卢建民
- 作品数：36 被引量：102H指数：5
- 供职机构：大连医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生交通运输工程政治法律建筑科学更多>>
- 超声生物显微镜对外伤性睫状体分离缝合复位术的临床应用价值被引量：1
- 2011年
- 目的探讨超声生物显微镜对外伤性睫状体分离的诊断以及缝合复位术治疗的临床意义。方法回顾性分析51例（51眼）外伤性睫状休分离缝合复位术的临床资料，并对有关数据进行统计学分析。结果经超声生物显微镜检查，病例均被确诊为外伤性睫状体分离。缝合复位术后，视力明显提高（P=0．000）。睫状体分离范围与术后眼压恢复至正常范围所需时间以及术后最佳矫正视力提高水平均存在相关性（P=0．002，P=0．011）。睫状体分离病程持续时间与术后最佳矫正视力提高水平存在相关性（P=0．000），而与术后眼压恢复至正常范围所需时间无相关性（P=0．161）。结论超声生物显微镜检查对外伤性睫状体分离的诊断、手术治疗、术后随访以及预后视力评估具有重要的临床应用价值。
- 卢建民宋秀君周忠友
- 关键词：超声生物显微镜睫状体分离
- 中脑星形胶质细胞源性神经营养因子在视网膜Müller细胞中诱导激活p44/42丝裂原活化蛋白激酶信号通路的实验研究被引量：1
- 2019年
- 目的中脑星形胶质细胞源性神经营养因子(MANF)可能对视网膜光感受器细胞和视网膜神经节细胞具有保护性作用。但是其作用机制还不清楚。本研究探索MANF在视网膜上的作用通路,为其在眼科的应用奠定基础。方法选用Sprague-Dawley雄性大鼠25只,体重0.2~0.25 kg。采用数字表法,随机将大鼠分为未处理组和处理组。其中,未处理组5只,处理组左眼注射重组人MANF10μg (3μl),右眼注射磷酸盐缓冲液(PBS)3μl,分别于注射后0.5 h、1 h、2 h及4 h四个时间点取材视网膜,每个时间点5只大鼠。新生大鼠视网膜分离培养原代Müller细胞,100ng/ml MANF处理细胞后,在不同时间点收集细胞Western blot检测磷酸化p44/42丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的表达水平,冰冻切片免疫组化检测MANF诱导活化的磷酸化p44/42MAPK在视网膜上的定位。以Image J图像分析软件分析图像,Western blot条带密度比值和免疫荧光强度为计量资料以(x±s)表示;各时间点与未处理组组间,采用独立样本t检验的方法进行比较。结果 SD大鼠玻璃体腔注射MANF后,磷酸化p44/42MAPK的表达在0.5 h就开始明显升高,1 h达到高峰,较对照玻璃体腔注射PBS组和未处理组差异均具有统计学意义(t=21.18,4.41;P<0.05),然后逐渐下降,4 h降至未处理组水平。冰冻切片免疫组化检查结果显示磷酸化p44/42MAPK阳性的细胞位于视网膜内核层的Müller细胞,其荧光强度显著高于阴性未处理组,差异有统计学意义(t=11.41,P<0.05)。原代培养的Müller细胞经MANF处理后,磷酸化p44/42MAPK在5 min时较未处理组就有显著升高,差异有统计学意义(t=4.48,6.43;P<0.05),15 min达到高峰,差异有统计学意义(t=19.57,9.18;P<0.05),到30 min降至正常水平。结论 p44/42MAPK信号通路参与了MANF的神经保护作用机制。MANF直接作用于视网膜Müller细胞,可能通过与Müller细胞的相互作用起到细胞保护性作用。
- 裴雪婷卢建民Yiwen LiRong Wen
- 关键词：视网膜
- PACK-CXL：治疗感染性角膜炎的角膜胶原交联被引量：5
- 2018年
