刘艳环
- 作品数：69 被引量：113H指数：5
- 供职机构：中国农业科学院特产研究所更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金国家科技支撑计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 牛病毒性腹泻病活疫苗BVDV2/JZ05-1株毒力返强试验被引量：7
- 2012年
- 研究了BVDV2/JZ05-1株免疫犊牛后是否会出现毒力返强现象。以病毒含量为10-7.26TCID50/mL的BVDV2/JZ05-1活疫苗滴鼻免疫犊牛(4mL/头),通过疫苗回滴,连续临床观察,采集抗凝血和鼻拭子,对淋巴细胞数量变化进行分析,并从淋巴细胞和鼻拭子中分离病毒。结果表明,BVDV活疫苗BVDV2/JZ05-1株免疫犊牛没有出现BVDV感染的临床症状,淋巴细胞数量正常,鼻拭子和淋巴细胞病毒分离阴性。可见,该毒株对犊牛免疫没有出现毒力返强的现象。
- 李海涛苗利光刘艳环王松王文昊安亚雄冯卓
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒
- 重组hIL-2表达载体的构建及在毕赤酵母中的表达
- 2012年
- 本试验根据hIL-2氨基酸序列、三维结构及其与受体IL-2R结合机制,设计并合成IL-2Rα亚基结合位点修饰性hIL-2基因片段。合成的修饰性hIL-2基因序列被插入真核表达载体pPIC9K,并转化入毕赤酵母基因组中。经筛选得到阳性重组子后,通过诱导培养得到了表达产物。对表达产物进行Elisa初步测定,结果成功表达出重组hIL-2,表达水平达0.93g/L。本项研究为进一步开展IL-2Rα结合位点修饰性hIL-2的生物活性研究奠定了基础。
- 王松苗利光李海涛刘艳环王文昊安亚雄冯卓
- 关键词：人白细胞介素2修饰
- IL-2Rα结合位点修饰型OviIL-2在毕赤酵母中的表达与鉴定
- 2012年
- IL-2主要由激活后的T细胞产生,是一种天然的免疫增强剂,临床应用广泛。之前构建了适用于毕赤酵母表达系统的重组绵羊IL-2的真核表达载体pPIC9K-roIL2。本研究在此基础上使用pPIC9K-roIL2转化毕赤酵母GS115,筛选得到阳性克隆,命名为GS115-roIL2并经过摇瓶培养和诱导表达得到表达产物。通过SDS-PAGE进行初步鉴定,证明成功表达出了roIL-2。本研究为下一步roviIL-2免疫机理研究奠定了基础。
- 王文昊苗利光李海涛刘艳环王松安亚雄冯卓
- 关键词：毕赤酵母
- 腐蹄病C型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因的克隆与表达载体的构建被引量：1
- 2002年
- 用 PCR技术从腐蹄病 C型节瘤拟杆菌克隆出具有免疫保护性抗原 0 .85kb纤毛蛋白基因 ( pili基因 ) ,利用该基因构建了纤毛蛋白基因表达载体。提取 C型节瘤拟杆菌染色体DNA;用所设计的专一性引物进行 PCR,扩增出 pili基因 ;将 pili基因克隆于 TE载体 ,TE-pili重组质粒 pili基因序列测定结果正确 ,用 Eco R 酶切 ,低熔点胶回收 pili基因片段 ,经 klenow补平后 ,用 T4DNA连接酶将其与中间载体p PLλ连接 ,将 pili基因克隆于 p PLλ载体 ,经Bam H 、Bam H +Hind 、Dral酶切鉴定 pili基因正向插入 p PLλ载体 ;扩增 p PLλ-pili重组质粒 ,用 Bam H 酶切出 2 .1 kb大小片段 ,回收后 ,与 PME2 90表达质粒连接 ,转化宿主细胞PAK/ 2 pfs中 ,对获得的重组质粒用 Bam H 酶切 ,出现 2 .1 kb大小的带 。
- 苗利光王克坚刘艳环陈立志刘晓颖徐敏张洪涛
- 关键词：腐蹄病基因克隆
- 布氏杆菌L7/L12和OMP31基因克隆及其融合蛋白免疫原性研究
- 本研究根据已经发表的布氏杆菌基因序列，选择种间序列极为保守的保护性抗原L7/L12、OMP31基因，依此进行PCR扩增，利用引物上设计好的限制性内切酶酶切位点进行基因重组，克隆到已经构建好的表达载体上，经过PCR检测，限...
