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侯金萍
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大连医科大学附属第一医院
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
于筠
大连医科大学附属第一医院
陆晓云
大连医科大学附属第一医院
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中国医科大学附属盛京医院
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RNA干扰对宫颈癌细胞中E6AP基因的影响及其意义
2008年
目的探讨RNA干扰(RNAi)对宫颈癌细胞系HeLa细胞E6AP基因表达及细胞增殖和凋亡的影响。方法实验分为3组:空白对照组(未经转染的HeLa细胞)、转染阴性对照的小干扰RNA(siRNA)组及转染特异性E6AP siRNA组。采用半定量RT-PCR技术、Western blot方法检测E6AP mRNA、蛋白表达水平,用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法检测细胞增殖状况,用流式细胞术检测细胞凋亡。结果转染E6AP siRNA24、48、72h后,E6AP siRNA组E6AP mRNA表达水平与对照siRNA组比较下降33%、72%、70%。Western blot结果显示,在转染48及72h,E6AP蛋白表达下降38%、59%。MTT法检测显示,转染HeLa细胞24、48、72、96h后细胞生长速度明显降低,E6AP siRNA组与空白对照组(F=101.38,P〈0.05)、对照siRNA组(F=38.64,P〈0.05)比较,差异均有统计学意义。E6AP siRNA作用24、48、72h后E6AP siRNA组凋亡率明显高于对照siRNA组(F=41.48,P〈0.05)和空白对照组(F=86.36,P〈0.05),差异有统计学意义。结论体外合成的siRNA能有效封闭宫颈癌细胞中E6AP基因的表达,抑制细胞增殖,促进细胞的凋亡,为宫颈癌的基因治疗提供理论依据。
修晓新
张淑兰
陆晓云
梁美艳
于筠
侯金萍
关键词:
RNA干扰
宫颈肿瘤
HELA细胞
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