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肌腱愈合早期的细胞凋亡和增殖及其分子机制变化被引量：4: 2010年; 目的探讨肌腱损伤后愈合早期细胞凋亡和增殖及相关控制和调控因子的变化。方法采用15只来亨鸡，横断双侧长趾浅、深屈肌腱，后行改良Kessler法修复。分别于术后3、7、14和28d取趾深屈肌腱，以6根正常深屈肌腱作为0d对照组。通过TUNEL法检测腱细胞凋亡，免疫荧光化学法检测增殖细胞核抗原（proliferation cell nuclear antigen，PCNA）和凋亡抑制蛋白bcl-2的表达，显微镜下计数荧光阳性细胞并统计分析，同时切片行苏木素染色观察组织反应和计数细胞总数。结果（1）肌腱术后3、7、14、28d细胞凋亡均显著高于0d对照组（P〈0．05），其中腱内膜区3d凋亡细胞数最多，14d出现明显下降；而外膜区术后各时间点之间差异无统计学意义。（2）术后7d细胞的PCNA蛋白表达较0d对照组显著上升（P〈0．05），14d达到高峰，28d和正常水平差异无统计学意义。（3）bcl-2的变化趋势与PCNA相同。（4）组织炎症反应术后1周内最明显，14d和28d基本消失。结论肌腱损伤3d时细胞大量凋亡，增殖细胞很少；细胞增殖在损伤14d时达到高峰，凋亡下降。bcl-2表达在14d时达高峰，28d时降至正常水平。; 吴亚芳汤锦波陈传好曹怡; 关键词：细胞凋亡增殖细胞核抗原

微量注射不同载体转基因至损伤肌腱的效率、分布和组织反应被引量：1: 2009年; 目的探索微量注射法以不同转基因载体转基因至损伤肌腱的转基因效率、分布和组织反应。方法用微量注射器将10μl携带增强绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein，EGFP）报告基因的pCMV—EGFP、pCAGGS—EGFP、AAV2-EGFP和AdS-EGFP载体直接注射入鸡的损伤并缝合的趾深屈肌腱。在术后第3，7，14，21天分别取肌腱，进行冰冻切片后在荧光显微镜下观察肌腱内的EGFP表达量及分布，并将肌腱切片作HE染色后观察各不同载体在肌腱中引起的炎症反应。结果荧光显微镜下观测发现，注射4种转基因载体的肌腱，转染3d后即可见肌腱内有增强绿色荧光蛋白表达；在第7天时表达最明显；第14天时，各组表达增强绿色荧光蛋白表达量下降；21d时很少有表达增强绿色荧光蛋白的细胞。用微量注射器在腱段两点注射能保证近损伤肌腱内转染细胞均匀分布。注射AAV2-EGFP和AdS-EGFP的肌腱的增强绿色荧光蛋白明显多于质粒载体的增强绿色荧光蛋白，而AAV2-EGFP和Ad5-EGFP两组间无明显差异。HE染色发现质粒载体和AdS—EGFP对肌腱的组织反应较重，可见较多炎症细胞浸润，以淋巴细胞和中性粒细胞为主。注射AAV2-EGFP的肌腱炎症反应较轻。结论用微量注射器在腱段两点注射转基因载体能转染近损伤处的整个肌腱段的细胞。在研究的4种基因治疗方法中，AAV2和AdS在损伤肌腱中的转基因效率最强，在转基因后第7天表达最明显，而且AAV2引起的肌腱组织反应最轻。提示AAV2载体比AdS和质粒载体更有利于作为转基因治疗肌腱损伤的载体，微量注射载体是转基因至损伤肌腱的合适方法。; 陈传好汤锦波吴亚芳曹怡; 关键词：基因治疗

一种手部康复锻炼装置: 本发明公开了一种手部康复锻炼装置，包括顶部开口的安装箱，所述安装箱一侧的内壁安装有多组呈平行设置的训练组件，所述安装箱的另一侧内壁安装有用于放置手的置手板；所述训练组件包括固定在安装箱内壁的固定框，所述固定框的侧壁开设有...; 施平吴亚芳张婧婧

紫杉醇在制备促进肌腱细胞增殖药物中的应用: 本发明公开了紫杉醇或其衍生物、紫杉醇或其衍生物的盐、溶剂化物在制备促进肌腱细胞增殖药物或组织工程材料中的应用。本发明研究结果表明，紫杉醇能够显著抑制肺癌细胞、肺支气管上皮细胞、肺上皮细胞和小鼠心脏成纤维细胞的增殖，而对肌...; 杨娟娟吴亚芳毛伟峰徐思维孙俪函

一种肌腱细胞及其制备方法和应用: 本发明公开了一种肌腱细胞及其制备方法和应用。所述肌腱细胞采用消化法进行培育，传代至9代以上；所述肌腱细胞具有“永生化”状态，“永生化”的肌腱细胞成骨分化能力明显增强，成软骨分化能力减弱，并且能够连续传代，传代后不发生细胞...; 吴亚芳毛伟峰徐思维陈晨

