夏庆杰
- 作品数：11 被引量：63H指数：5
- 供职机构：华西医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- mRNA差异显示法克隆原发无精症相关基因被引量：5
- 1999年
- 目的克隆与原发无精症发病相关的基因。方法运用改进的ｍＲＮＡ差异显示技术，从原发无精症患者和正常成人睾丸组织中获得两者的差异表达片段，即表达序列标志（ｅｘｐｒｅｓｓｅｄｓｅｑｕｅｎｃｅ－ｔａｇ，ＥＳＴ），并克隆测序分析。结果正常成人和原发无精症患者的睾丸组织存在明显的基因表达差异。所分析的５个在正常成人睾丸中表达、而在患者组织中不表达的差异片段中，１个与ＧｅｎＢａｎｋ中ｃｏｓｍｉｄＬ２７ｈ９的部分序列１００％同源，该ｃｏｓｍｉｄ插入序列位于４ｐ１６．３的亨廷顿舞蹈病基因区（Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ＇ｓｄｉｓｅａｓｅｒｅｇｉｏｎ），另４个为无同源序列的新基因片段。结论４ｐ１６．３的亨廷顿舞蹈病基因区可能与原发无精症相关，并在睾丸中表达。
- 杨均肖翠英张思仲黄明孔范天勇夏庆杰
- 关键词：MRNA差异显示不育症
- 类胰岛素生长因子-1及其受体mRNA在培养肌腱细胞内的表达被引量：13
- 1997年
- 为了进一步探讨类胰岛素生长因子－１（ＩＧＦ－１）受体系统在培养肌腱细胞群体生命活动中的变化，采用地高辛标记的ＩＧＦ－１及其受体基因的寡核苷酸探针，对原代、第６代及第１３代肌腱细胞ＲＮＡ进行杂交，探测ＩＧＦ－１及其受体在上述细胞中的ｍＲＮＡ表达。结果发现，上述三种细胞均表达ＩＧＦ－１受体ｍＲＮＡ；只有原代和第６代细胞表达ＩＧＦ－１ｍＲＮＡ，而第１３代细胞不表达ＩＧＦ－１ｍＲＮＡ。提示，ＩＧＦ－１ｍＲＮＡ不表达可能是导致第１３代肌腱细胞增殖能力下降的原因之一。
- 项舟杨志明夏庆杰张朝良张朝良
- 关键词：IGF-1肌腱细胞受体MRNA
- 碱性成纤维细胞生长因子在周围神经损伤局部的基因表达与细胞定位被引量：3
- 2000年
- 目的观察碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor ,bFGF)mRNA在周围神经损伤后的局部表达规律及细胞定位。方法60只Wistar大鼠随机分为正常组(4只)、对照组和实验组(各28只)。用改良持针器钳夹大鼠坐骨神经制成神经挤压伤模型 ,分别于术后4h ,1、3、7、14、21、28d处死大鼠 ,切取包括挤压伤及其上下各2mm的神经段 ,应用引物原位标记技术 (primedinsitulabel ing,PRINS) ,结合光镜及计算机图像分析系统检测损伤局部的bFGFmRNA表达变化及细胞定位 ,分别以图像分析结果中灰度值和阳性面积值表示bFGFmRNA的表达强度和阳性细胞数。结果实验组于术后4h ,表达强度开始增加 (176.07±16.64) ,阳性细胞数增多[(725.33±60.45) μm2] ,与正常组及对照组比较差异有显著性意义 (均P<0.05) ;术后7d ,表达强度最高(122.89±10.77) ,阳性细胞数最多[(1876.35±108.40)μm2] ,与对照组比较差异有显著性意义 (均P<0.05) ;术后28d表达强度(189.85±19.51)及阳性细胞数[(605.25±36.40) μm2]均降至正常组及对照组水平 (P>0.05)。
- 池雷霆裴福兴王光林夏庆杰杨静刘涟
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子细胞定位周围神经损伤
- 双链引物聚合酶链反应
- 1999年
- 目的 建立一种操作简单、不仅能够在反应开始之前发挥预防和降低非特异性扩增，而且能够在整个反应过程中都发挥这种作用的 Ｄ Ｎ Ａ 体外扩增技术。方法 人工合成脆性 Ｘ 智力低下１ 号基因（ Ｆ Ｍ Ｒ１）５′非翻译区序列特异单链引物和与其互补的引物，并将后者的３′末端进行修饰，使其失去延伸能力；最后将它们混合并退火成双链引物，再将双链引物加入 Ｐ Ｃ Ｒ 反应体系中进行热循环扩增。结果 在１５ 个标本的双链引物 Ｐ Ｃ Ｒ 反应中都得到了较使用常规 Ｐ Ｃ Ｒ 特异性更高的扩增产物。结论 双链引物 Ｐ Ｃ Ｒ 是一种特异性更好的 Ｄ Ｎ Ａ 体外扩增技术。
- 夏庆杰张思仲丁兰武辉
- 关键词：聚合酶链反应特异性基因诊断
- 全文增补中
- 周围神经损伤后碱性成纤维细胞生长因子mRNA表达的实验研究被引量：5
- 1999年
