刘竹
- 作品数：9 被引量：13H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金重庆市教育委员会科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学艺术更多>>
- 人HAS3基因核心启动子区域的初步鉴定与分析
- 2012年
- 目的对人HAS3基因的核心启动子区域进行初步鉴定和分析,为深入研究HAS3基因的转录调控奠定基础。方法以前期构建的人HAS3基因启动子荧光素酶报告基因重组体P(-761/-305)为模板,采用PCR介导的基因定点突变技术构建4个不同的系列删除体,并对HAS3启动子区域中的Sp1结合位点和核心启动子元件进行定点突变,构建相应的定点突变重组体;采用荧光素酶双报告基因分析技术检测各重组体的启动子活性。结果构建了P(-761/-569)、P(-563/-305)、P(-490/-305)和P(-433/-305)4个系列删除体和5个定点突变体;启动子活性分析结果表明,P(-761/-569)无启动子活性,P(-563/-305)、P(-490/-305)和P(-433/-305)均具有较强的启动子活性,Sp1结合位点和核心启动子元件的定点突变可导致HAS3启动子活性的降低。结论 HAS3基因的核心启动子区域主要位于其转录起始位点上游附近-433～-305 bp内,Sp1可能在HAS3的转录调控中起重要作用。
- 吉颖刘竹艾青朱江谢濛宇翁华莉刘革力宋方洲卜友泉
- 关键词：启动子转录调控
- 人ACER2基因启动子的结构与功能的研究
- 碱性神经酰胺酶2(alkaline ceramidase2,ACER2)是一个参与脂质类信号分子神经酰胺代谢的酶分子,在细胞增殖、衰老和凋亡等过程中起重要作用。为了更深入研究ACER2基因转录的调控机制,本研究克隆鉴定了...
- 刘竹
- 关键词：基因启动子转录因子结合位点转录起始位点起始密码子启动子活性荧光素酶
- 文献传递
- 人Ska2/FAM33A核心启动子区域的初步鉴定与分析被引量：2
- 2013年
- Ska2(spindle and KT associated 2),也称FAM33A(family with sequence similarity 33,member A),是新近发现的一个与细胞周期调控和肿瘤发生发展均密切相关的新基因,但其表达调控机制仍不清楚。该研究是在此前对Ska2基因启动子鉴定分析的基础上,进一步对Ska2基因的核心启动子区域进行初步鉴定和分析。采用PCR技术,构建5个Ska2基因启动子的系列删除体,并对Ska2核心启动子区中的2个潜在NF-Y结合位点进行单独或联合定点突变,构建3个定点突变重组体,采用荧光素酶双报告基因分析技术检测各重组体的启动子活性。启动子活性分析结果表明,所构建删除体均具有较强启动子活性;2个潜在NF-Y结合位点单独或联合定点突变均可导致Ska2启动子活性的降低;共转染NF-Y表达质粒后,Ska2的启动子活性明显提高。该研究结果不仅将Ska2的核心启动子区域定位于一个80 bp的范围内,并且也提示NF-Y是一个调节Ska2转录的重要转录因子。
- 艾青翁华莉张莹刘竹王义涛李轶朱慧芳张春冬卜友泉
- 关键词：启动子转录调控NF-Y
- 人ACER2基因启动子的鉴定与初步分析被引量：2
- 2011年
- 碱性神经酰胺酶2(alkaline ceramidase 2,ACER2)是一个参与脂质类信号分子神经酰胺代谢的酶分子,在细胞增殖、衰老和凋亡等过程中起重要作用。为了进一步研究ACER2基因的转录调控机制,该研究克隆鉴定了ACER2基因的启动子。首先,应用5'RACE(rapid amplification of cDNA ends,cDNA末端快速扩增)技术鉴定了ACER2基因的转录起始位点。然后,通过PCR定向克隆和定点突变策略,构建了三个长度不同的覆盖ACER2基因5'端侧翼区起始密码子ATG上游约1.3Kb区域的一系列ACER2基因启动子荧光素酶报告基因重组体。启动子活性分析表明ACER2基因启动子定位于转录起始位点附近约670 bp的区域内。转录因子结合位点分析结果表明,ZCER2基因启动子含有Sp1、GATA-1和AP-1等潜在的转录因子结合位点,提示Sp1和GATA-1等转录因子可能参与ACER2基因的转录调控。
- 刘竹艾青兰欢吉颖杨正梅何江宜郝晓璐宋方洲卜友泉
- 关键词：神经酰胺启动子转录调控
- 人PRR11启动子的结构与功能初步分析被引量：9
- 2011年
- PRR11(proline-rich protein 11,PRR11)是我们最近发现的一个新的肿瘤相关基因.初步研究表明,PRR11参与细胞增殖、细胞周期和细胞癌变等多种生物学过程.为了进一步研究PRR11基因的转录调控机制并全面解析其功能,本研究对PRR11基因的启动子进行了克隆鉴定和初步分析.首先,应用5'RACE(rapid amplification of cDNA ends,cDNA末端快速扩增)技术鉴定了PRR11基因的转录起始位点,发现了其具有多个转录起始位点.通过PCR定向克隆和DNA blunting技术,构建了6个相互重叠并覆盖PRR11基因转录起始位点附近约2.0 kb区域的PRR 11基因启动子荧光素酶报告基因重组体.启动子活性分析表明,PRR 11基因启动子主要定位于转录起始位点附近-563 bp～+341 bp的区域内.采用转录因子结合位点预测分析软件分析表明,PRR 11基因启动子缺乏典型的TATA盒,但含有典型的GC盒、CCAAT盒以及潜在的经典转录因子E2F1和MYB的结合位点,提示Sp1、NF-Y、E2F1和MYB等经典转录因子可能参与PRR 11基因的转录调控.