- 感染性角膜炎是视力不可逆性丧失的主要病因之一。随着多重耐药菌的出现，感染性角膜炎即使得到及时诊断和治疗，也常会导致角膜混浊，甚至溶解穿孔，因此亟待开发新的治疗手段。最近的研究表明，角膜胶原交联（CXL）可通过直接杀伤病原体和增强角膜耐酶消化性等机制发挥治疗感染性角膜炎的作用。为突显CXL在该方面的应用，第九届CXL年会将应用于感染性角膜炎的CXL定义为PACK-CXL。由目前文献推断，PACK-CXL对细菌性角膜炎，特别是角膜溶解穿孔具有良好的辅助治疗作用，对真菌性角膜炎和棘阿米巴性角膜炎的疗效则较弱，对病毒性角膜炎则可能具有恶化作用。本文将对CXL技术原理、技术操作、并发症及预防，PACK-CXL的治疗机制及其在细菌性角膜炎、真菌性角膜炎、棘阿米巴性角膜炎、病毒性角膜炎中的临床应用进展进行综述。
- 秦秀虹孙晓晶卢建民
- 树突状细胞在角膜相关疾病中的作用被引量：1
- 2013年
- 树突状细胞是专职抗原呈递细胞，具有2种不同的功能状态。其中，未成熟树突状细胞可诱导机体免疫耐受，而成熟树突状细胞则可激活初始引发机体免疫反应。而成熟树突状细胞只存在于角膜周边区，未成熟树突状细胞则同时存在于角膜周边区以及中央区。现就树突状细胞在角膜相关疾病中的作用进行综述。
- 卢建民马翔
- 关键词：树突状细胞角膜相关疾病
- 兔骨髓间充质干细胞及人羊膜上皮细胞移植治疗兔角膜缘干细胞缺损的研究被引量：7
- 2011年
- 背景角膜缘干细胞缺乏可引起致盲性眼病，但传统的治疗方法疗效欠佳。最近的研究表明，骨髓间充质干细胞（BMSCs）和人羊膜上皮细胞（AECs）有分化成多种细胞的能力，但其对角膜缘于细胞缺乏的疗效仍有待研究和评价。目的观察和对比兔BMSCs和人AECs移植治疗兔角膜缘干细胞缺损的治疗效果。方法将18只新西兰白兔采用随机数字表法分为羊膜基质（AS）移植组、兔BMSCs移植组和人AECs移植组，每组6只。将浸有NaOH溶液的滤纸贴附于角膜表面建立碱烧伤角膜缘干细胞缺损的动物模型。抽取兔髂窝处骨髓并收集人胎盘组织分别分离、制备兔BMSCs和人AECs，通过密度梯度离心加贴壁培养法及胰蛋白酶多次分步消化法获取兔BMSCs和人AECs，采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法对培养细胞进行鉴定，再接种于人去上皮AS上，按照动物的分组分别将上述材料缝合至动物模型的角膜表面。术后28d，对各组动物的角膜新生血管（CNV）评分以及角膜混浊度评分进行对比，对角膜组织行组织病理学检查并针对角膜上皮细胞特异性标记物细胞角蛋白3（CK3）行免疫组织化学染色。结果第3代兔BMSCs接种于AS载体上12h后贴附生长，第1代人AECs接种于AS载体上48h后呈单层膜状生长，传代细胞经RT—PCR鉴定符合目标细胞的特征。兔BMSCs移植组术后28d，免疫组织化学染色结果显示，兔BMSCs移植组和人AECs移植组的角膜表面细胞CK3均呈阳性表达，而AS组CK3表达阴性。与AS移植组比较，兔BMSCs移植组和人AECs移植组CNV评分以及角膜混浊度评分明显降低，差异均有统计学意义（BMSCs：Z=-2．983，P=0．003；Z=-2．844，P=0．004；AECs：Z=-2．817，P=0．005；Z=-2．041，P=0．041）。组织病理学检查显示，AS组兔角膜组织有较多的炎性细胞生长，胶原纤维排列紊乱。兔BMSCs组术后角膜表层形成了角膜上�
- 卢建民吕秀丽马翔
- 关键词：骨髓间充质干细胞羊膜上皮细胞角膜缘干细胞角膜新生血管
- 适配体及其在老年性黄斑变性治疗中的应用现状被引量：1
- 2017年