不同载体转基因效率及AAV2介导bFGF基因在肌腱中表达的研究被引量：1: 2009年; 目的:比较腺病毒、腺相关病毒和脂质体-质粒三种载体在肌腱中的基因转染效率并观测腺相关病毒载体介导bFGF基因在肌腱愈合过程中表达。方法:用微量注射器将携带增强绿色荧光蛋白报告基因的三种载体注射入正常肌腱中,用荧光显微镜观测术后不同时间点肌腱内EGFP的表达。将AAV2-bFGF病毒颗粒注入损伤肌腱,使用免疫组化染色观测bFGF在肌腱内表达。结果:三种不同的载体转染肌腱3天后有EGFP表达、7天最明显、14天时下降;21天时少有表达。在同期的时间点,注射腺病毒、腺相关病毒组肌腱内EGFP表达明显强于质粒载体,而腺病毒、腺相关病毒两组之间无较大区别。免疫组化显示注射AAV2-bFGF后的第2、3和4周的肌腱表达很强的bFGF。结论:腺病毒、腺相关病毒载体的基因转染效率高于脂质体-质粒载体,AAV2携带的外源性bFGF基因在肌腱细胞内较强表达,提示我们将来在体内转基因到肌腱的研究中能够选择腺病毒和腺相关病毒载体作为运载基因的工具。; 陈传好吴亚芳曹怡汤锦波; 关键词：基因载体绿色荧光蛋白腺相关病毒肌腱组织

基因治疗导入微小RNA沉默肌腱细胞转化生长因子基因的体外研究和体内应用: 2010年; 目的探讨微小RNA（miRNA）导人肌腱细胞和损伤肌腱沉默转化生长因子（TGF）-β基因的作用及对I、Ⅲ型胶原和结缔组织生长因子（CTGF）基因表达的影响。方法针对鸡TGF-β1基因的mRNA序列，合成4对miRNATGFB1DNA序列和一对不编码序列，分别插入至miRNA质粒载体中，获得5个miRNATGFB1质粒载体，并分别命名为miRNA#1、#2、#3、#4和阴性对照。采用实时PCR技术检测并分析miRNA导入肌腱细胞后TGF-β1、I、Ⅲ型胶原和CTGF基因表达变化。在转基因治疗肌腱1周和6周后，检测TGF-β1、I、Ⅲ型胶原和CTGF基因在体内损伤肌腱中的表达。结果与阴性对照细胞组相比，实时PCR结果分析显示：miRNA#1和舵质粒载体治疗的细胞组TGF-β1基因表达分别下降了68％和43％；在miRNA群1治疗的细胞组，Ⅲ型胶原和CTGF基因表达分别下降70％和68％。使用miRNA#1干扰质粒转基因至体内损伤肌腱结果显示：术后1周，TGFB1基因表达下降67％，而I、Ⅲ型胶原和CTGF基因表达未变化；术后6周，TGF-β1和Ⅲ型胶原基因表达分别下降56％和58％。结论miRNA导入肌腱细胞后TGFB1、Ⅲ型胶原和CTGF基因表达显著下降。导入miRNA至活体损伤肌腱后1周，TGF-β1基因表达显著下降；术后6周，TGF-β1和Ⅲ型胶原基因表达显著下降。; 陈传好汤锦波周友浪曹怡吴亚芳; 关键词：基因沉默基因表达调控转化生长因子Β

一种鸡爪屈肌腱外科手术的固定装置: 本实用新型公开了一种鸡爪屈肌腱外科手术的固定装置，属于鸡外科手术技术领域，包括下箱体和上箱体，下箱体和上箱体的一侧通过第一铰链铰接；上箱体的另一侧固定安装有用于辅助压紧鸡爪的压紧组件；所述下箱体和上箱体的至少一侧还安装有...; 吴亚芳毛伟峰陈晨

鸡肌腱干细胞的分离培养与初步鉴定: 2017年; 为了建立鸡肌腱干细胞的分离培养体系和鉴定方法,试验使用Ⅰ型胶原酶消化20日龄鸡胚肌腱组织,低密度接种得到鸡肌腱干细胞,用结晶紫染色细胞克隆团块,选择50,500,5 000个/cm^2密度接种7~10 d,镜下观察细胞形态,用细胞计数仪测定细胞增殖能力,用分化诱导试剂对细胞进行成脂与成骨分化诱导,采用油红O和碱性磷酸酶进行染色鉴定。结果表明:原代细胞及传代细胞为长梭形,接种7~10 d后开始形成克隆团块,细胞生长曲线呈S型。500个/cm^2的细胞密度接种细胞克隆能力与增殖能力最强;将该密度接种细胞消化后,按1×10~4个/cm^2接种,分别对其进行成脂与成骨诱导,可发现成脂分化过程中有脂滴形成,油红O染色呈阳性;成骨分化过程中有钙结节形成,碱性磷酸酯酶染色呈阳性。说明消化20日龄鸡胚肌腱组织可成功分离出鸡肌腱干细胞,克隆增殖能力强,且具有分化多种细胞的潜能。; 杨纤纤吴亚芳张海骏杜利莉邵义祥; 关键词：分化

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吴亚芳

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