陈颖
- 作品数:107 被引量:436H指数:12
- 供职机构:第二军医大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金“十一五”国家科技支撑计划上海市浦江人才计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学自动化与计算机技术更多>>
- 针对人NeuroD基因RNA干扰慢病毒载体的构建及鉴定
- 2013年
- 目的构建并鉴定人神经源性分化蛋白基因(NeuroD)RNA干扰慢病毒表达载体。方法根据已公布的NeuroD基因序列(GenBank:NM-002500),设计并合成4对shRNA(NeuroD1~D4),与载体pcDNAr^TM6.2-GW/EmGFP-miR连接,构建pcDNA”6.2-GW/EmGFP—miR-NeuroD表达载体,转化入感受态细胞DH5a;real—timePCR技术检测pcDNA^TM6.2-Gw/EmGFP_miR_NeuroD表达载体对293T细胞内靶基因的干扰效果。将筛选出的干扰载体pcDNA”6.2-Gw/EmG—FP-miR—NeuroDl与慢病毒载体pLenti6.3/V5-DEST经酶切后连接,构建慢病毒表达载体pLenti6.3-EGFP-Neur0D1-miR。用构建的慢病毒表达载体和包装质粒(PackagingMix)共转染293T细胞,包装病毒,收集病毒原液,超速离心浓缩,并测定滴度。采用PCR法对重组载体进行鉴定,利用绿色荧光蛋白作为报告基因,对病毒滴度和感染效率进行检测。结果成功构建针对靶基因的4个干扰质粒,测序结果表明,4个pcDNA^TM6.2-GW/EmGFP-miR—NeuroD表达载体序列与参考序列一致,real—timePCR检测显示以pcDNA^TM6.2-GW/EmGFP—miR-NeuroDl的沉默效应最佳(P〈0.01)。将重组获得的慢病毒表达载体pLenti6.3-EGFP—NeuroDl-miR转染至293T细胞株,酶切鉴定及PCR结果与病毒载体的预期一致,病毒滴度达1.18×10^8ifu/mL。结论成功构建、筛选了针对人NeuroD基因的RNA干扰慢病毒表达载体。
- 王洋高莉卜海激陈颖朱明华
- 关键词:慢病毒RNA干扰胰腺肿瘤
- 3,4-二氢异喹啉类抗肿瘤化合物及其制备方法与应用
- 本发明公开了一类取代3,4-二氢异喹啉类化合物及其制备方法,以及该类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。该类化合物具有结构通式(Ⅰ):<Image file="DDA00003560351900011.GIF" he="22...
- 朱驹黄晶晶陈颖韩进松郑灿辉周有骏吕加国王重庆周浩田巍孙囡囡
- 文献传递
- HBx蛋白羧基端缺失与肝癌细胞生物学行为的研究
- 目的研究显示人肝癌组织内普遍存在因碳端缺失而截短表达的乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B,virus X protein,HBx),因此构建HBx羧基端分别缺失了10、20、30、40以及中间37个氨基酸的5个突...
- 刘晓红朱明华曹晓哲郑建明陈颖
- 关键词:HBX基因重组
- 文献传递
- 513例胰腺癌神经浸润的回顾性研究
- 通过观察1995年至2005年间513例胰腺癌神经浸润的特征及其与其他临床病理学参数之间的联系.光镜观察常规苏木素-伊红切片纪录结果并进行统计学分析。513例胰腺癌中包括导管腺癌491例(高分化腺癌37例,中分化腺癌34...
- 陈颖史敏于观贞朱明华
- 关键词:胰腺癌神经浸润慢性胰腺炎
- 文献传递
- 转化生长因子-β1的Smad4非依赖性途径对胰腺癌细胞生长的影响被引量:2
- 2005年
- 目的探讨转化生长因子(TGF)-β1过表达对Smad4纯合性缺失的胰腺癌细胞生长的影响。方法将含TGF-β1的真核表达载体转染到人胰腺癌细胞BxPC3中,通过流式细胞仪、生长曲线以及细胞迁移试验观察其对BxPC3生物学行为的影响。用Western印迹法检测TGF-β1对BxPC3细胞中p21WAF/CLIP1表达的影响。结果转染TGF-β1基因的BxPC3细胞的形态发生明显改变,其生长速度自第4天开始较转染空载体pcDNA3的阴性对照组减慢。发现BxPC3细胞组S期细胞(27.53±0.02)%与pcDNA3组(26.32±0.01)%的比例均高于TGF-β1组(17.01±0.03)%,P<0.01,表明TGF-β1阻止细胞进入S期。细胞迁移试验表明转染的细胞运动能力明显增加。Western印迹法检测表明p21WAF/CLIP1的表达也相应增高。结论TGF-β1的Smad4非依赖性途径通过增强p21WAF/CLIP1的表达使细胞阻滞于G-G期,从而抑制细胞生长,并且该通路能诱导上皮细胞向间叶细胞转变。
