丁丽娜
- 作品数：11 被引量：67H指数：4
- 供职机构：肇庆市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：肇庆市科技创新计划项目广东省肇庆市科技创新计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 肇庆市水产品中首次检出霍乱弧菌被引量：7
- 2006年
- 目的：了解肇庆市零售水产品中霍乱弧菌的污染状况，为改善当前霍乱防治工作提供实验依据。方法：依据国标方法，对2004年7—8月采自肇庆市水产品批发市场、零售市场和酒店的水产品进行霍乱弧菌的分离、生化及血清学鉴定。结果：共采集水产品样品65件，水体样品22件。从样品中检出霍乱弧菌9株，其中分离自蛙8株，养殖水1株；8株为01群Ehor霍乱弧菌稻叶型91，1株为O1群Eltor霍乱弧菌小川型91。结论：该次肇庆市水产品检出的霍乱弧菌均为非流行株，但仍需加强对水产品的主动监测，预防霍乱流行株的出现而导致霍乱的散发和暴发流行。
- 谭海芳丁丽娜
- 关键词：霍乱弧菌
- 诺如病毒遗传组Ⅱ型TaqMan-MGB探针实时荧光PCR的检测研究被引量：2
- 2008年
- 目的建立特异、灵敏的诺如病毒遗传组Ⅱ型TaqMan-MGB探针实时荧光PCR快速检测方法。方法根据GenBank诺如病毒遗传组Ⅱ型代表株保守序列设计特异引物对和TaqMan-MGB探针,调整引物、探针浓度,优化最佳反应条件,建立一步法实时荧光PCR快速检测反应体系,进行灵敏度、特异性、稳定性试验,以评价反应体系,并与引物P289/P290常规RT-PCR进行灵敏度比较。结果诺如病毒遗传组Ⅱ型TaqMan-MGB探针实时荧光PCR检测时限短,仅1h就出结果;最低检出下限为100拷贝/mL,比引物P289/P290常规RT-PCR灵敏度高100倍;与轮状病毒、腺病毒、星状病毒、甲肝病毒无交叉反应;4份核酸含量不同的标本重复检测5次,平均Ct值变异系数范围0.96%～2.27%。结论诺如病毒遗传组Ⅱ型TaqMan-MGB探针实时荧光PCR快速、特异、灵敏、稳定性好,可应用于突发公共卫生应急检测,提高快速检测能力。
- 陈华谭翰清郭赐贶谭海芳程洁萍林凤孔秀珍丁丽娜
- 关键词：人类杯状病毒诺如病毒实时荧光PCRTAQMAN
- 食物中毒沙门菌PFGE分子分型及耐药性研究被引量：3
- 2009年
- 目的:对本地区食物中毒的沙门菌的分子分型及耐药性进行分析。方法:菌株分离、生化鉴定和血清型确定参照GB/T4789.4-2003方法进行,采用PFGE进行分子分型,利用药敏卡通过仪器对菌株进行药敏试验。结果:从12份标本中,检出8株塔克松尼沙门菌,经PFGE分型,8株源于食物中毒病人和食物标本的塔克松尼沙门菌其带型一致,为相同菌株。对8株塔克松尼沙门菌进行了21种抗生素的药敏试验,受试菌对大多数常用的头孢类和喹酮类抗生素敏感。结论:PFGE是一种非常有效的分子分型方法,建立细菌PFGE指纹图谱数据库及PulseNet,对于控制食源性疾病非常重要。
- 谭海芳谭翰清丁丽娜林凤
- 关键词：食物中毒沙门菌PFGE耐药性
- 诺如病毒遗传组I型TaqMan-MGB探针实时荧光RT-PCR的研究被引量：4
- 2008年
