张珍珍
- 作品数：16 被引量：42H指数：4
- 供职机构：上海交通大学更多>>
- 发文基金：上海市卫生局中医药科研基金国家自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Notch信号对高糖诱导人视网膜血管内皮细胞凋亡的保护作用被引量：6
- 2015年
- 目的探讨Notch1信号对高糖情况下多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1[Poly(ADPribose)polymeras-1,PARP-1]和核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)的p50亚单位(NF-κB50)介导的人视网膜血管内皮细胞(retinal vascular endothelial cells,RVECs)凋亡的抑制作用。方法体外培养人RVECs及HEK293T细胞,并进行传代,同时构建高糖(葡萄糖浓度为30 mmol·L-1)人RVECs细胞模型。构建p CMV-ScriptNotch1和p CMV-Script-DLL4质粒,酶切鉴定后Western Blot法检测重组质粒表达目的基因的效果,同时合成si Notch1并转染高糖培养的人RVECs,Western Blot法检测Notch基因敲除效果。应用免疫共沉淀及Western Blot法检测si Notch1对高糖下PARP-1和NF-κB的相互作用的影响;应用Western Blot法检测高糖条件下Notch1/DLL4上调和下调后人RVECs中PARP-1、p-AKT、NF-κB50及caspase-3的表达变化。结果人RVECs复苏后24 h贴壁,细胞呈扁平梭形,3 d左右细胞开始融合呈铺路石样,单层生长,铺满瓶底,并可见接触抑制现象。免疫共沉淀结果显示高糖组培养的人RVECs其PARP-1结合的NF-κB50的量较正常对照组增加;将si Notch1转染高糖组培养的人RVECs后或同时加入DLL4,则人RVECs中PARP-1结合的NF-κB50的量较前增加显著,提示Notch能抑制高糖下PARP-1和NF-κB50的相互作用。Western Blot检测结果显示高糖条件下,Notch1和DLL4上调后其PARP-1及caspase-3表达量较前显著降低;Notch1下调后其PARP-1及caspase-3表达量较前增加;p-AKT表达量则相反;提示Notch信号能抑制高糖诱导的PARP-1及caspase-3的激活及表达。结论高糖情况下Notch信号可调控PARP-1和NF-κB的相互作用,并抑制PARP-1激活引起的人RVECs的凋亡。
- 秦秀虹卢建民邵明阳张珍珍孙晓晶马翔
- 关键词：NOTCH1视网膜血管内皮细胞
- 多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1通过激活NF-κB途径导致高糖人视网膜血管内皮细胞凋亡被引量：5
- 2015年
- 目的探讨多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1[poly(adenosine diphosphate-ribose)polymeras-1,PARP-1]和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)在高糖人视网膜血管内皮细胞(retinal vascular endothelial cells,RVEC)中的相互作用及其在人RVEC中的表达定位及作用机制。方法体外培养人RVEC及HEK293T细胞,并进行传代,同时构建高糖人RVEC细胞模型。构建PARP-EGFP及Flag-NF-κB质粒,酶切鉴定后转染高糖培养的人RVEC,Western blot法检测重组质粒表达目的基因的效果,并应用Western blot法和免疫共沉淀法检测高糖人RVEC中PARP-1和NF-κB的相互作用。