- 陈颖朱明华于观贞李芳梅刘晓红
- 关键词:转化生长因子-Β1SMAD4非依赖性胰腺癌细胞生长癌细胞蛋白质P21
- ANXA1在胃癌和淋巴转移灶中的表达及其临床意义被引量:3
- 2012年
- 目的通过检测ANXA1在胃癌及其淋巴转移灶中的表达,探讨ANXA1表达与胃癌患者临床病理特征、mTOR通路激活状态及预后的关系。方法在含有121例胃癌及淋巴转移灶的组织芯片上,利用免疫组化检测ANXA1、p-mTOR在淋巴转移灶中的表达,分析ANXA1与临床病理特征、p-mTOR及预后关系。结果免疫组化显示,ANXA1在胃癌淋巴转移灶中的阳性表达率为14.9%(18/121),低于胃癌原发部位的35.5%(43/121);而p-mTOR在胃癌淋巴转移灶中的阳性表达率为61.2%(74/121),高于胃癌原发部位的51.2%(62/121)。胃癌淋巴转移灶中ANXA1的表达与原发肿瘤部位、胃壁侵犯、p-mTOR以及组织学分化高度相关(P<0.05)。生存分析显示,ANXA1是判断胃癌患者预后的独立指标。结论ANXA1缺失表达在胃癌淋巴结转移过程中可能起着重要作用,ANXA1与胃癌患者的预后密切相关。
- 周洲于观贞陈颖潘军王杰军
- 关键词:胃癌淋巴转移免疫组化
- 骨化性肌肉内血管瘤1例报道
- 2015年
- 原发性肌肉内血管瘤是少见的良性血管肿瘤,仅占良性血管瘤的0.8~4.4%。好发于儿童和年轻人,其中毛细血管瘤型最常见,其次为海绵状血管瘤。伴有广泛骨化的肌肉内血管瘤非常少见,目前只有散发报道,其具有比较独特的影像学和组织学形态。本文报道1例骨化性肌肉内血管瘤,并文献复习。
- 陈颖黄飞林万和
- 关键词:肌肉内血管瘤骨化病理诊断
- 优福定节拍性化疗抗MKN-45荷瘤裸鼠血管生成作用的研究被引量:5
- 2008年
- 目的:研究持续小剂量优福定(UFT)对MKN-45荷瘤裸鼠的疗效及其机制。方法:建立荷瘤动物模型,用UFT和环磷酰胺(CTX)对荷瘤动物模型进行治疗,观察其疗效及毒副作用;流式细胞术检测外周血内皮祖细胞(CEP);免疫组化检测微血管密度(MVD)。结果:持续小剂量UFT明显抑制肿瘤的生长,CEP和MVD含量下降显著,而持续小剂量CTX虽然抑瘤率较持续小剂量UFT高,但却未抑制CEP和MVD含量。结论:持续小剂量UFT可通过抑制血管生成对MKN-45胃癌细胞荷瘤裸鼠产生抗瘤效应。
- 吴欣王喜于观贞陈颖姚明闫明霞王杰军
- 关键词:裸鼠内皮祖细胞微血管密度
- ErbB2/Grb2/mTOR通路在胃癌发生发展中的作用被引量:11
- 2008年
- 目的:检测ErbB2/neu、Grb2和mTOR胃癌中的表达并探讨ErbB2/Grb2/mTOR通路在胃癌发生发展中的作用。方法:构建含有1072例胃癌的组织芯片,利用免疫组化检测ErbB2/neu、Grb2和mTOR在胃癌中的表达。结果:ErbB2/neu、Grb2和mTOR在胃癌中的表达率分别为30.2%、47.5%和50.8%。ErbB2/neu和Grb2的过度表达与年龄(>60岁)、肿瘤部位、肿瘤类型和高分化相关(P<0.01);mTOR的过度表达与肿瘤部位、肿瘤类型、高分化、T分期和TNM分期相关(P<0.05)。Spearman相关性检验显示,3个蛋白两两之间存在显著相关(P<0.001)。单因素生存分析表明,Grb2和mTOR与预后有关(P=0.0067,P=0.0001);而在Cox回归多因素分析中,mTOR与预后有关(P=0.046)。结论:ErbB2/Grb2/mTOR通路在胃癌的发生发展中起到极其重要的作用,mTOR还可能作为胃癌患者预后的独立指标。3个蛋白可以作为胃癌治疗的靶点,继而为胃癌的治疗开拓新的思路。
- 于观贞陈颖潘军王喜王杰军
- 关键词:胃癌ERBB2GRB2MTOR
- ANXA1和EGFR在胃癌中的表达及与预后关系的研究被引量:10
- 2008年
- 目的:检测ANXA1和EGFR在胃癌中的表达,并探讨其变化与胃癌预后的关系。方法:在含有1072例胃癌的组织芯片上,利用免疫组化检测ANXA1和EGFR在胃癌中的表达,分析其与胃癌的关系。结果:免疫组化显示,ANXA1在胃癌中的表达率为35.5%(381/1072),而癌旁上皮中均有表达。在胃癌中,ANXA1的表达下降与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、疾病分期以及组织学分化高度相关(P<0.01)。EGFR在胃癌中的表达率为22.6%(242/1072),EGFR的过度表达与肿瘤部位、高分化和T分期相关(P<0.05)。生存分析表明ANXA1和EGFR是判断胃癌患者预后的独立指标。结论:ANXA1缺失表达和EGFR的过度表达在胃癌的发生发展过程中可能起着重要作用,ANXA1和EGFR是与胃癌患者的预后密切相关的指标。
- 于观贞陈颖潘军王喜王杰军
- 关键词:胃癌EGFR