何泽
- 作品数：10 被引量：5H指数：2
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- 相关领域：生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- TBC1D3表达上调降低人乳腺癌MCF-7细胞对长春新碱敏感性
- 目的研究乳腺癌细胞中TBC1D3表达上调时细胞对长春新碱(VCR)敏感性的变化,探讨TBC1D3表达是否影响VCR对乳腺癌的治疗效果。方法用RT-PCR方法扩增人TBC1D3的基因,酶切鉴定和测序确认,TBC1D3基因与...
- 何泽王丛阳王辉王露徐宁田田郭丹沈传陆
- 关键词：MCF-7乳腺癌细胞人乳腺癌长春新碱
- 文献传递
- 一种基于文本比较的多版本软件演化历史静态分析方法及系统
- 本发明公开了一种基于文本比较的多版本软件演化历史静态分析方法，该方法包括以下步骤：步骤1)将软件多个不同版本的文件以时间为序排列，步骤2)用计算程序文件内容余弦相似度的方法，步骤3)获知程序文件内容的差异，获知方法变更表...
- 喻慈舟李思易闻深博何泽葛梓昂王璐璐
- β微管蛋白调节新核浆蛋白TBC1D3细胞内定位和EGFR信号转导
- 目的: TBC1D3又称PRC17（前列腺癌基因17），是人科动物特有的癌基因，在多种肿瘤细胞中高表达，TBC1D3蛋白能延迟EGFR的降解，激活Ras及Erk1/2和Akt，促进细胞的增殖及恶性转化。寻找并鉴定新的与...
- 何泽
- 关键词：表皮生长因子受体信号转导细胞内定位
- 文献传递
- 一种基于文本比较的多版本软件演化历史静态分析方法及系统
- 本发明公开了一种基于文本比较的多版本软件演化历史静态分析方法，该方法包括以下步骤：步骤1)将软件多个不同版本的文件以时间为序排列，步骤2)用计算程序文件内容余弦相似度的方法，步骤3)获知程序文件内容的差异，获知方法变更表...
- 喻慈舟李思易闻深博何泽葛梓昂王璐璐
- 文献传递
- 人β-微管蛋白2C蛋白的原核表达与纯化被引量：2
- 2009年
- 目的构建体外原核表达和纯化人β-微管蛋白2C(TubB2C)蛋白。方法通过聚合酶链反应(PCR)扩增出人TubB2C基因完整开放读码框架(ORF),并插入pGEX-6P-1载体中构建pGEX-TubB2C重组质粒。经大肠杆菌BL21转化后,用异丙醇-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导谷胱甘肽S转移酶(GST)-TubB2C融合蛋白表达,用免疫印迹(W estern b lot)分析鉴定表达的GST-TubB2C蛋白,并在非变性条件下利用G lutath ione Sepharose 4B纯化GST-TubB2C蛋白。结果酶切分析和DNA测序表明TubB2C cDNA完整ORF以正确的阅读框架插入pGEX-6P-1载体;聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示表达的GST-TubB2C蛋白相对分子量约为78 000,W estern b lot结果显示该融合蛋白可被抗GST抗体特异性识别。纯化后的GST-TubB2C蛋白纯度约90%。结论TubB2C蛋白可在体外大量表达和纯化。
- 武慧娟田田王露徐宁王丛阳何泽沈传陆
- 关键词：原核表达蛋白纯化
- PRC17癌蛋白与β微管蛋白2C相互作用功能区的初步鉴定
- 目的:鉴定PRC17癌蛋白与细胞骨架β微管蛋白2C相互作用的功能区,以进一步阐明癌蛋白PRC17的功能。方法:用PCR方法构建PRC17癌蛋白的一系列氨基端或羧基端截短变异体,经用Lipofectamine转染人HEK2...
