龙隆
- 作品数：30 被引量：25H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院毒物药物研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 己烯酮类化合物及其医药用途
- 本发明涉及通式I化合物，或其异构体、可药用盐及溶剂化物；本发明还涉及包含通式I化合物或其异构体、可药用盐及溶剂化物，以及药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂的组合物；本发明还涉及通式I化合物，或其异构体、可药用盐及溶剂化物...
- 李松钟武刘涓王莉莉何昆仑龙隆肖军海郑志兵李薇李鑫胡国梁
- 文献传递
- 应用高内涵分析技术识别雄激素受体激动剂被引量：8
- 2014年
- 目的应用高内涵分析(HCA)技术快速识别对雄激素受体(AR)具有激动作用的药物。方法以稳定表达AR-增强绿色荧光蛋白融合蛋白(AR-EGFP)的人骨肉瘤细胞U2OS为模型,采用HCA技术观察本实验室收集的98个上市药物或优选化合物对AR-EGFP细胞核转位和核颗粒形成的影响,筛选对AR具有激活作用的化合物,分析其浓度效应关系;并用前列腺癌细胞PC-3(AR-/-)和LINCaP(AR+/+)的AR荧光素酶报告基因的筛选方法进行验证。结果 HCA筛选发现,在98个受试药物中,乐卡地平、螺内酯、异丙肾上腺素和组胺能浓度依赖地促进AR-EGFP细胞核转位,其EC50分别为0.067±0.008,0.21±0.04,0.87±0.26和(4.53±1.04)μmol·L-1;促进AR-EGFP细胞核颗粒形成,其EC50分别为0.023±0.006,0.82±0.13,3.00±1.68和(4.76±1.57)μmol·L-1;地塞米松≥3μmol·L-1时也表现出促进AR-EGFP细胞核转位和颗粒形成的作用。荧光素酶报告基因结果显示,在PC-3和LINCaP细胞中,乐卡地平、异丙肾上腺素、螺内酯、组胺和地塞米松均可促进外源和内源AR的转录活性,与HCA结果基本一致,但结果高于HCA筛选测得的EC50。结论以荧光标记细胞为基础的HCA技术是灵敏和快速识别AR激动剂的分析方法。乐卡地平、螺内酯、异丙肾上腺素、组胺和地塞米松具有AR激动活性。
- 冯帆龙隆李微王莉莉
- 关键词：雄激素受体激动剂
- 取代噻唑基吡唑并吡啶类化合物及其医药用途
- 本发明涉及新型取代噻唑基吡唑并吡啶类化合物及其医药用途。具体地说，本发明涉及式I化合物，及其异构体药学可接受的盐、溶剂合物：其中各取代基的定义如说明书所述。本发明还涉及包含所述化合物的药物组合物、以及所述化合物在制备用于...
- 李松郑志兵李亮钟武王莉莉陈伟李行舟肖军海周辛波龙隆谢云德赵国明王晓奎
- 文献传递
- 1,3,5-三取代吡唑类ALK5抑制剂的合成与生物评价研究
- 2010年
- 目的设计合成1,3,5-三取代吡唑类化合物,并研究其对ALK5所介导的TGFβ信号通路的抑制活性,以期发现新型ALK5抑制剂。方法先以取代的苯甲醛和4-乙酰苯甲腈为原料,合成取代的查儿酮,再与芳基肼或芳基肼盐酸盐反应生成1,3,5-三取代吡唑啉,然后氧化脱氢得到相应的1,3,5-三取代吡唑类化合物,最后对官能团做适当的变换,得到目标化合物;应用基于细胞的TGF-Smad2检测评价了化合物的ALK5抑制活性。结果与结论合成29个未见报道的新目标化合物,其结构均经核磁共振谱与质谱确证,其中化合物6c显示有较好的ALK5抑制活性。
- 李行舟王莉莉龙隆肖军海李松
- 关键词：化学合成激酶抑制剂
- 基于高内涵分析技术的新型PPARα/γ双重激动剂C333H和P633H的肝细胞毒性初步研究被引量：1
- 2011年
- 目的基于建立的高内涵细胞多参数毒性分析方法,观察新型PPARα/γ双重激动剂C333H和P633H的HepG2肝细胞毒性,并初步探查其可能的损伤机制。方法在HepG2人肝癌细胞上,采用高内涵分析(HCA)技术,进行C333H和P633H的细胞毒性(细胞数量、核固缩、膜通透性、线粒体膜电位和细胞色素C),以及氧化应激和DNA损伤的多参数分析。结果 MTT法测得C333H和P633H抑制HepG2细胞增殖的IC50分别为(161.57±15.29)μmol/L和(101.08±17.58)μmol/L。HCA研究表明C333H在10～100μmol/L,P633H在3～30μmol/L显著降低膜通透性和线粒体膜电位;C333H在30～300μmol/L、P633H在10～100μmol/L浓度依赖性地降低细胞数量。至高浓度时,300μmol/L C333H和100μmol/L P633H进一步显著降低线粒体膜电位和细胞数量,显著增加核DNA及细胞色素C含量,显著减少核面积,此浓度下膜通透性和超氧化物歧化酶显著增加。结论 C333H在低于100μmol/L,P633H在低于30μmol/L时对HepG2肝细胞无明显的毒性反应;线粒体损伤、膜完整性破坏是两化合物引起细胞毒性反应的主要机制,其中线粒体损伤为毒性反应早期敏感性检测指标。此外,HCA法与MTT法在细胞增殖作用的分析上具有较好的一致性。
- 刘利波陈伟龙隆王莉莉
- 关键词：肝毒性PPAR新药筛选
- 一种筛选CCR4拮抗剂的细胞模型及筛选方法
- 本发明属于药物和细胞生物学领域，涉及一种以人趋化因子受体4为靶标的高效、可靠的CCR4拮抗剂的高内涵筛选细胞模型及筛选方法。本发明建立了一种导入了人CCR4‑增强型绿色荧光蛋白融合表达的细胞系，经人胸腺激活调节趋化因子、...