PARP-EGFP和Flag-NF-κB质粒共转染人RVEC,激光共聚焦扫描显微镜检测PARP-1和NF-κB在高糖人RVEC中的定位及其相互作用。结果人RVEC复苏后24 h贴壁,细胞呈扁平梭形,3 d左右细胞开始融合呈铺路石样,单层生长,铺满瓶底,并可见接触抑制现象。成功构建PARP-EGFP及Flag-NF-κB质粒,并有效表达目的基因。免疫共沉淀结果显示PARP-1和NF-κB是相互作用的蛋白质,高糖组NF-κB p50的条带比正常对照组明显增粗,并且高糖情况下PARP-1结合NF-κB的量较正常对照组明显增加。激光共聚焦扫描显微镜结果显示PARP和NF-κB均表达于正常的人RVEC的细胞核和核周区域,当受到高浓度葡萄糖影响后,PARP-1和NF-κB均集中表达于细胞核内,尤以NF-κB最显著。结论 PARP-1和NF-κB是相互作用的蛋白质,血糖增高时,PARP-1可能进入细胞核内并结合同时进入细胞核的NF-κB,激活NF-κB信号通路,引起RVEC凋亡,导致DR的发生。
- 卢建民张珍珍郑玥马翔秦秀虹
- 关键词：核因子-ΚB视网膜血管内皮细胞糖尿病视网膜病变
- 电焊弧光致急性黄斑损伤一例被引量：1
- 2015年
- 电焊弧光多引起电光性眼炎、角膜炎及白内障等，而极少能引起视网膜损伤。现将我们遇到的1例电焊导致的急性黄斑损伤报道如下。患者男，28岁。因工作后右眼突然视眼前黑影伴视物模糊1d，于2014年10月4日就诊于我科。1d前因作业时未戴防护罩突然出现行眼前固定黑影，伴轻度视力下降。
- 卢嬿张珍珍马翔孙晓晶卢建民秦秀虹
- 关键词：急性电光性眼炎视网膜损伤视物模糊眼前黑影视力下降
- 地奥司明治疗非缺血型RVO的疗效观察被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨地奥司明治疗非缺血型视网膜静脉阻塞(retinal vein occlusion,RVO)的临床疗效。方法:将符合非缺血型RVO诊断的48例48眼随机分为治疗组和对照组。治疗组27例27眼,给予地奥司明0.9g,po,bid,4wk为一疗程,连续三个疗程。对照组21例21眼,先给予丹香冠心注射液16mL加入5g/L葡萄糖注射液(或者9g/L氯化钠注射液)500mL中,iv,qd,1wk后改为丹参片3片,po,tid,连续服用11wk。观察治疗前后最佳矫正视力和眼底病变的动态改变、视网膜电流图的变化、黄斑水肿的发生率及黄斑水肿厚度变化。结果:治疗后4,8,12wk治疗组最佳矫正视力提高均显著高于对照组(P<0.05)。治疗后4wk,治疗组渗出、出血吸收率为63%,高于对照组的33%(P<0.05)。治疗后12wk,治疗组暗适应眼最大电反应的b波振幅(231±39)μV与治疗前(184±65)μV相比明显提高(P<0.05),且与对照组(207±49)μV相比有差异(P<0.05)。治疗组并发黄斑水肿17例,对照组14例,治疗组黄斑水肿的发生率与对照组相比没有明显差异(P>0.05)。治疗后12wk黄斑中心凹厚度,治疗组为298±54μm,低于对照组的369±76μm(P<0.05)。结论:对于非缺血型RVO,地奥司明能够有效的减轻黄斑水肿,降低视网膜的功能损伤,从而改善视功能,效果优于丹参治疗。
- 童念庭张珍珍宫媛媛张薇吴星伟
- 关键词：视网膜静脉阻塞地奥司明眼底荧光血管造影术视网膜电流图
- 针刺联合依达拉奉对缺血再灌注大鼠视网膜自由基代谢的影响被引量：2
- 2012年
- 目的:研究针刺联合依达拉奉对大鼠视网膜缺血再灌注时自由基代谢的影响。方法:大鼠随机分为五组:假手术组、模型组、针刺组、依达拉奉组和联合(针刺+依达拉奉)组。建立缺血再灌注模型,于造模后1 d,行视网膜电流图(ERG)检查,取视网膜组织,测定各组MDA含量及T-SOD、GSH-Px、CAT活性的变化。结果:①ERG a、b波振幅相对恢复率:联合组、针刺组及依达拉奉组与模型组相比,a、b波振幅相对恢复率升高,差异有显著性(P<0.05),与针刺组和依达拉奉组相比,联合组作用更为显著(P<0.05)。②MDA含量及T-SOD、GSH-Px、CAT活性:联合组、针刺组及依达拉奉组与模型组相比,MDA显著降低,SOD、GSH-Px、CAT显著升高,差异有显著性(P<0.05),联合组作用显著优于针刺组或依达拉奉组(P<0.05)。结论:针刺联合依达拉奉具有干预自由基代谢作用,明显减轻缺血再灌注引起的视网膜氧化应激损伤,对视网膜功能起保护作用。
