刘珊
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 人可溶性TRAIL基因的克隆及其在毕赤酵母中的重组表达被引量：1
- 2010年
- TRAIL是肿瘤坏死因子TNF家族成员,对肿瘤细胞具有高效和选择性杀伤活性,可能发展为新型抗肿瘤药物。基因重组表达是生产蛋白药物的重要手段。本文首先通过PCR扩增获得人可溶性TRAIL（114-281氨基酸组成的片段）基因,然后将其插入毕赤酵母表达载体pPIC9K中进行表达。结果发现,经G418筛选获得的高拷贝转化子,在含有3%甲醇的BMMY培养基中,人可溶性TRAIL获得高效分泌表达。表达产物经Ni-Agarose亲和层析,纯度大约为80%,产量可达1-2 mg/L。细胞毒性实验表明,0.05μg/ml可溶性TRAIL对白血病细胞Jurkat有很强的杀伤活性,细胞存活率只有10%。0.1μg/ml TRAIL可对人肺癌细胞A549显示剂量依赖的杀伤作用;当TRAIL浓度达到1μg/ml时,细胞存活率大约为30%。而在测试的浓度范围内,可溶性TRAIL对人皮肤成纤维细胞HSF均无明显细胞毒作用,表明毕赤酵母表达的人可溶性TRAIL对肿瘤细胞的杀伤有选择性。该表达体系的建立,为进一步利用毕赤酵母大量生产人可溶性TRAIL和基于人TRAIL的新型融合蛋白奠定了基础。
- 李莹莹万琳杨浩刘珊蔡华伟卢晓风
- 关键词：TRAIL细胞凋亡肿瘤治疗毕赤酵母
- 阳离子抗菌肽融合细胞穿透肽增强其肿瘤细胞杀伤活性的实验研究
- 2011年
- 具有肿瘤细胞杀伤活性的膜作用型抗菌肽因不易诱导抗性而在肿瘤治疗中极具潜力。阳离子抗菌肽的细胞结合能力是影响其细胞杀伤活性的重要因素。通过偶联有较强细胞结合能力的细胞穿透肽可能增强阳离子抗菌肽的细胞杀伤活性。本文选择了细胞毒性较弱的抗菌肽MP,与细胞穿透肽Antp偶联,并观察融合肽细胞杀伤活性的变化。结果发现,未偶联的抗菌肽MP和细胞穿透肽Antp对肿瘤细胞无明显杀伤,但两者偶联形成的融合肽MPGA通过破坏细胞膜而显示强烈的肿瘤细胞杀伤作用。这表明将抗菌肽与细胞穿透肽偶联能够显著提高其细胞毒性,可能成为研发新型抗肿瘤药物的途径之一。
- 刘珊杨浩蔡华伟万琳卢晓风
- 关键词：肿瘤生物治疗抗菌肽细胞穿透肽
