何柳
- 作品数：5 被引量：19H指数：3
- 供职机构：福建农林大学植物保护学院植物病毒研究所更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学理学更多>>
- RSV编码的4种蛋白在“AcMNPV-sf9昆虫细胞”体系中的重组表达
- 2008年
- 应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)获得水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)的4个基因NS2、NS3、CP和SP,并将它们克隆至pMD-18-T载体上.得到的重组质粒pMD-18-T-NS2、pMD-18-T-NS3、pMD-18-T-CP和pMD-18-T-SP经XbaⅠ/HindⅢ双酶切,分别与经相同方法酶切的苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa california nuclear polyhedrosis virus,AcM-NPV)转移载体pFastBacHTb相连接,构建重组转移质粒pFastBacHTb-X(pFastBacHTb-NS2、pFastBacHTb-NS3、pFastBacHTb-CP和pFastBacHTb-SP).序列测定表明,目的基因准确地插入到表达载体中.重组质粒pFastBacHTb-X通过转化包含有穿梭载体的大肠杆菌(Escherichia coli)感受态细胞DH10Bac,得到重组穿梭质粒rb-X(rb-NS2、rb-NS3、rb-CP和rb-SP).rb-X侵染草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)离体细胞(sf9)24-72 h后,在荧光倒置显微镜可见光200倍视野下观察到细胞增大、培养液和细胞内出现颗粒状物质、部分细胞破裂甚至裂解等一系列与正常sf9细胞形态有明显区别的现象.rb-X侵染细胞72h后,从细胞提取蛋白,电泳分析得到4个条带,大小分别为28.2、29.2、40.2和25.2 ku,与预测的4种融合蛋白大小一致.Western blotting分析分别得到4条单一条带,证明了RSV NS2、NS3、CP和SP基因在"AcMNPV-sf9昆虫细胞"真核表达体系中成功表达.
- 林董何柳谢荔岩吴祖建林奇英谢联辉
- 关键词：水稻条纹病毒苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒杆状病毒表达系统
- 降解半纤维素嗜热菌的筛选及其酶学性质被引量：4
- 2010年
- 以半纤维素为惟一碳源,从温泉中分离到1株降解半纤维素酶的嗜热菌DT-1,经16S rDNA序列比较分析,初步鉴定该菌株属于Geobacillus thermocatenulatus.菌株DT-1发酵条件的初步研究表明:在培养基初始pH为5.0,温度为55℃,装液量为30%,摇床转速为120 r.min-1的条件下培养36 h,该菌株产酶总活力达到最大.对菌株DT-1所产半纤维素酶的性质分析表明:该酶的最适作用温度为65℃,最适作用pH为6;另外,2-ME、EDTA、SDS、PMSF在不同程度上能增强酶的活性,其余抑制剂和去污剂DDT、Tween-20和TritonX-100对该酶活力影响不大;金属离子Mg2+、Ca2+、Mn2+、Fe2+、Co2+对该酶有激活作用,K+、Na+、Li+、Zn2+、Ba2+对酶作用不显著.
- 张宁宁林白雪何柳余能富刘斌谢联辉
- 关键词：嗜热菌酶学性质
- 降解纤维素嗜热菌的分离及纤维素酶性质分析被引量：11
- 2010年
- 从福州永泰温泉分离到1株降解纤维素嗜热菌,通过形态特征和16S rDNA序列鉴定,将其命名为地芽孢杆菌(Geobacillussp.)TC-S8.采用3,5-二硝基水杨酸显色法(DNS法)对菌株TC-S8产胞外纤维素酶的发酵条件及酶性质进行研究.在培养基的初始pH为6.5,温度为60℃,装液量20%,接种量2%,摇床转速为120 r.min-1的条件下培养36 h,菌株TC-S8产酶量达到最大(229 mU.mL-1).其分泌的纤维素酶最适作用温度为60-70℃,最适pH为7.0.纤维素酶降解产物主要为葡萄糖,并有少量纤维二糖.
- 陈路劼刘斌林白雪何柳张宁吴祖建谢联辉
- 关键词：嗜热菌降解纤维素
- 福州永泰温泉嗜热菌的分离与鉴定被引量：4
- 2008年
- 采用全菌体蛋白凝胶电泳(SDS-PAGE)对从福州永泰温泉中分离到的60株嗜热菌进行了预筛选,再通过16S rDNA序列分析鉴定出8株代表菌.结果表明全菌体蛋白SDS-PAGE分析是一种简便、快速的菌株筛选方法.
- 刘斌陈路劼吴美爱何柳吴祖建
- 关键词：嗜热菌
- 厌氧降解纤维素产乙醇菌群的筛选鉴定及发酵条件分析
- 本研究从内华达州大盆地温泉采样，以纤维素为底物富集厌氧纤维素降解菌群，筛选获得高效纤维素降解厌氧两个菌群SV47和SV79。选其中降解纤维素能力较高的菌群SV79作为研究对象，以滤纸条为唯一碳源对菌群SV79进行15次传...
- 何柳
- 关键词：降解纤维素纤维素酶
- 文献传递