- 目的建立诺如病毒遗传组I型TaqMan-MGB探针实时荧光RT-PCR快速、特异、灵敏的检测方法,为疾病预防控制提供可靠的依据。方法根据GenBank诺如病毒遗传组Ⅰ型代表株保守序列设计特异引物对和TaqMan-MGB探针,建立一步法实时荧光RT-PCR快速检测反应体系,优化反应条件,评价反应体系的灵敏度、特异性、重复性,并与常规RT-PCR比较。结果诺如病毒遗传组Ⅰ型TaqMan-MGB探针实时荧光RT-PCR检测时限短,仅1h就出结果,与轮状病毒、腺病毒、星状病毒、甲肝病毒、诺如病毒遗传组Ⅱ型无交叉反应,最低检出下限为100拷贝/反应,比常规RT-PCR灵敏100倍,5份浓度不同的诺如病毒遗传组Ⅰ型标本重复检测5次,平均Ct值变异系数范围为0.39%～1.02%。结论诺如病毒遗传组Ⅰ型TaqMan-MGB探针实时荧光RT-PCR快速、特异、灵敏、重复性好,可应用于突发公共卫生应急检测和诺如病毒遗传组Ⅰ型监测,提高快速检测能力。
- 谭翰清郭赐贶谭海芳陈华程洁萍林凤孔秀珍丁丽娜
- 关键词：人类杯状病毒诺如病毒实时荧光PCR逆转录PCR
- 2004-2007年肇庆市食品中食源性致病菌监测与分析被引量：13
- 2009年
- 目的了解肇庆市食品中食源性致病菌的污染状况和污染水平,初步确定高危食品的种类,为食源性疾病的监测提供科学的依据。方法按全国食品污染物监测网的工作手册,2004-2007年采集4个监测点的5大类食品(生肉、熟肉、水产品、生吃水产品和生吃蔬菜)共计325份,对沙门菌、单核细胞增生李斯特菌、大肠杆菌O157∶H7和副溶血性弧菌4种食源性致病菌进行监测分析。结果325份食品样品中,检出致病菌27株(8.31%)。其中沙门菌16株(4.92%),单核细胞增生李斯特菌10株(3.08%),大肠杆菌O157∶H7未检出,80份水产品中检出副溶血性弧菌1株(1.25%)。生肉的污染情况最为严重,检出率为11.35%,其次是熟肉,检出率为9.68%;水产品的检出率为5.45%,生食水产品的检出率为4.00%,生食蔬菜的检出率为2.56%。结论沙门菌和单核细胞增生李斯特菌对肇庆市食品的污染普遍存在。生肉、熟肉的污染尤为严重,是重要的高危食品。
- 谭海芳丁丽娜
- 关键词：食品食品污染环境监测海味肉制品
- 4种食源性致病菌污染状况调查被引量：3
- 2006年
- 目的了解肇庆市食品中沙门氏菌、单增李斯特菌、EHEC O157:H7和副溶血性弧菌的分布状况、动物储存宿主的种类、菌株生物学特点,初步确定可能污染上述致病菌的高危食品,为食物中毒监测提供科学依据。方法依据国标方法,采用进口显色培养基。对样本分别进行沙门氏菌、单增李斯特菌、EHEC O127:H7和副溶血性弧茵分离、生化及血清学鉴定。结果监测生肉(猪、牛、鸡)、熟肉、水产品三类样品共58件,共检出致病菌6株,总检出率10．3％。其中分离沙门氏菌4株,检出率6．9％;单增李斯特菌2株,检出率3．4％:EHEC O157:H7和副溶血性弧菌均未检出。3类食品中致病菌阳性率最高的为生肉(17．9％),其次为水产品(5．0％),熟肉未检出致病菌。结论肇庆市居民主要消费食品存在食源性致病菌污染,其中生肉是主要污染食品品种,生肉(猪肉)中沙门氏菌带菌率较高(30．0％),主要血清型为德尔卑沙门氏菌,熟肉未检出致病菌。
- 谭海芳丁丽娜陈华
- 关键词：食品污染食源性致病菌
- 筛选与确诊试验在检测香港海鸥菌中的建立与应用被引量：4
- 2010年
- 目的建立简便、快速、准确、特异的香港海鸥菌实验室诊断技术。方法采集淡水鱼类、胃肠炎腹泻患者新鲜粪样,接种于改良头孢哌酮MacConkey(CMA)培养基,对典型菌落分别进行氧化酶、触酶、三糖铁(TSI)3项筛选试验和常规生化鉴定,凡氧化酶、触酶试验阳性以及三糖铁(TSI)试验阴性的菌株,采用特异性PCR检测确诊;通用引物扩增16SrRNA并与香港海鸥菌HKU1株进行同源性分析。结果在92份淡水鱼样品和211份胃肠炎腹泻患者粪样中,共检出香港海鸥菌11株和1株,阳性率分别为11.96%(11/92)和0.48%(1/211)。筛选与确诊试验和常规生化试验的检测结果一致,符合率为100%(12/12)。分离的香港海鸥菌16SrRNA序列与HKU1株同源性在99.5%～100%之间,仅差1～2个碱基。结论本文建立的筛选与确诊试验适用于香港海鸥菌的诊断。
