孙桂芝
- 作品数:46 被引量:204H指数:11
- 供职机构:上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市自然科学基金卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 流式细胞仪三标记法检测白细胞介素-10对人树突状细胞表型的影响被引量:1
- 2005年
- 目的观察白细胞介素(IL)10对体外培养人树突状细胞(DC)表型的影响,探讨流式细胞术三色荧光标记抗体检测细胞表面抗原的方法及意义。方法通过SCF、GMCSF、TGFβ1、Flt3和TNFα体外培养体系,将脐血CD34+造血干细胞诱导扩增获得DC,并于成熟过程中用重组人IL10进行干预。采用流式细胞术的三色荧光标记(FITC、PE、CY)单克隆抗体直接检测技术,分析细胞表型CD1a、CD11c、CD83、CD80、CD86和HLADR。结果IL10可下调成熟中DC表面CD11c、CD83、CD80和CD86的表达。结论IL10通过抑制DC表面黏附共刺激分子表达,可调节DC的递呈抗原功能;此外,采用流式细胞仪的三色荧光标记检测方法,不仅可以节约DC细胞用量,而且具有快速和准确的优点,值得推广应用。
- 史桂英孙桂芝周同金慧芳张玉梅赵亚鹏陈楠
- 关键词:流式细胞术树突状细胞细胞表型白细胞介素-10
- SARS相关急性肺损伤与抗粘附免疫调节被引量:2
- 2003年
- SARS作为急性呼吸道传染病,其肺损伤的早期与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)有关,后期表现为肺纤维化。患者体内免疫防御机制可出现什对SARS病毒的过度激活,造成肺部白细胞免疫炎性损伤。粘附分子及其介导的白细胞粘附可能参与了SARS的急性肺损伤。设想在病毒感染早期,通过抗粘附免疫调节,抑制患者过激的免疫防御机制,阻抑活化白细胞的粘附级联反应,进而减轻肺损伤;以减轻或延缓病变的进一步发展。
- 孙桂芝李晓周同张冬青邓伟吾陈楠
- 关键词:SARS肺损伤免疫调节
- 慢性肾脏病患者外周血P-选择素变化及其临床意义被引量:3
- 2004年
- 目的观察不同分期慢性肾脏病 (CKD)患者血中P -选择素浓度 ,探讨与肾损害的关系。方法选取2004年我科收治住院的CKD患者90例 ,其中男53名 ,女37名 ,平均年龄 (41.4±18.1)岁。所有患者均经病理诊断或临床确诊 ,且均符合CKD的诊断标准。此外40例健康志愿者作为对照。血中P -选择素浓度检测采用ELISA方法。结果CKD患者血中P-选择素浓度 (29.92±11.44)ng/ml明显高于正常人水平 (19.50±9.37)ng/ml(P<0.05)。随患者肾功能损害程度加重 ,血中P -选择素水平又呈逐渐下降趋势 ,且其浓度与CKD分期呈明显负相关(r= -0.314,P<0.05)。结论血中P-选择素可反映并可作为CKD辅助诊断与疾病进展评价指标 ,对指导临床诊疗工作具有重要意义。
- 周同孙桂芝赵亚鹏陈楠
- 关键词:P-选择素黏附分子慢性肾脏病
- 人DC体外分化成熟特性及抗P-选择素功能域单抗对其干预调节被引量:2
- 2006年
- 结合树突状细胞(DC)生物学特性,探讨抗P-选择素lectin-EGF功能域单抗(PsL-EGFmAb)对体外培养人DC成熟和功能干预调节的作用.通过SCF,GM-CSF,TGF-β1,Flt-3L及TNF-α体外培养体系,从脐血CD34+造血干细胞中诱导扩增获得DC,并于细胞成熟过程中用PsL-EGFmAb及辅以IL-10作为对照进行干预.分别观察和检测DC形态学及细胞活力,细胞表面分子HLA-DR,CD1a,CD11c,CD54,CD83,CD80,CD86,CD209(DC-SIGN)及CD62P,E,L(P-、E-、L-选择素)表达,细胞内活性氧(ROS)水平,及IL-12p35,p40 mRNA与NF-κBP50,P65 mRNA表达,培养上清液中IL-12p70分泌含量,以及DC体外对T淋巴细胞刺激能力,以此分析PsL-EGFmAb对DC成熟与功能的干预状况.结果显示,未成熟DC高表达属模式识别受体的C型凝集素DC-SIGN外,且胞内蓄积适量ROS,具备了细胞吞噬能力.成熟DC除仍高表达DC-SIGN,伴随细胞内NF-κB基因明显表达,其表面黏附共刺激分子CD11c,CD83,CD80,CD86表达上调,且细胞因子IL-12合成分泌增加,并具明显的体外刺激T淋巴细胞增殖能力,符合于抗原提呈细胞特征.此外,未成熟和成熟DC基本不表达P-,E-选择素,而分别高表达和低表达L-选择素.进一步发现,PsL-EGFmAb较对照IL-10对DC表面DC-SIGN表达有抑制作用;也能抑制细胞内NF-κB基因表达,并相应抑制或下调DC黏附共刺激分子CD11c,CD83,CD80,CD86及HLA-DR表达,抑制IL-12基因转录及其合成分泌,以及抑制DC体外刺激T细胞增殖的能力.上述结果表明,PsL-EGFmAb对DC分化成熟及功能具有抑制作用,提示此作用与其抑制作为DC模式识别受体及功能分子DC-SIGN有关,并可能是通过影响NF-κB信号途径起作用.
