刘宝业
- 作品数：5 被引量：41H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院作物科学研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学化学工程更多>>
- 小麦纹枯病（Rhizotonia cerealis van der Hoeven apud.Boerema & Verhoeven）有效防卫基因的鉴定及转基因植株的研究
- 小麦纹枯病(Rhizotonia cerealis van der Hoeven apud．Boerema & Verhoeven)，主要是由禾谷丝核菌(Rhizoctonia cerealis vander hoeve...
- 刘宝业
- 关键词：小麦纹枯病转基因植株土传真菌病害抗病育种
- 文献传递
- 抗菌肽Rs-AFP_2的原核表达及抑菌活性被引量：11
- 2010年
- 为了明确人工合成的萝卜抗菌肽Rs-AFP2基因编码产物是否对一些重要农作物病原真菌有抑制作用,本文将该基因编码序列亚克隆到原核表达载体pGEX-4T-1上,构建成GST-Rs-AFP2融合蛋白表达载体。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,获得了以包涵体形式表达的GST-Rs-AFP2重组蛋白。经过裂解、洗涤、溶解、复性、离心等处理,获得了纯化的GST-Rs-AFP2融合蛋白。对重要作物病原真菌进行体外抑菌分析的结果表明,Rs-AFP2可以显著抑制水稻纹枯病菌、小麦纹枯病菌、小麦根腐病菌、棉花黄萎病菌、小麦赤霉病菌的菌丝生长,说明Rs-AFP2可作为上述植物病害抗性基因育种的潜在基因。
- 路妍刘宝业井金学张增艳
- 关键词：复性植物病原真菌
- 水稻几丁质酶的原核表达、复性及体外抑菌活性的研究被引量：9
- 2009年
- 利用RT-PCR反应,从纹枯菌诱导的水稻叶片cDNA中克隆了1个水稻几丁质酶基因RC7的全长编码序列(ORF)。通过亚克隆方法,RC7与原核表达载体pGEX-4T-1上的GST融合,构建成GST-RC7重组蛋白的原核表达载体pGST-RC7,然后,将其转化到大肠杆菌细胞中。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,获得了以包涵体形式高效表达的GST-RC7。经过洗涤、溶解(变性)、复性及纯化等处理,包涵体中GST-RC7蛋白得到溶解、复性和纯化。纯化的复性GST-RC7蛋白具有几丁质酶活性。对6种重要作物病原真菌进行体外抑菌活性分析的结果表明,RC7可显著抑制水稻纹枯病菌、小麦纹枯菌、小麦赤霉菌、棉花黄萎菌、烟草赤星菌的菌丝生长,说明RC7可作为上述植物病害抗性基因育种的重要基因。
- 刘宝业梁国鲁张增艳
- 关键词：蛋白质纯化复性
- 作物抗病基因工程研究进展被引量：5
- 2008年
- 控制植物病害的关键,取决于对植物与病原菌相互作用的分子机理的了解。将抗病基因、信号传导/调控基因、抗菌蛋白基因等导入拟改良的作物、选育抗病新品系,是当前作物抗病基因工程研究的主要策略。本文介绍利用植物抗病反应中系列重要基因进行作物抗病基因工程的研究进展,讨论了目前作物抗病基因工程中存在的问题及其解决的方法。
- 刘宝业张增艳梁国鲁
- 关键词：抗病基因转录因子病程相关蛋白
- 转Rs-AFP2基因小麦的分子分析及其纹枯病抗性被引量：18
- 2009年
- Rs-AFP2属于r-硫堇类抗菌肽,主要通过形成离子通道直接破坏细胞来杀灭病原菌。本研究通过基因枪介导法结合对目标基因的分子检测,证明已将外源Rs-AFP2基因转入小麦推广品种扬麦12中。通过逐株抗纹枯病接种鉴定、PCR、PCR-Southern blot、Southern blot和RT-PCR/荧光定量RT-PCR(Q-RT-PCR)分析,对转Rs-AFP2基因小麦T1至T4代植株跟踪检测。结果表明,Rs-AFP2在转基因小麦中能够稳定遗传,以单拷贝整合到小麦基因组中,遗传方式符合孟德尔遗传规律,并能在转录水平上表达。对转Rs-AFP2基因小麦的抗病性、主要农艺性状以及Rs-AFP2表达活性分析结果表明,与受体扬麦12相比,Rs-AFP2表达活性高的转基因小麦植株对纹枯病抗性有明显提高,其抗病性可以遗传,而主要农艺性状没有明显差异,证明可以利用Rs-AFP2基因和基因工程途径创制抗纹枯病小麦新种质。
- 路妍张增艳任丽娟刘宝业廖勇徐惠君杜丽璞马鸿翔任正隆井金学辛志勇
- 关键词：抗菌肽转基因小麦基因表达纹枯病抗性
