姜涛
- 作品数：189 被引量：473H指数：10
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划全军“十五”指令性课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学环境科学与工程更多>>
- 控制性肺膨胀治疗海水淹溺肺损伤兔的实验研究被引量：9
- 2007年
- 目的观察控制性肺膨胀(SI)在海水淹溺急性肺损伤(SWD-ALI)中的治疗作用和安全性。方法应用保护性机械通气策略联合SI对SWD-ALI兔进行分组救治,在不同时间点观察血气分析、呼吸动力学、血流动力学、肺损伤指标,并进行肺组织学检查,以评价治疗效果和安全性。结果实施SI治疗后血气分析示血氧分压(PaO2)等指标有明显改善(P<0.05),肺顺应性也得到明显好转(P<0.05),呼吸动力学、血流动力学无显著恶化,影像学检查结果显示肺内渗出得到明显吸收。结论SI与肺保护性通气策略联合应用治疗SWD-ALI能够明显改善氧合,改善肺顺应性,是一种安全有效的治疗SWD-ALI的机械通气手段。
- 韩志海段蕴铀刘于红冯华松张志诚姜涛王大鹏
- 关键词：控制性肺膨胀急性肺损伤
- 登革4型病毒基因组cHP发卡结构对病毒复制和翻译的调控作用被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨登革4型病毒C基因中保守的cHP发卡结构对病毒复制和翻译的调控作用。方法:首先在获得含有海肾荧光素酶(Renilla luciferase,R.luc)报告基因的复制子(DEN-R.luc2A-RP)基础上,利用重叠PCR构建cHP发卡结构系列突变体(cHP1～cHP6)。将构建的突变体(包括相关的阳性和阴性对照复制子)分别线性化并体外转录成RNA后,取等量各转录体RNA,以脂质体法分别转染BHK-21细胞。通过间接免疫荧光(IFA)、RT-PCR、R.luc报告基因检测技术和实时定量RT-PCR对突变体的复制和翻译进行检测。结果:cHP发卡结构系列突变体均可在BHK-21细胞中复制并稳定表达病毒特异蛋白,在该发卡结构中引入缺失或突变对病毒早期翻译并无显著影响,但病毒RNA复制均显著下调。结论:cHP发卡结构在基因组RNA复制过程中可能具有重要的调控作用。
- 于学东姜涛陈水平邓永强韩剑峰赵慧李晓峰刘然于曼秦成峰秦鄂德
- 关键词：登革病毒复制子报告基因翻译
- 重要蚊媒黄病毒对IFN-α介导的信号转导通路的抑制作用被引量：1
- 2008年
- 目的:比较并探讨日本脑炎病毒Beijing-1株和登革2型病毒43株对宿主细胞内IFN-α介导的信号转导通路抑制作用的机制。方法:采用含萤火虫荧光素酶(Luciferase,Luc)报告基因的重组载体pISRE-Luc,通过检测IFN刺激应答元件(IFN-stimulated response element,ISRE)活性对病毒感染细胞内IFN-α介导的JAK-STAT信号转导通路的抑制作用进行定量分析。利用间接免疫荧光法观察在IFN-α作用下病毒感染细胞内STAT1分子的分布情况。进一步采用Western印迹分别检测在这两种病毒感染状态下宿主细胞内STAT1、JAK1和TYK2的磷酸化水平。结果:感染日本脑炎病毒和登革病毒的细胞在IFN-α作用下,ISRE活性与对照组相比均显著下降,而且日本脑炎病毒对宿主细胞内ISRE活性的抑制程度明显强于登革病毒;进一步研究发现,日本脑炎病毒可通过抑制JAK1和TYK2两种激酶的活性,降低STAT1的磷酸化水平,阻碍STAT1的核转运;而登革病毒则只抑制TYK2激酶的活化,降低STAT1的磷酸化及核转运水平。结论:日本脑炎病毒和登革病毒可通过不同的作用机制抑制IFN-α介导的JAK-STAT信号转导通路。
- 赵慧邓永强陈水平姜涛韩剑峰秦成峰秦鄂德
- 关键词：日本脑炎病毒登革病毒
- 金黄色葡萄球菌核酸酶在大肠杆菌中的表达及其活性分析被引量：2
- 2005年
- 目的:构建金黄色葡萄球菌核酸酶(SN)基因的原核表达载体,研究其在大肠杆菌中的表达,并制备兔抗SN抗体。方法:从质粒pPLCSN中扩增SN基因片段,插入表达载体pLEX后转化大肠杆菌GI724,以色氨酸诱导表达。以表达的重组蛋白免疫日本大耳白兔制备抗SN抗体,用Westernblot分析兔抗SN抗体的特异性。结果:重组表达载体pLEXSN在大肠杆菌中获得表达,表达的可溶性蛋白占菌体蛋白总量的37%,具有良好的生物学活性。制备的兔抗SN抗体能够特异识别SN。结论:成功地在大肠杆菌中表达具有生物学活性的SN,并制备了兔抗SN抗体,为进一步探讨其作为抗病毒因子应用于病毒性疾病的治疗奠定了基础。
- 秦成峰秦鄂德于曼姜涛陈水平邓永强段鸿元
- 关键词：葡萄球菌核酸酶抗体
- 高功率微波对兔眼晶状体辐射损伤的研究
- 2004年