- 周同张雁云孙桂芝张玉梅倪培华陈永熙吴开胤张冬青陈楠
- 关键词:树突状细胞分化成熟C型凝集素DC-SIGN
- 树突状细胞在狼疮性肾炎肾组织中的分布及其临床意义被引量:8
- 2004年
- 经肾活检和临床资料确诊的LN患者 5 3例 ,采用免疫荧光双标记染色与低照度荧光图像分析检测方法 ,观察到LN患者肾组织中树突状细胞分布的面积、数量及密度均明显增多。树突状细胞主要分布于肾小管间质和肾血管 ,而肾小球基本未见分布。此外 ,树突状细胞在肾小管间质分布程度与肾小管间质病变程度及肾功能呈正相关。提示树突状细胞可能参与了狼疮性肾炎的发病机制 。
- 李晓周同孙桂芝吴开胤郝翠兰陈玉英胡庆沈陈楠
- 关键词:树突状细胞狼疮性肾炎肾组织肾小管间质病变免疫病理学
- 白细胞介素-10对人树突状细胞表型及致炎细胞因子分泌的影响被引量:3
- 2004年
- 目的 观察白细胞介素(IL)-10对体外培养人树突状细胞(DC)表型和致炎细胞因子IL-12分泌的影响,探讨IL-10对DC炎性成熟过程中的负调节作用。方法 通过SCF、GM-CSF、TGF-β1、Flt-3和TNF-α体外培养体系,从脐血CD34+造血干细胞中诱导扩增获得DC,并于细胞成熟中用重组人IL-10进行干预。流式细胞仪分析细胞表型CD1a、CD11c、CD83、CD80、CD86和HLA-DR;RT-PCR检测IL-12 p35、p40mRNA表达;ELISA法测定IL-12p70分泌的含量。结果 IL-10可下调成熟中DC表面CD11c、CD83、CD80和CD86的表达,同时可抑制DC内IL-12p35、p40mRNA的转录和IL-12p70的分泌。结论 IL-10可抑制DC黏附共刺激分子表达和致炎细胞因子的合成,提示其不仅可调抑DC的递呈抗原功能,且参与了炎症局部微环境的调节。
- 孙桂芝周同张玉梅吴开胤张冬青陈楠
- 关键词:白细胞介素-10树突状细胞细胞表型致炎细胞因子
- 抗P-选择素功能域单抗体外抗黏附作用的实验研究被引量:3
- 2004年
- 目的 观察针对P-选择素的抗P-选择素lectin-EGF功能域单抗(PsL-EGFmAb)体外抗黏附功能。方法 常规培养或制备人脐静脉内皮细胞(ECV-304)、中性粒细胞及肾小管上皮细胞(HK2细胞),并对ECV-304和HK2细胞行炎症因子TNF-α刺激,然后观察和比较经PsL-EGFmAb和抗P-选择素全长单抗以及配体拈抗剂N-去硫酸肝素处理前后,中性粒细胞与ECV-304细胞黏附变化,以及HK2细胞的黏附分子(P-选择素)和共刺激分子(CD80)表达情况。结果 经PsL-EGFmAb等三种药物处理后,中性粒细胞与受刺激ECV-304细胞黏附量随药物浓度均下降,受刺激后HK2细胞的P-选择素表达及CD80mRNA转录水平也均受到抑制,其中尤以PsL-EGFmAb抗黏附抑制效应更明显。结论 抗P-选择素功能域单抗较其他两种药物更具体外抗黏附靶向抑制效应,为进一步研究针对P-选择索抗黏附作用提供了基础。
- 周同王锋孙桂芝张玉梅张冬青陈楠
- 关键词:细胞黏附
- 抗P-选择素功能域单抗对急性肾损伤防治及免疫防御功能的影响被引量:16
