倪晓蓉
- 作品数：8 被引量：20H指数：2
- 供职机构：南通市第三人民医院更多>>
- 发文基金：南通市科技局社会发展科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人源抗菌肽LL-37表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达被引量：4
- 2007年
- 目的:构建人源抗菌肽LL-37的表达载体pPIC9-LL-37,将其转化毕赤酵母GS115,诱导LL-37表达。方法:根据抗菌肽LL-37氨基酸序列及毕赤酵母偏爱密码子,应用互补延伸PCR技术扩增抗菌肽LL-37基因,定向克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9上,转化E.coli DH5a.构建重组分泌型酵母表达载体pPIC9-LL-37.PCR鉴定并测序;原生质球法转化毕赤酵母GS115.PCR扩增鉴定:甲醇诱导LL-37表达,筛选最高表达株.检测表达产物对大肠杆菌的抑菌活性,并对其进行聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western印迹分析。结果:pPIC9-LL-37载体构建成功:转化毕赤酵母后PCR鉴定出LL-37基因:0.5%甲醇能诱导LL-37高表达,筛选出最高表达株,发酵上清约含LL-37 0.5μg/ml,对E.coli具有较强的抑菌活性,电泳及Western印迹分析证实表达产物为LL-37。结论:成功构建pPIC9-LL-37载体.转化毕赤酵母后.经甲醇诱导能高表达分泌LL-37,表达的LL-37蛋白具有较强的抑菌活性。
- 陆建荣王惠民吴萍黄松平常秋月凌勇武倪晓蓉
- 关键词：LL-37毕赤酵母基因表达
- 聚合酶链反应产物微孔板杂交与凝胶电泳的比较
- 2000年
- 本文对 81例乙肝患者的PCR产物分别采用微孔板杂交和凝胶电泳进行检测 ,同时对微孔板杂交在HBVDNA定量方面的价值进行论证。结果 :微孔板杂交和凝胶电泳的阳性率分别为 70 .4% (5 7/ 81)、5 1.8% (42 / 81) ;PCR产物与微孔板杂交后光密度 (OD)呈正相关 ,血清HBVDNA量与OD值不呈线性关系。提示 :聚合酶链反应产物微孔板杂交技术可替代凝胶电泳 。
- 倪晓蓉吴月平
- 关键词：乙型肝炎微孔板杂交聚合酶链反应
- 5′-非转录区序列改建提高毕赤酵母表达抗菌肽LL-37被引量：2
- 2007年
- 目的:探讨5′-非转录区(5′-UTR)序列改建对毕赤酵母表达外源蛋白LL-37的影响。方法:去除毕赤酵母分泌表达质粒pPIC9 5′-UTR内GGATCCAA序列,转化E.coli DH5α,构建改良的毕赤酵母分泌表达载体pPIC9-EDIT;PCR鉴定及测序确认后与酵母偏爱密码子编码的LL-37基因片段连接,构建改良的重组表达载体pPIC9-EDIT-LL-37;原生质球法转化毕赤酵母GS115,PCR扩增鉴定后诱导LL-37表达,筛选最佳表达条件,对表达产物进行凝胶电泳和Western印迹分析;比较转入pPIC9-EDIT-LL-37及pPIC9-LL-37后毕赤酵母表达产物的抑菌活性,间接测定改建前后LL-37蛋白表达量的变化。结果:PCR鉴定及测序证实pPIC9-EDIT改建成功,成功构建重组载体pPIC9-EDIT-LL-37;转化毕赤酵母后表达产物PCR鉴定出LL-37基因,最佳诱导甲醇浓度为0.5%,最佳诱导表达时间为72h,电泳及Western印迹分析证实表达产物为LL-37;改建后LL-37蛋白表达量提高了约35倍。结论:pPIC9 5′-UTR序列的改建能明显提高毕赤酵母表达LL-37蛋白,值得进一步研究以应用于其他外源蛋白表达。