- 王莉莉李微戴文婕龙隆肖军海陈伟李松
- 文献传递
- 新型Ⅰ型大麻素受体拮抗剂LMJ07的体外生物活性被引量：1
- 2015年
- 目的 LMJ07为靶向大麻素Ⅰ型受体(CB1R)设计合成的选择性拮抗剂,本文从分子水平受体结合、细胞水平CB1R受体内在化、CB1R诱导的细胞骨架和信号分子的变化等方面对其CB1R拮抗活性进行了评价。方法以已知的CB1R选择性拮抗剂利莫那班(SR141716A)为对照,采用放射性配体竞争结合和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)示踪大麻素受体(CBR)内在化的高内涵分析实验分析了LMJ07对2种CBR亚型(CB1R和CB2R)的结合及G蛋白不依赖的受体激活的拮抗活性及选择性;分别采用CELLKEY无标记检测系统和均相时间分辨荧光(HTRF)测定了LMJ07对CBR激活诱导的CHO-CB1细胞骨架和胞内环腺苷酸(c AMP)含量的影响;最后采用连续荧光检测技术使用表达CB1R的原代海马细胞检测LMJ07对胞内Ca2+的影响。结果 LMJ07高亲和、高选择地与CB1R结合,选择性地拮抗CB1R的激活导致的受体内吞,且选择性和拮抗活性与利莫那班相当;在CHO-CB1R细胞上,LMJ07(0.01~10μmol/L)剂量依赖地逆转CBR激动剂Win55212-2诱导的细胞骨架变化相关的细胞电阻改变、剂量依赖地逆转Win55212-2降低胞内c AMP含量效应;在原代培养的海马细胞上,LMJ07(10 nmol/L^1μmol/L)可拮抗Win55212-2诱导的胞内Ca2+增加效应。在上述实验中,LMJ07拮抗CB1R通路的信号分子和功能的活性与利莫那班相当。结论 LMJ07是一个与利莫那班活性相当的新结构类型CB1R选择性拮抗剂。
- 税凤春陈伟龙隆李薇郑志兵徐成徐静华王莉莉
- 关键词：选择性拮抗剂利莫那班体外活性
- 一种筛选κ阿片受体激动剂的细胞模型及筛选方法
- 本发明属于细胞生物学和药学领域，涉及一种用于筛选OPRK阿片受体激动剂的细胞模型及筛选方法。具体地，本发明涉及一种细胞，其同时表达阿片受体和PKA。本发明还涉及一种筛选阿片受体激动剂的方法、一种评估化合物或组合物对阿片受...
- 宫泽辉李玉蕾王莉莉龙隆李微苏瑞斌颜慧周培兰
- 一种取代乙酰肼类衍生物、其制备方法及用途
- 本发明属于医药化工领域，涉及一种取代乙酰肼类衍生物、其制备方法及用途。具体地，涉及式I所示的化合物，或其可药用盐。本发明的化合物或其可药用盐能够有效地抑制脯氨酸羟化酶，稳定HIF-α特别是HIF-1α，具有应用于制备治疗...
- 李松肖军海王莉莉龙隆李薇罗浩铭李菲菲钟武郑志兵谢云德李行舟周辛波王晓奎曹瑞源
- 文献传递
- 激活素受体样激酶4,5和7抑制剂体外高通量筛选模型的构建被引量：2
- 2017年
- 目的构建适于高通量筛选的激活素受体样激酶4(ALK4),ALK5和ALK7抑制剂的筛选模型。方法利用Bac to Bac昆虫杆状病毒表达系统,构建ALK4激酶结构域(ALK4kd),ALK5kd和ALK7kd及Smad2和Smad3蛋白的病毒表达系统,转染Sf9昆虫细胞,表达目的蛋白;通过谷胱甘肽S-转移酶(GST)亲和柱纯化,获得纯化的目的蛋白;分别以纯化的ALK4,ALK5,ALK7激酶片段与纯化的Smad3和ATP构建ALK4,ALK5,ALK7激酶活性测定体系,优化各反应底物浓度及反应条件,建立适于通量化分析的筛选模型;以已知ALK激酶抑制剂SB431542为工具分子,检测其对激酶的抑制活性,确证筛选模型的可靠性。结果经酶切和PCR鉴定,所得重组Bacmid均正确。转染Sf9昆虫细胞后纯化获得相应目的蛋白。经条件优化,反应体系中激酶和底物蛋白Smad3最佳浓度均为10 mg·L^(-1),ATP最佳初始浓度为10 nmol·L^(-1)。所得ALK4,ALK5和ALK7激酶抑制剂筛选体系的Z′因子分别为0.71,0.51和0.74,符合高通量筛选要求。已知SB431542在所建模型上对ALK4kd,ALK5kd和ALK7kd的抑制活性IC50值分别为22,188和91 nmol·L^(-1)。结论成功构建了ALK4,ALK5和ALK7激酶抑制剂的体外筛选模型。
- 龙隆李菲菲刘洪英王莉莉
- 关键词：BACSMAD3蛋白