- 2004年
- 目的 探讨抗P-选择素lectin-EGF功能域单抗(PsL-EGFmAb)对大鼠急性肾损伤防治及机体免疫防御功能影响。方法 建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,观察和比较经PsL-EGFmAb及其配体拮抗剂N-去硫酸肝素处理前后,大鼠肾组织P-选择素及其mRNA表达、组织病理学改变、肾功能变化以及免疫细胞功能状态。结果 肾缺血再灌注后,大鼠肾内以肾小管上皮细胞为主P-选择素表达增强,出现明显的组织病理学改变及肾功能损害;同时体内T、B细胞活性受抑,而NK细胞明显激活。经给予PsL-EGFmAb及其配体拮抗剂N-去硫酸肝素处理后,肾组织P-选择素及其mRNA表达受抑,病理学改变及肾功能损害减轻,尤以PsL-EGFmAb治疗效果更为明显;此外大鼠体内三种免疫细胞功能均受到不同程度的调节。结论 抗P-选择素功能域单抗对肾缺血再灌注损伤具有防治作用,其抗黏附靶向效果强于N-去硫酸肝素,并对大鼠免疫防御功能可能具有调节作用。
- 周同王锋孙桂芝张玉梅张明均张冬青陈楠
- 关键词:功能域单抗急性肾损伤免疫防御功能肾缺血再灌注损伤
- 细胞黏附分子与肾脏疾病被引量:7
- 2004年
- 由黏附分子介导的细胞间、细胞与细胞外基质黏附的细胞黏附机制,是多细胞生物体最基本的生物学现象,也是参与 肾脏等多种疾病免疫病理损伤过程的物质基础。其在肾脏炎性病变、肾小管损伤、肾间质纤维化等发生发展中起重要作用。而 针对黏附分子的抗黏附调节,将可能成为肾脏等多种疾病的有效防治手段。
- 张玉梅孙桂芝周同
- 关键词:细胞黏附分子肾脏疾病生理活动
- 体外培养人树突状细胞分化成熟特性分析被引量:9
- 2006年
- 目的利用人脐血CD34+干细胞诱导分化树突状细胞(DC),并对DC分化发育过程的生物学特性进行鉴定和分析。方法通过SCF、GM-CSF、TGF-β1、F lt-3L及TNF-α体外培养体系,从脐血CD34+造血干细胞中诱导扩增获得DC。采用倒置显微镜和电镜观察DC形态学特征,流式细胞仪检测DC细胞表型及胞内活性氧(ROS)水平,MTT比色法检测DC刺激同种异体T细胞增殖能力;ELISA法检测DC培养上清液中IL-12含量。结果CD34+细胞培养5至7 d,细胞呈现DC典型树突状形态,处未成熟状态,再经TNF-α诱导及继续培养至14 d,DC发育成熟。未成熟DC表达模式识别受体CD209(DC-SIGN),且胞内蓄积适量ROS,具备了细胞吞噬能力。成熟DC除仍高表达DC-SIGN,其表面黏附共刺激分子CD llc、CD54、CD83、CD80、CD86表达上调,细胞因子IL-12分泌增加,且具明显的体外刺激T细胞增殖能力,符合于抗原递呈细胞特征。此外,未成熟和成熟DC基本不表达黏附分子P-、E-选择素,但未成熟和成熟DC分别高表达和低表达L-选择素。结论建立人DC体外模型及其分化发育生物学特性分析,为进一步研究DC功能,以及利用DC调控免疫应答用于疾病防治提供了基础。
- 张玉梅孙桂芝周同赵亚鹏张雁云张冬青陈楠
- 关键词:树突状细胞分化