- 血管内皮生长因子（VEGF）、血小板源性生长因子（PDGF）和补体在老年性黄斑变性（AMD）的发病过程中发挥着重要作用。以VEGF165为靶分子获取的适配体哌加他尼钠已获美国食品与药品管理局批准用于渗出型AMD的治疗；而以PDGF-B、补体C5为靶分子获取的适配体E10030、ARC1905也已进入临床试验阶段，并均获得较好疗效。目前，针对AMD发病机制中多个作用靶点的联合治疗已成为AMD治疗的发展方向；多靶点拮抗的适配体目前已进入研发阶段，将可能成为AMD治疗的首选药物。
- 卢建民孙晓晶马翔
- 小鼠角膜基质细胞的KSFM培养基培养法
- 2012年
- 目的研究使用KSFM培养基能否获取具有增殖能力且保持生物学特性不变的小鼠角膜基质细胞（CSCs）。方法实验研究。将中央区角膜置于EDTA液（20mmol／L）内孵育45min后，用手术显微镊小心剥离角膜上皮层以及内皮层，并将获取的角膜基质置于含300U／mlⅠ型胶原酶的溶液中消化4h。离心后采用DMEM基础培养基、DMEM完全培养基（含10％FBS）以及KSFM培养基重悬细胞常规培养，并以含1U／m1分散酶的EDTA液消化传代细胞。同时，观察细胞并绘制细胞生长曲线；采用逆转录聚合酶链式反应（RT．PCR）检测细胞角膜蛋白多糖（keratocan）mRNA和乙醛脱氢酶（ALDH）mRNA表达情况；采用细胞免疫荧光染色以及蛋白质印迹方法检测细胞keratocan蛋白的表达情况。采用独立样本≠检验对数据进行统计学分析。结果通过胶原酶消化的方法可以从每只小鼠的角膜基质获取约l×l04个单个细胞。RT-PCR结果显示，原代细胞表达CSCs标记物keratocan和ALDH；免疫荧光染色和蛋白质印迹结果显示：原代细胞表达keratocan蛋白。培养于DMEM基础培养基内的原代CSCs无法增殖。培养于DMEM完全培养基内的CSCs可增殖，但第3代细胞不表达keratocan mRNA和ALDH mRNA以及keratocan蛋白。培养于KSFM培养基内的CSCs也可增殖，第3代细胞仍表达keratocan mRNA和ALDH mRNA以及keratocan蛋白，且与原代细胞相比，表达强度差异无统计学意义。结论KSFM培养基不仅能维持小鼠CSCs的生物学特性不变，还能有效促进细胞增殖。
- 卢建民李小磊王会芳宋秀君
- 关键词：基质细胞角膜细胞增殖生物学特性小鼠
- 真性晶状体囊膜剥脱合并年龄相关性白内障一例被引量：1
- 2017年
- 患者，男，67岁，因左眼无痛性视力下降2年于2014年11月10日至大连医科大学附属第一医院眼科就诊。既往无葡萄膜炎病史，无内眼手术及眼外伤史，否认高温环境、热辐射接触史，无糖尿病、高血压、冠心病等全身疾病史，否认药物过敏史。
- 方石峰卢建民秦秀虹高锦展马翔
- 关键词：年龄相关性白内障晶状体囊膜剥脱药物过敏史视力下降
- Notch信号对高糖诱导人视网膜血管内皮细胞凋亡的保护作用被引量：5
- 2015年
- 目的探讨Notch1信号对高糖情况下多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1[Poly(ADPribose)polymeras-1,PARP-1]和核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)的p50亚单位(NF-κB50)介导的人视网膜血管内皮细胞(retinal vascular endothelial cells,RVECs)凋亡的抑制作用。方法体外培养人RVECs及HEK293T细胞,并进行传代,同时构建高糖(葡萄糖浓度为30 mmol·L-1)人RVECs细胞模型。构建p CMV-ScriptNotch1和p CMV-Script-DLL4质粒,酶切鉴定后Western Blot法检测重组质粒表达目的基因的效果,同时合成si Notch1并转染高糖培养的人RVECs,Western Blot法检测Notch基因敲除效果。