- 宋毅张珍珍朱莺李洁刘嘉立
- 关键词：针刺依达拉奉缺血再灌注视网膜自由基
- 急性区域性隐匿性外层视网膜病变一例
- 2015年
- 急性区域性隐匿性外层视网膜病变（acute zonal occult outer retinopathy,AZOOR）是单眼或双眼发生的急性外层视网膜功能障碍,表现为一个或多个区域的视野缺损,女性多发。国内相对少见。现将我们遇到的1例报道如下。患者女,18岁。因右眼突然视力下降伴眼前黑影1周,于2014年7月1日就诊于我科。1周前右眼突然出现视力下降,并伴有眼前黑影飘动,自觉无明显视野变化。发病前无感冒病史,无全身疾病史及家族疾病史,无全身用药史。
- 卢嬿张珍珍马翔孙晓晶卢建民秦秀虹
- 关键词：视网膜病变隐匿性急性眼前黑影视力下降
- 强力霉素诱导携带人血管内皮生长因子A-shRNA的1/2型重组腺相关病毒的包装及鉴定被引量：3
- 2013年
- 目的通过Helper-Free腺相关病毒包装系统包装由强力霉素(doxycycline,DOX)诱导的携带hVEGFA-shRNA-GFP的1/2型重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus,rAAV),测定病毒滴度并检测其对人视网膜血管内皮细胞(human ret-inal vascular endothelial cell,HRVEC)血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor,VEGFA)的敲除作用。方法将AAV-293细胞复苏、培养后传代。用磷酸钙转染法将质粒pAAV-hVEGFA-shRNA-GFP、1/2型腺相关病毒质粒(pAAV1/2)和pHelper质粒共转染AAV-293细胞,包装生成带有hVEGFA-shRNA-GFP的1/2型rAAV,将此rAAV感染AAV-293细胞,荧光显微镜观察病毒转染和感染效率。斑点杂交法测定病毒滴度。将HRVEC分为3组培养,正常对照组、HRVEC+rAAV组及HRVEC+rAAV+DOX诱导组,Western-blotting法检测VEGFA的敲除作用。结果 3种质粒共转染AAV-293细胞,发现病毒包装过程中细胞培养基颜色由红色变为橘黄色,细胞变圆并脱离培养皿底部,漂浮于培养基中。荧光显微镜下观察可见,24h后AAV-293细胞表达绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP),72h表达GFP细胞数比例可达95%～100%;共转染成功,包装得到DOX诱导的携带有hVEGFA-shRNA-GFP的1/2型rAAV,斑点杂交法检测病毒滴度为1015v.g.·L-1。HRVEC于重组病毒感染后第3天高表达GFP。免疫印迹法检测正常对照组、HRVEC+rAAV组及HRVEC+rAAV+DOX诱导组HRVEC中VEGFA表达量的变化发现:HRVEC+rAAV组其VEGFA表达量较正常对照组明显下降,HRVEC+rAAV+DOX诱导组其VEG-FA表达量较HRVEC+rAAV组明显降低。提示rAAV对细胞内VEGFA具有显著的敲除作用,并且DOX有加强VEGFA敲除的作用,病毒包装成功。结论 DOX诱导的携带有hVEGFA-shRNA-GFP的1/2型rAAV的包装获得成功,收获病毒具有较高滴度,能成功地感染HRVEC,并对HRVEC的VEGFA具有明显敲除作用,同时DOX有加强VEGFA敲除的作用,为眼底新生血管疾病基因治疗的研究提供了实验基础。
- 秦秀虹范松涛卢建民张珍珍