- 艾青卜友泉刘竹兰欢吉颖杜刚杨正梅刘革力宋方洲
- 关键词：PROTEIN启动子转录调控肿瘤相关基因
- PRR11和FAM33A基因双向启动子及其应用
- 本发明涉及PRR11和FAM33A基因双向启动子及其应用。PRR11和FAM33A基因双向启动子在正向或反向两个方向均能驱动基因的转录和表达，在基因工程和基因治疗等领域具有重要应用前景。
- 卜友泉艾青刘竹杨正梅宋方洲
- 文献传递
- PRR11与SKA2"基因对"共享一个受NF-Y调控的双向启动子并参与肺癌发生发展
- "头对头"基因对是真核生物中一种独特的基因排列方式,约占人类基因总数的10％.对此类基因对的鉴定与功能研究尚刚刚开始.我们前期发现PRR11是一个参与细胞周期和肺癌发生的肿瘤相关新基因.在本研究中,我们证实PRR11与其...
- 王义涛张莹张春冬翁华丽李轶蔡伟谢濛宇龙银江艾青刘竹杜刚王森牛毓龙宋方洲尾崎俊文卜友泉
- 关键词：双向启动子NF-Y细胞周期肺癌
- 鸭MCHR2的基因克隆及蛋白表达鉴定
- 2010年
- 目的筛查能够稳定表达黑色素浓集激素受体2(MCHR2)基因的动物,为构建动物模型提供实验依据。方法利用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法,从新鲜的鸭、Wista鼠、SD鼠、C3H10鼠、C57鼠、狗、羊、猪等大脑组织中提取总RNA,以此扩增MCHR2基因的全长cDNA编码区序列;利用Western blot检测鸭、犬和猪的大脑海马区及皮质区MCHR2蛋白的表达情况。结果通过RT-PCR获得鸭、犬、猪脑组织中的目的片段;通过Western blot验证了MCHR2蛋白在鸭脑组织中具有高表达。结论将鸭作为构建动物模型的对象,用于MCHR2基因的相关功能研究具有可行性。
- 朱勇汪长东刘革力袁成福卜友泉易发平焦庆昉艾青刘竹兰欢武向梅宋方洲胡平生Tomas Hokfelt
- 关键词：MCRRT-PCRWESTERNBLOT肥胖
- 人β3肾上腺素受体激动剂快速筛选模型的建立被引量：1
- 2011年
- 目的:β3肾上腺素受体(beta-3 adrenergic receptor,ADRB3)是β肾上腺素受体的一个亚型,是一个公认的减肥药和抗2型糖尿病药物研发的重要分子靶点,构建其激动剂筛选模型具有重要意义。方法:以ADRB3发挥作用的细胞内信号通路为理论依据,在细胞水平上构建了以荧光素酶为报告基因的人ADRB3激动剂药物筛选模型,并对部分实验条件进行了快速简易优化。结果:已知的ADRB3激动剂异丙肾上腺素和倍他福林均能够有效激活该筛选模型中pCRE-luc报告基因质粒的表达,使其表达增加3倍以上。结论:该筛选模型构建成功。目前该模型已用于以ADRB3为靶点减肥新药筛选。
- 刘竹杜刚曾凡新兰欢艾青刘革力宋方洲卜友泉
- 关键词：Β3肾上腺素受体减肥药药物筛选荧光素酶
