟张永州苗久旺王保全
- 关键词：阿霉素脂质体抗肿瘤
- 黄芪多糖(Aps)与5-Fu联合对结肠癌细胞SW480凋亡诱导及分子机制研究
- 2023年
- 目的初步探讨黄芪多糖(Aps)提高结肠癌SW480细胞对氟尿嘧啶(5-Fu)的敏感性,促进结肠癌细胞凋亡的分子机制。方法选择SW480结肠癌细胞株为实验对象,将黄芪多糖100μmol·L-1和5-Fu 30μg·mL-1组单用或联用48 h作为药物实验组,另设不加药为对照组,分别采用实时定量PCR和Western-bloting检测各组细胞bcl-2、p21、caspase-3、caspase-9基因表达和蛋白表达情况,比较阈值法确定基因的相对表达量,以GAPDH为内参,半定量分析蛋白相对表达量,EMSA法检测各组细胞核因子-κB的DNA结合活性,多组间样本均数比较采用单因素方差分析,组间样本均数比较采用LSD检验。结果联合用药组caspase-3、caspase-9和p21基因表达与蛋白表达均高于对照组、黄芪多糖组和5-Fu组,联合用药组生存素与蛋白表达均低于对照组、黄芪多糖组和5-Fu组,差异均具有统计学意义(P<0.05),caspase-3、p21在两单药组的表达与对照组相比,差异也具有统计学意义(LSD检验,P<0.05)。结论黄芪多糖与低剂量的5-Fu联用对结肠癌SW480细胞凋亡诱导作用显著大于高剂量5-Fu单独应用的效果,可能是通过黄芪多糖抑制核因子-κB的DNA结合活性,进一步上调caspase-3、caspase-9、p21及下调生存素起作用,提示黄芪多糖对5-Fu抗结肠癌细胞的作用具有协同和增强作用,为临床上结肠癌疾病的辅助化疗提供了一个新思路,黄芪多糖可为结肠癌化疗提供辅助治疗。
- 平娟周莉莉李东换王保全史朝辉李文倩王熠宁张永洲
- 关键词：黄芪多糖5-FU结肠癌
- SELEX技术筛选重组人超氧化物歧化酶核酸适体研究
- 2014年
- 运用指数富集配基系统技术(SELEX)筛选人超氧化物歧化酶(rhSOD)特异性核酸适体。体外化学合成长度为78 bp的中间含有35个随机序列的单链DNA文库,通过比较不对称PCR和生物素-链亲和素磁珠分离方法制备ssDNA文库的效果,确定以生物素-链亲和素磁珠分离方法制备ssDNA文库,采用硝酸纤维素膜为介质,以SOD蛋白为靶标,筛选其亲和性核酸适体,酶联仪测定定D450值,计算每轮ssDNA文库与靶分子的结合率。经过11轮筛选后,随机ssDNA文库与SOD的结合率从初始的0.47%上升到37.5%,随着筛选轮数的增加,ssDNA与靶分子结合率趋于稳定。初步筛选出具有高亲和力的SOD酶特异性核酸适体,为进一步开发和研究SOD新药及模拟药物提供参考。
- 王保全李霞平娟李峰张伟张永州庞晓斌
- 关键词：SELEX技术超氧化物歧化酶适体核酸
- 用低聚PAAS热沉淀法提取血液超氧化物歧化酶
- 2009年
- 目的:通过对传统工艺的改进,探索简便快速的SOD提取分离方法,以适合大量制备的需要。方法:使用低分子量聚丙烯酸钠和氯化铜溶液作为分散剂和酶激活剂,经过溶血、热变、超滤浓缩、冷冻干燥等步骤,从猪血液中分离SOD。结果:新工艺分离出SOD的活力达到3000 u/mg以上,达到有机溶剂提取和高浓度盐析提取得到的活力水平,经SephadexG-75纯化后在SDS-PAGE上显示单一条带。结论:低分子量聚丙烯酸钠和氯化铜溶液可作为SOD提取的分散剂和酶激活剂,对大量制备该产品具有一定的参考价值。
- 王保全王冠李昭华庞晓斌董先智
- 关键词：血液超氧化物歧化酶聚丙烯酸钠氯化铜
- IMRT联合白蛋白结合型紫杉醇与吉西他滨治疗晚期胰腺癌的临床观察与效果评估被引量：1
- 2019年
- 胰腺癌是一种恶性程度极高,诊断和治疗都很困难的消化道恶性肿瘤疾病。截至目前,除了手术治疗外,尚未有其他很好的治疗措施[1,2]。基于胰腺癌难以治愈的特点,后续的放疗、化疗措施对延续患者的生存时间就显得十分重要[3-5]。白蛋白结合型紫杉醇(nab-paclitaxel,Nab-P)是新一代靶向紫杉醇制剂,它不需要合成的溶剂作为载体,不需要皮质固醇或抗组胺类药物等预处理,静脉滴注时间短(30 min),其利用了白蛋白的自然生物特性,临床前的研究模型证实了Nab-P与传统溶剂相比,抗肿瘤活性明显增强[6-11]。
- 张玉山王保全周黎明张永州郭建阔平娟史朝辉
- 关键词：IMRT白蛋白结合型紫杉醇吉西他滨晚期胰腺癌