- 何泽王丛阳王辉田田
- 文献传递
- 阿霉素对人乳腺癌细胞MCF-7表达KIF4A的抑制作用被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨阿霉素对人乳腺癌细胞MCF-7表达KIF4A的影响。方法:用Western blotting方法检测阿霉素处理MCF-7细胞后不同时间该细胞表达的KIF4A蛋白;用不同浓度的阿霉素处理MCF-7细胞96h后,检测KIF4A蛋白,并进行衰老相关半乳糖苷酶染色。结果:与未用阿霉素处理的MCF-7细胞相比,阿霉素处理的MCF-7细胞表达KIF4A蛋白降低;衰老相关半乳糖苷酶染色率由5%提高到42%,染色阳性的细胞形态亦呈衰老样变。结论:阿霉素处理MCF-7细胞可使KIF4A蛋白表达水平降低,KIF4A蛋白表达降低与阿霉素引起MCF-7细胞衰老的关系有待进一步研究。
- 王露武慧娟徐宁王丛阳何泽沈传陆
- 关键词：阿霉素细胞衰老MCF-7细胞
- PRC17癌蛋白与β微管蛋白2C相互作用功能区的初步鉴定
- 2010年
- 何泽王丛阳王辉田田
- 关键词：癌蛋白微管蛋白细胞骨架蛋白结合变异体羧基端
- 人肌球蛋白调节性轻链的原核表达及纯化被引量：1
- 2013年
- 目的:构建pGEX-MLC2重组质粒,在大肠杆菌中表达并纯化谷胱甘肽硫转移酶(GST)-MLC2融合蛋白,以用于MLC2抗体的制备。方法:从人乳腺癌MCF-7细胞中提取总RNA,通过RT-PCR获得人MLC2cDNA全长开放读码框架(open reading frame,ORF),并将其重组于原核蛋白表达质粒pGEX-6P-1中,经限制性内切酶和DNA测序鉴定,将该重组质粒转化大肠杆菌E.coli BL21,用异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达GST-MIC2融合蛋白后,进行Western blotting分析,鉴定GST-MLC2蛋白;通过GlutathioneSepharose 4B亲和层析柱纯化融合蛋白,并用SDS-PAGE电泳鉴定该融合蛋白的纯度。结果:人乳腺癌MCF-7细胞MLC2的RT-PCR产物为535 bp,符合预期;重组质粒pGEX-MLC2经BamHI和EcoRI双酶切出现特征性的525 bp片段;DNA测序证实MLC2全长ORF序列正确无误。IPTG诱导表达的GST-MLC2融合蛋白分子质量约为46.6 kDa,纯化后其蛋白纯度约95%,经Western blotting分析表明诱导表达的蛋白是GST-MLC2融合蛋白。结论:人MLC2蛋白原核表达质粒的构建、GST-MLC2融合蛋白的表达和纯化,为MLC2抗体的制备及MLC2功能的深入研究奠定了基础。
- 陈洋何泽张永臣万青赵虎子赵蕾沈传陆
- 关键词：原核表达GST融合蛋白蛋白纯化
- 癌蛋白PRC17与人肌球蛋白调节轻链相互作用的初步鉴定
- 2014年
- 目的:分析前列腺癌基因17(PRC17)与人肌球蛋白调节轻链(MLC2)之间的相互作用,并鉴定PRC17蛋白序列上与MLC2相互作用的功能区域。方法:经大肠杆菌表达并用Glutathione Sepharose 4B纯化GST及融合蛋白GST-MLC2,用SMMC-7721细胞表达带HA标签的PRC17及其截短突变体HA-PRC17(353)、HA-PRC17(251)、HA-PRC17(164)和HA-PRC17(Δ164),GST沉淀实验分析GST-MLC2与PRC17及其截短体的相互作用。结果:经诱导表达并纯化的GST和GST-MLC2分子质量符合预期,分别约为28.4 kD和46.6 kD,纯度均95%以上;GST沉淀实验结果显示,PRC17结合MLC2,不结合阴性对照GST;PRC17(353)和PRC17(251)也能有效结合MLC2,但PRC17(164)和PRC17(Δ164)都不能与MLC2结合。结论:PRC17能特异性结合MLC2,其蛋白序列上与MLC2结合的部位位于其氨基端251位氨基酸之内,可能在164位氨基酸附近。
- 何泽陈洋张永臣万青赵虎子赵蕾沈传陆
- 关键词：肌球蛋白轻链融合蛋白相互作用