应用免疫共沉淀及Western Blot法检测si Notch1对高糖下PARP-1和NF-κB的相互作用的影响;应用Western Blot法检测高糖条件下Notch1/DLL4上调和下调后人RVECs中PARP-1、p-AKT、NF-κB50及caspase-3的表达变化。结果人RVECs复苏后24 h贴壁,细胞呈扁平梭形,3 d左右细胞开始融合呈铺路石样,单层生长,铺满瓶底,并可见接触抑制现象。免疫共沉淀结果显示高糖组培养的人RVECs其PARP-1结合的NF-κB50的量较正常对照组增加;将si Notch1转染高糖组培养的人RVECs后或同时加入DLL4,则人RVECs中PARP-1结合的NF-κB50的量较前增加显著,提示Notch能抑制高糖下PARP-1和NF-κB50的相互作用。Western Blot检测结果显示高糖条件下,Notch1和DLL4上调后其PARP-1及caspase-3表达量较前显著降低;Notch1下调后其PARP-1及caspase-3表达量较前增加;p-AKT表达量则相反;提示Notch信号能抑制高糖诱导的PARP-1及caspase-3的激活及表达。结论高糖情况下Notch信号可调控PARP-1和NF-κB的相互作用,并抑制PARP-1激活引起的人RVECs的凋亡。
- 秦秀虹卢建民邵明阳张珍珍孙晓晶马翔
- 关键词：NOTCH1视网膜血管内皮细胞
- 多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1通过激活NF-κB途径导致高糖人视网膜血管内皮细胞凋亡被引量：5
- 2015年
- 目的探讨多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1[poly(adenosine diphosphate-ribose)polymeras-1,PARP-1]和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)在高糖人视网膜血管内皮细胞(retinal vascular endothelial cells,RVEC)中的相互作用及其在人RVEC中的表达定位及作用机制。方法体外培养人RVEC及HEK293T细胞,并进行传代,同时构建高糖人RVEC细胞模型。构建PARP-EGFP及Flag-NF-κB质粒,酶切鉴定后转染高糖培养的人RVEC,Western blot法检测重组质粒表达目的基因的效果,并应用Western blot法和免疫共沉淀法检测高糖人RVEC中PARP-1和NF-κB的相互作用。PARP-EGFP和Flag-NF-κB质粒共转染人RVEC,激光共聚焦扫描显微镜检测PARP-1和NF-κB在高糖人RVEC中的定位及其相互作用。结果人RVEC复苏后24 h贴壁,细胞呈扁平梭形,3 d左右细胞开始融合呈铺路石样,单层生长,铺满瓶底,并可见接触抑制现象。成功构建PARP-EGFP及Flag-NF-κB质粒,并有效表达目的基因。免疫共沉淀结果显示PARP-1和NF-κB是相互作用的蛋白质,高糖组NF-κB p50的条带比正常对照组明显增粗,并且高糖情况下PARP-1结合NF-κB的量较正常对照组明显增加。激光共聚焦扫描显微镜结果显示PARP和NF-κB均表达于正常的人RVEC的细胞核和核周区域,当受到高浓度葡萄糖影响后,PARP-1和NF-κB均集中表达于细胞核内,尤以NF-κB最显著。结论 PARP-1和NF-κB是相互作用的蛋白质,血糖增高时,PARP-1可能进入细胞核内并结合同时进入细胞核的NF-κB,激活NF-κB信号通路,引起RVEC凋亡,导致DR的发生。
- 卢建民张珍珍郑玥马翔秦秀虹
- 关键词：核因子-ΚB视网膜血管内皮细胞糖尿病视网膜病变