- 陆建荣王惠民吴萍黄松平常秋月凌勇武倪晓蓉
- 关键词：毕赤酵母
- 肝硬化腹水并发自发性细菌性腹膜炎的危险因素分析被引量：13
- 2014年
- 目的探讨肝硬化腹水并发自发性细菌性腹膜炎(SBP)的危险因素。方法选择40例肝硬化腹水并发SBP和28例未并发SBP的肝硬化腹水患者作为研究对象,采取回顾性研究的方法对相关临床资料进行分析。结果肝硬化腹水并发SBP者在并发休克、肝肾综合征、原发性肝癌、上消化道出血以及年龄区间、多次住院、既往是否发生腹水等方面与不合并SBP患者差异具有统计学意义(P均<0.05);两组患者的外周血TBil、ALB、PT、CR、UA以及血钠表达水平差异具有统计学意义(P均<0.05)。患者年龄、TBil、ALB、PT、血钠和CR作为可作为单因素预测肝硬化腹水并发SBP发生(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析结果发现,TBil、ALB以及是否合并原发性肝癌两组间差异具有统计学意义(P均<0.05)。结论高胆红素血症、低蛋白血症以及合并原发性肝癌为肝硬化腹水患者并发SBP的危险因素,对这类患者应及时预防性使用抗菌药物。
- 费琰倪晓蓉邹美银
- 关键词：肝硬化自发性腹膜炎
- 病毒性肝炎患者血清Ⅳ型胶原测定的临床意义
- 1997年
- 肝纤维化是肝硬化的早期阶段。目前,临床上对肝纤维化或肝硬化的确诊仍以肝穿活检为主,如何寻找一种非损伤性诊断途径是近年来肝病研究的热点。近年对一种新的基底膜胶原成分一血清Ⅳ型胶原(CⅣ)引起人们的关注。CⅣ测定可灵敏地反映肝硬化程度。本文旨在对CⅣ在肝纤维化中的诊断价值作一探讨,并与国内外公认的肝纤维化标志物Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)进行比较。 1.材料和方法 病例:肝病组,肝硬化(LC)26例,代偿性7例,失代偿性19例,平均年龄42.8±21.4岁;慢性活动性肝炎(CAH)33例,平均年龄32.7±13.9岁;慢性迁延性肝炎(CPH)27例,平均年龄35.8±20.9岁;急性黄疸型肝炎(AH)49例,平均年龄30.8±17.4岁,其中部分病例经病理学证实,诊断符合1990年上海肝炎会议修改的诊断标准,正常对照组(NC)无肝炎史,体检合格者30例。
- 倪晓蓉
- 关键词：病毒性肝炎
- 输液泵在改良人源多肽抗生素LL-37表达量的应用和探析
- 2007年
- 目的改良毕赤酵母发酵条件,提高人源多肽抗生素LL-37表达量。方法用无油气体压缩机供氧,电脑输液泵控速给养料的方法,对毕赤酵母发酵进行改良。结果改良方法提高了毕赤酵母表达量约1.65倍。结论无油气体压缩机对发酵中氧气的供给、电脑输液泵控速给养料的改良方法,提高了LL-37的表达量。
- 吴萍陆建荣王惠民黄松平常秋月凌勇武倪晓蓉
- 关键词：气体压缩机电脑输液泵毕赤酵母
- 胸腺激素治疗慢性乙肝患者血清抗IFN的检测
- 2000年
- 目的：研究胸腺肽治疗慢性乙肝前后血清干扰素抗体（抗IFN）的变化与疗效的关系。方法：采用ELISA法检测血清抗IFN（总抗体）。结果：胸腺肽治疗组抗IFN阳性率40%（6/15），显著高于正常对照组和常规护肝治疗组9.1%(5/55)。抗IFN阳性者疗效好于抗IFN阴性者。结论：抗IFN的出现侧面部分反映体内IFN水平，同时可用为血液中IFN的有益载体。
- 倪晓蓉
- 关键词：胸腺激素干扰素抗体慢性乙肝
- 肝病患者血清IV型胶原的变化被引量：1
- 1997年
- 倪晓蓉
- 关键词：肝病血清IV型胶原肝炎肝硬变