- 谭海芳谭翰清丁丽娜林凤萧金长区良钰朱颖梅
- 关键词：香港海鸥菌淡水鱼胃肠炎PCR
- 香港海鸥形菌TaqMan-MGB探针实时荧光PCR的建立与应用被引量：2
- 2013年
- 目的建立快速、灵敏、特异的香港海鸥形菌TaqMan-MGB探针实时荧光PCR体系,用于食源性致病菌监测和淡水鱼产品贸易往来的快速检测。方法根据GenBank公布的香港海鸥形菌16SrRNA基因高保守序列,设计特异引物对和TaqMan-MGB探针,建立和优化快速检测体系,评价反应体系的特异性、灵敏度、重复性,并在淡水鱼类、急性胃肠炎腹泻患者标本中临床应用,结合细菌分离方法和序列测定分析进行验证。结果建立的香港海鸥形菌TaqMan-MGB探针实时荧光PCR反应体系检测时限短,仅40min就可出结果,特异性好,与沙门氏菌、志贺氏菌、副溶血弧菌等非目标菌无交叉反应,灵敏度高,检测下限达10拷贝/反应,稳定性好,同一浓度阳性质粒进行16次重复检测的Ct值变异系数0.183%。92份淡水鱼及211份医院急性胃肠炎腹泻标本实时荧光PCR与常规细菌分离结果完全一致,均检出了12株香港海鸥形菌,16SrRNA测序结果显示与HKU1株同源性在99.5%以上,进一步验证了实时荧光PCR的特异性。结论本研究建立的香港海鸥形菌TaqMan-MGB探针实时荧光PCR反应体系快速、特异、灵敏,在防止食源性疾病的传播和加快贸易通关速度方面,具有较强的的应用价值。
- 谭翰清谭海芳林凤丁丽娜程洁萍朱颖梅苏乐斌陈华
- 关键词：香港海鸥形菌实时荧光PCRTAQMAN-MGB探针
- 一起肠炎沙门菌食物中毒检测分析被引量：4
- 2008年
- 目的:应用实时荧光PCR技术对细菌性食物中毒进行快速检测,为食物中毒调查和应急处理提高依据。方法:采集16份相关标本,其中病人肛拭3份、粪便标本1份、呕吐物1份、剩余食物3份、食物加工人员手涂抹液1份和工作台具涂抹液7份,前增菌后,提取核酸,在LightCycler荧光定量PCR仪上利用实时荧光PCR技术进行沙门菌、志贺菌、金黄色葡萄球菌、单核增生李斯特菌、大肠杆菌O157、副溶血弧菌病原菌的快速检测和筛查,同时进行细菌分离培养,利用VITEK全自动微生物鉴定仪对可疑菌进行生化反应检测,以及进行血清学试验。结果:11份标本沙门菌实时荧光PCR检测阳性,其他细菌荧光PCR检测阴性;该11份荧光PCR阳性标本分离的菌株经全自动微生物生化鉴定仪鉴定为沙门菌,99%的概率,血清型都为AF、O9、Hg、Hm,为肠炎沙门菌。结论:本次食物中毒由肠炎沙门菌引起的,应大力整顿熟食市场,加强食品卫生管理和宣传健康教育,避免同类事件再次发生。
- 陈华谭翰清谭海芳丁丽娜林风程洁萍孔秀珍
- 关键词：肠炎沙门菌食物中毒实时荧光PCR
- 水产品中霍乱弧菌的分离鉴定及生物分型报告
- 2007年
- 目的 了解肇庆市售水产品中霍乱弧菌的污染状况及霍乱弧菌分离株的噬菌体一生物分型情况，研究其分子遗传学特征及流行病学意义。方法 2004年7月，采集肇庆市各水产品交易市场的海、水产品及其养殖水，按国标方法进行霍乱弧菌分离鉴定，采用噬菌体-生物分型区分检出菌是否为流行株。结果 从87份样品中共检出9株霍乱弧菌，检出率为10．35％。其中分离自青蛙5株、牛蛙3株、养殖水1株。分离的菌株均为01群埃尔托霍乱弧菌，噬菌体一生物分型结果其中均为9L，分离自青蛙和牛蛙的8株霍乱弧菌的血清型为稻叶型，分离自养殖水的1株霍乱弧菌为小川型。结论 本次在水产品及其养殖水中检出霍乱弧菌，虽然检出的霍乱弧菌均为非流行株，但仍需加强监测，预防霍乱的散发和暴发流行。
- 黄雪珍丁丽娜谭海芳
- 关键词：水产品霍乱弧菌