- 李海涛苗利光张广雷刘艳环孙金霞
- 关键词：布氏杆菌基因重组表达载体构建融合蛋白
- MSL抗菌肽对绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌细胞膜的损伤作用研究被引量：2
- 2015年
- 通过MSL抗菌肽(MSL)对细菌细胞膜的损伤作用研究,确定该抗菌肽的作用靶点。在1×108个/m L的绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌悬液中,分别加入MSL至终浓度为1×MIC,37℃保温孵育,分别于0min、10min、20min、30min、40min、50min、60min、120min、180min、240min离心收集上清液,检测各时间点蛋白浓度,分析蛋白浓度变化规律;分别在对数生长期的金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌悬液中加入MSL至终浓度为1×MIC,37℃保温孵育60min后,利用透射电镜观察分析细菌结构的变化。结果,MSL与2种细菌接触后均可引发胞液外流;透射电镜观察发现,MSL可造成绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌细胞膜破损,胞浆内电子密度降低,染色质聚集,严重者细胞崩解结构不清,说明MSL对G+和G-细菌细胞膜均可造成损伤,证明细菌细胞膜是MSL作用的靶点之一。
- 刘艳环李海涛朱言柱张润祥肖佳美苗利光
- 关键词：抗菌肽绿脓杆菌金黄色葡萄球菌
- 鹿源牛分支杆菌ESAT-6/Ag85B/Mtb8.4基因与牛IL-2基因融合免疫原性研究
- 本研究拟制备牛IL-2与鹿源牛分支杆菌ESAT-6、Ag85B和Mtb8.4基因的融合蛋白。从患结核病鹿的肺组织中粗分离牛分支杆菌并提取基因组DNA,PCR扩增牛分支杆菌ESAT-6、Ag85B和Mtb8.4基因;提取牛...
- 李海涛苗利光刘艳环李庆超孙金霞
- 关键词：牛分支杆菌
- 文献传递
- CpG基序对坏死梭杆菌免疫原的免疫佐剂效应实验研究被引量：1
- 2006年
- 分别用坏死梭杆菌来源CpG、弗氏完全佐剂、氢氧化铝佐剂与坏死梭杆菌免疫原配制的抗原免疫小白鼠,通过检测坏死梭杆菌免疫原抗体变化,来探讨CpG对坏死梭杆菌免疫原的佐剂效应。试验结果表明,坏死梭杆菌来源CpG有较好的免疫佐剂效应,可望进一步研制成为坏死梭杆菌疫苗佐剂成分。
- 刘艳环杨福合苗利光刘晓颖张秀华王志刚
- 关键词：坏死梭杆菌佐剂
- 牛病毒性腹泻病毒反转录及3'-末端克隆测序方法研究被引量：2
- 2010年
- 牛病毒性腹泻病毒为黄病毒科瘟病毒属代表种,其基因组为单股正链RNA,无Poly(A)尾。传统的3'-末端快速扩增方法不适用于牛病毒性腹泻病毒的3'-末端克隆测序。本研究根据牛病毒性腹泻病毒基因组3'-末端共有特征碱基,设计回文锚定引物CGend。以BVDVJZ05-1毒株为研究对象,进行了反转录及3'-末端克隆测序。结果表明,CGend的反转录效果优于随机引物和一般特异性下游引物,并且扩增得到了JZ05-1的3'-末端完整序列。本研究为瘟病毒属病毒反转录和3'-末端克隆测序提供了新思路。
- 李庆超苗利光李海涛刘艳环张广雷庄风岐
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒瘟病毒反转录
- 重组抗菌肽LfcinB/LfampinB基因的克隆及表达载体的构建
- 2010年
- 根据GeneBank中提供的牛乳铁蛋白基因序列,设计并合成了重组LfcinB/LfampinB基因,并通过PGEM-Teasy载体扩增。酶切回收的LfcinB/LfampinB片段与中间载体pP6连接。pP6上的启动子、信号肽和调控序列与LfcinB/LfampinB共同切下,获得具有上游调控元件的PLfc/Lfa基因片段。将PLfc/Lfa与pME290表达载体连接,并转化绿脓杆菌。结果表明,本试验成功构建了重组pPLfc/Lfa表达载体。
- 孙金霞刘艳环李海涛李庆超张广雷苗利光
- 关键词：抗菌肽克隆