- 目的 探讨高功率微波 (HPM)辐射对兔眼晶状体的损伤作用。方法 80 0mW /cm2 功率密度的HPM辐射青紫蓝兔 2 0min ,于照后不同时间应用裂隙灯、光镜、激光扫描共聚焦显微镜和图像分析技术对兔眼晶状体辐射损伤进行检测。结果 HPM照射后 3 0d晶状体改变以变性为主 ,上皮细胞AgNOR和DNA含量明显下降。照射后 90d晶状体囊膜增厚 ,上皮细胞增生 ,AgNOR和DNA含量反跳性明显升高 ,晶状体后皮质混浊 ,白内障发生 ,随着时间的推移 ,病变持续性加重。结论 HPM可导致晶状体损伤及白内障发生 ,辐射引起上皮细胞增殖异常是白内障发生的重要原因。
- 姜涛王德文张建单清高亚兵彭瑞云谷庆阳
- 关键词：晶状体白内障
- 西尼罗病毒RNA复制子系统的建立与应用
- 2013年
- 目的构建具有复制和表达活性的RNA形式的西尼罗病毒(WNV)复制子。方法在DNA形式的WNV复制子pWNrep的基础上,将其CMV启动子替换成SP6启动子,并在3'UTR端引入PacⅠ酶切位点,构建复制子克隆pSP6-WNrep。同时,将增强型绿色荧光蛋白(eGFP)和海肾荧光素酶(R.luc)报告基因分别插入上述复制子质粒中,获得含有报告基因的复制子pSP6-WNrep/eGFP和pSP6-WNrep/R.luc。将上述克隆线性化后进行体外转录,将转录体RNA转染BHK-21细胞,观察不同时间点绿色荧光蛋白(GFP)的活性和R.luc活性。结果与结论获得了WNV复制子pSP6-WNrep、pSP6-WNrep/eGFP和pSP6-WNrep/R.luc,酶切和测序鉴定结果显示,序列与预期一致。将含有报告基因的复制子转染细胞72 h后仍能观察到荧光信号,R.luc的活性随时间延长而增强。本研究成功构建了WNV Chin-01株的RNA复制子,该复制子能够在哺乳动物细胞中有效复制并表达外源蛋白,为下一步构建WNV单轮感染病毒样颗粒奠定了基础。
- 张富军李晓峰曹飞赵慧邓永强朱舜亚姜涛秦鄂德秦成峰
- 关键词：RNA西尼罗病毒复制子转染
- 我国SARS病毒BJ01株基因组亚cDNA克隆的构建与鉴定被引量：2
- 2004年
- 目的 :构建我国SARS病毒BJ0 1株基因组全序列的亚cDNA克隆 ,为进一步构建该毒株的全长感染性cDNA克隆奠定基础。方法 :根据BJ0 1株病毒基因组序列中含有的特异酶切位点 ,利用DNAstar软件设计 7对引物 ,然后通过RT PCR扩增出覆盖病毒基因组全长的 7个cDNA片段 ,并分别将其克隆至pGEM TEasy或Topo载体。结果与结论 :已构建出SARS CoVBJ0 1株基因组的 7个亚cDNA克隆 ,经酶切鉴定和序列测定表明 ,所获得的cDNA克隆为BJ0 1株病毒的特异序列。
- 赵卓韩剑峰范宝昌陈水平姜涛于曼何维明祝庆余秦鄂德
- 关键词：RT-PCRCDNA克隆
- 应用一步和套式PCR法检测SARS患者标本中的SARS病毒核酸序列被引量：2
- 2003年
- 目的 :建立敏感、特异和快速的针对SARS病毒的RT_PCR方法 ,为SARS的早期诊断及防治提供依据。方法 :采用一步和套式PCR法对SARS患者不同标本中的SARS病毒RNA进行扩增及序列测定。结果与结论 :应用外引物和内引物可分别扩增出约 380bp和 1 5 0bp的单一条带 ,其大小与预期的相一致。应用套式PCR可使检测敏感性从 1 0 _6提高到 1 0 _1 5。采用这种方法从SARS患者粪便、痰、鼻咽拭子和血液标本中均可扩增出与预期大小一致的条带 ,且测序结果显示该扩增片段为SARS病毒的特异序列 ,表明本研究建立的RT_PCR方法敏感、特异 。
- 邓永强姜涛范宝昌于曼彭文明段鸿元赵秋敏詹玲祝庆余秦鄂德
- 关键词：重症急性呼吸综合征一步法RT-PCR套式PCR
- SARS病毒BJ01株核壳蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定被引量：3
- 2005年
- 通过RTPCR从SARS病毒BJ01株的RNA中扩增全长N基因,经凝胶回收后插入pBAD/TOPOThioFusion表达载体。然后在Top10中利用阿拉伯糖进行诱导表达,在优化的条件下,表达产物以可溶性为主,表达量约占细菌可溶性总蛋白的47%。表达产物采用ProBond蛋白纯化系统纯化后,目的蛋白约占67%。经免疫印迹法检测,表达产物与SARS病人恢复期血清和兔的抗血清均可进行特异反应。BJ01株核壳蛋白在大肠杆菌中的高效可溶性表达为后续的ELISA试剂盒的研制奠定了基础。
- 陈水平刘素辉范宝昌赵慧姜涛秦成峰杨保安秦鄂德
- 关键词：SARS冠状病毒核壳蛋白可溶性表达纯化
- 电磁脉冲对猴、犬、兔眼辐射损伤的对比研究
- 目的:采用高场强电磁脉冲(electromagnetic pulse,EMP)辐射猴、犬、兔,观察角膜、晶状体和视网膜的病理变化,对比研究EMP 对3种动物视觉系统的影响。方法:6×10V/m 场强的EMP 重复辐射猴、...
- 姜涛王德文张建高亚兵胡文华王水明彭瑞云
- 关键词：电磁脉冲
- 文献传递