- 关键词：重组腺相关病毒SHRNA强力霉素血管内皮生长因子
- Notch1和多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1在糖尿病小鼠视网膜中的表达被引量：3
- 2014年
- 背景 多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1（PARP-1）在糖尿病视网膜病变（DR）发生过程中具有重要作用,而Notch1是生物体重要的信号转导通路,可能参与对视网膜新生血管性疾病的拮抗过程,Notch1是否参与了DR的发生还未得到证实. 目的 探讨Notch1、Dll4、PARP-1、Akt、核因子-κB（NF-κB）及caspase-3在糖尿病小鼠视网膜组织及高糖视网膜血管内皮细胞（RVECs）中的表达. 方法 建立糖尿病小鼠模型,应用免疫组织化学法和Western blot法检测Notch1、Dll4、PARP-1、Akt、NF-κB及caspase-3在糖尿病小鼠视网膜组织及RVECs的表达.结果 Notch1、Dll4、p-Akt在糖尿病小鼠视网膜组织中的表达量比正常对照组明显降低,而PARP-1、caspase-3在糖尿病小鼠视网膜组织中的表达量比正常对照组明显增加,差异均有统计学意义（均P＜0.05）,但NF-κB的表达量无明显变化,差异无统计学意义（t=0.748,P=0.530）.RVECs中Notch1、p-Akt的表达量随葡萄糖浓度的增高而增加,而剪切型PARP-1、caspase-3的表达量则随葡萄糖浓度的增高而降低,在葡萄糖浓度为30 mmol/L时上述变化最显著,与正常对照组比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）,而NF-κB的表达量无明显变化. 结论 在糖尿病小鼠视网膜中,剪切型PARP和caspase-3蛋白的表达上调,但Notch1、p-Akt蛋白的表达量下调.剪切型PARP和caspase-3表达量随葡萄糖浓度的增高而增加,Notch1、p-Akt则相反.
- 秦秀虹张珍珍许海涛张丽红吴雅臻
- 关键词：NOTCH1糖尿病视网膜病变视网膜血管内皮细胞
- 去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的保护作用及其相关机制研究
- 目的: 观察大鼠视网膜缺血再灌注的病理形态、电生理、生化及凋亡相关指标的改变;探讨去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的保护作用及其相关机制。 方法: 1.建立大鼠视网膜缺血再灌注模型,研究去乙酰化酶...
- 张珍珍
- 关键词：丙戊酸钠视网膜缺血再灌注损伤氧化应激凋亡机制信号转导
- 文献传递
- 补充叶黄素对长期光暴露职业者视功能的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察补充叶黄素对长时间暴露于强光下的职业人群视功能的影响。方法选取40例从事电焊工作的正常人纳入研究，随机分为叶黄素干预组和安慰剂对照剂组。干预组每日口服叶黄素20mg，持续12周。对照组服用安慰剂。检测视力、血清叶黄素含量、黄斑色素密度值、对比敏感度及眩光敏感度，分析补充叶黄素对长期曝光职业人群黄斑色素密度与视功能相关指标的影响。结果干预组矫正视力有升高趋势，差异无统计学意义（tv1=1．729，tv2=1．645，tv3=1．559，P〉0．05）。干预组与对照组相比，血清叶黄素含量（t=2．649，P〈0．01）及中央黄斑色素密度（F=3．48，P=0．041）有明显升高，对比敏感度及眩光敏感度明显升高（tcs=2．684，tcs=2．815，P〈0．05）。结论补充叶黄素对长时间光暴露职业人群黄斑色素密度及视功能有保护作用，尤其体现在对暗光照环境下对比敏感度及眩光敏感度的保护，可考虑作为职业保护的补充手段。
- 姚远蔡正元张珍珍尹莉莉邱庆华吴星伟
- 关键词：叶黄素视功能黄斑色素密度