- 目的 研究大鼠坐骨神经钳夹伤后碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）ｍＲＮＡ表达的变化规律。方法 １０２ 只Ｗｉｓｔａｒ 大鼠随机分为正常组６ 只，对照及实验组各４８ 只，用持针钳钳夹坐骨神经，于伤后４ 小时、１，３，７，１０，１４，２１，２８ 天采用逆转录－ 聚合酶链反应技术（ＲＴ－ ＰＣＲ） 结合聚丙烯酰胺凝胶电泳及ａｌｐｈａ－３２ｐ－ ｄＣＴＰ放射自显影，检测大鼠坐骨神经钳夹伤局部、腰４ ～６ 背根节及相应脊髓节段ｂＦＧＦｍＲＮＡ的动态变化。结果 实验组伤后４ 小时ｂＦＧＦｍＲＮＡ在损伤局部、脊髓及背根节的表达均开始增强，分别为１．４１±０．１０，１．７８±０ ．１０ 和２．１７±０．１２；伤后７ 天表达值最高，分别为２．７２±０．１４，３ ．６５±０．１７ 和３．９０ ±０．０６；伤后２８ 天表达值为１．２３ ±０．０６ ，１．４３±０ ．０５，１ ．７８±０．０３，降至正常及对照组水平（Ｐ＞ ０．０５）。
- 池雷霆裴福兴王光林杨均夏庆杰丁兰杨静
- 关键词：周围神经损伤BFGFMRNART-PCR
- 冠状动脉粥样硬化性心脏病患者脂蛋白酯酶基因的单核苷酸多态性的初步研究被引量：20
- 2000年
- 目的 探讨脂蛋白酯酶基因 (lipoprotein lipase,L PL)单核苷酸多态性 (single nucleotidepolymorphisms,SNP)与冠状动脉粥样硬化性心脏病 (简称冠心病 )的关系。方法 利用聚合酶链反应扩增110名健康人和 10 2例冠心病患者 L PL 基因第 6外显子和第 6内含子的片段 ,采用温度调控高效液相色谱技术对扩增的片段进行了筛查 ,对筛查到的杂合片段进行序列测定 ,并与正常序列进行对照分析。结果 在L PL 基因第 6内含子中发现了 3个尚未报道的 SNP(42 12 t/ c、45 0 9t/ c、45 76 a/ c)。它们的频率在被检测的冠心病患者和健康人群中存在差异 ,其中 42 12 t/ c、45 76 a/ c两组间差异显著 (P<0 .0 5 )。结论 补充了 L PL基因 SNPs的数据库信息。L PL基因
- 苏智广张思仲侯一平张立廖林川夏庆杰肖翠英孟海英颜有仪
- 关键词：单核苷酸多态性冠心病DNA序列
- DNA自动测序中几种影响因素的研究被引量：3
- 1998年
- 目的探讨恒温ＤＮＡ自动测序中几种因素对测序结果的影响。方法对ＤＮＡ纯度、浓度和测序过程中所用水的质量对ＤＮＡ自动测序结果的影响进行了回顾性研究。结果当ＤＮＡ纯度较低时，核苷酸曲线的信噪比降低，或多个核苷酸峰重叠而判读困难；使用低浓度ＤＮＡ时，所能判读的核苷酸长度明显短于较高浓度时；测序反应过程中和配制测序胶时所用的纯水水质较差时，核苷酸峰可变宽、变平，或出现双峰，影响判读结果。结论ＤＮＡ纯度和浓度以及测序反应中及配制测序胶时所用水的质量对测序结果有明显影响。提示恒温ＤＮＡ自动测序时须使用高纯度的ＤＮＡ和高质量的纯水；若要获得较长ＤＮＡ片段的序列。
- 肖翠英张思仲武辉夏庆杰
- 关键词：DNA测序水质
- UT-PCR——一种扩增未知序列微量 DNA 片段的方法被引量：6
- 1997年
- ＵＴ－ＰＣＲ——一种扩增未知序列微量ＤＮＡ片段的方法夏庆杰张思仲肖翠英武辉在致病基因的突变分析、分离克隆等医学分子生物学研究中，常常遇到这样的问题：虽然已经获得感兴趣的某ＤＮＡ片段，但由于量太微而难以继续进行克隆、测序、探针制备等操作。我们介绍一种能...
- 夏庆杰张思仲肖翠英武辉
- 关键词：扩增DNA片断
- 全文增补中
- PCR产物末端性质的分析研究
- 2000年
- 利用PCR、UT PCR、克隆及测序等技术 ,对强直性肌营养不良基因 (MT PK) 3′ 非翻译区分别用Taq ,Taq +PwoDNA聚合酶进行了扩增、克隆和测序 ,研究了PCR产物末端组成情况 ,并比较了上述两种DNA聚合酶对PCR产物末端的影响 .结果在用TaqDNA聚合酶扩增的PCR产物主要得到 3′端突出 1个A (占 6 7 3% ,35 /5 2 ) ;在Taq +PwoDNA聚合酶扩增的PCR产物末端中得到 3′端 +A的仅占 17 4% ,而 - 1的占 34 8% ,与前者显著不同 .
- 夏庆杰张思仲武辉肖翠英
- 关键词：多样性
- 原发胃癌中p15基因及蛋白表达的异常被引量：7
- 2001年
- 目的检测胃癌组织中p15基因及启动子甲基化状态和P15蛋白表达情况。方法选择p15基因及启动子区域,用PCR-SSCP,MSP(甲基化特异的PCR)法、测序和免疫组化等方法对100例胃癌患者的癌组织和癌旁组织进行检测。结果 11％的病例P15表达阴性,9％的病例具有p15基因启动子区的高甲基化,9％的病例同时有P15表达阴性和p15基因启动子区的高甲基化,p15异常与低分化胃癌有关,p15基因发现两例DNA序列改变。结论 p15基因在胃癌中起一定作用且p15基因启动子区域高甲基化是胃癌中p15基因失活的主要原因。
- 孔样东张思仲胡建坤肖翠英孙岩夏庆杰
- 关键词：胃肿瘤基因表达甲基化原发胃癌P15基因
