马艳红
- 作品数：6 被引量：6H指数：2
- 供职机构：中国药科大学更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- 重组人胰高血糖素样肽-1类似物的制备及活性分析
- 2011年
- 通过重叠PCR的方法获得重组人胰高血糖素样肽-1(GLP-1)类似物PP-h[Gly8]GLP-1的目的基因片段,将该基因与融合表达载体pED连接,并在融合伴侣的N末端插入6×His标签,转入E.coli BL21(DE3),构建出重组GLP-1类似物融合表达菌。PP-h[Gly8]GLP-1通过Ni离子亲和色谱和酸水解等步骤分离纯化得到,其纯度大于90%,用电喷雾质谱法测定其相对分子质量与理论分析结果一致。ICR小鼠经口给予耐血糖及血浆胰岛素测定的结果表明,PP-h[Gly8]GLP-1具有明显的降血糖活性和促胰岛分泌作用(P<0.01),为开发潜在的治疗糖尿病药物提供了理论基础。
- 李泰明马艳红徐舒刘涛谷春娇徐辰刘景晶
- 关键词：分离纯化生物活性2型糖尿病
- 人胰高血糖素样肽-2类似物基因串联体构建及原核细胞表达被引量：2
- 2011年
- 利用同尾酶法构建人胰高血糖素样肽-2类似物{PP-h[Gly2]GLP-2(1-35)}基因串联体重组质粒,实现目的基因在大肠杆菌中高效表达。通过PCR扩增获得PP-h[Gly2]GLP-2(1-35)基因片段,利用同尾酶BamHⅠ和BclⅠ产生相同的粘性末端,经连接、转化、筛选等操作构建其基因串联体。经DNA测序分析,成功构建PP-h[Gly2]GLP-2(1-35)的二、四、六、八拷贝基因串联体。SDS-PAGE显示,各重组菌经D-乳糖诱导后均表达目的融合蛋白,其相对分子质量与预期结果相符,目的肽含量并非随串联个数增加而明显增加,改变融合伙伴后,目的肽的表达量从0.106 g/L提高到0.372 g/L,为大量制备和纯化PP-h[Gly2]GLP-2(1-35)奠定了基础。
- 李泰明刘涛张美由马艳红周哲谷春娇庄舰峰刘景晶
- 关键词：串联体同尾酶
- Exendin-4类似物1的分离纯化与体内生物活性研究
- 李泰明张美由刘景晶谷春娇樊妮李丽葛晓宇李哲哲王丹马艳红刘涛
- 人胰高血糖素相关肽-1类似物
- 本发明属于基因工程领域，公开两种人胰高血糖素相关肽-1的类似物的工程菌构建、表达、目的肽的制备方法。通过双酶切后插入目的序列，并在融合蛋白前端加入His标签，通过获得融合蛋白，用酸切割融合蛋白获得目的肽，等电点沉淀后再次...
- 李泰明马艳红刘景晶徐辰刘涛谷春娇
- 文献传递
- 胰高血糖素样肽-1及其类似物的研究进展被引量：4
- 2011年
- 目的介绍胰高血糖素样肽-1(GLP-1)及其类似物的结构特点、研究进展以及临床情况。方法查阅国内外文献及相关资料,根据GLP-1的结构特点,归纳了对其进行的结构改造与修饰的方法及所产生的临床药效。结果 GLP-1能葡萄糖浓度依赖地促进胰岛素分泌,能降低2型糖尿病患者糖化血红蛋白水平和餐后血糖,并能减轻体质量。结论通过对GLP-1的结构改造与修饰,开发更稳定更有效的GLP-1类似物,是未来糖尿病治疗领域的主要研究思路之一。
- 马艳红刘涛刘景晶李泰明
- 关键词：胰高血糖素样肽-1生理功能2型糖尿病
- Exendin-4类似物的克隆、表达与体内生物活性检测
- 2012年
- 为研究Exendin-4类似物的克隆,融合表达及在体内的生物活性,在pED载体融合伴侣序列中插入利于下游分离纯化的序列成为5#载体,将Exendin-4类似物基因与5#载体中的融合伴侣基因通过酸水解位点连接,转化至E.coli BL21中并诱导表达融合蛋白,酸水解将目的肽与融合伴侣分开后,经阴离子交换树脂分离得到目的肽。6周～8周正常雄性ICR小鼠皮下注射Exendin-4类似物后,口服糖耐量实验检测在不同时间段小鼠血液中葡萄糖及胰岛素含量的变化。结果表明:融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的40%,Exendin-4类似物纯度达91.8%。Exendin-4类似物的活性与对照组相比,具有显著的降低血糖和显著促进胰岛素分泌的活性(P<0.01)。
- 李泰明谷春娇葛晓宇李哲哲王丹马艳红刘涛张美由李丽刘景晶
- 关键词：生物活性血糖胰岛素
