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文献类型

  • 5篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 5篇医药卫生
  • 1篇生物学
  • 1篇农业科学

主题

  • 5篇毒素
  • 5篇志贺毒素
  • 3篇亚单位
  • 3篇克隆
  • 3篇-B
  • 2篇基因
  • 2篇基因克隆
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  • 1篇肉毒梭菌
  • 1篇梭菌
  • 1篇轻链
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  • 1篇抗体制备
  • 1篇克隆与序列分...
  • 1篇克隆载体
  • 1篇还原酶

机构

  • 6篇军事医学科学...
  • 6篇解放军第20...
  • 5篇解放军军需大...
  • 3篇塔里木农垦大...

作者

  • 6篇王景林
  • 6篇康琳
  • 6篇赵金红
  • 5篇高丰
  • 5篇吴东林
  • 5篇喻华英
  • 1篇贾宏丽

传媒

  • 2篇微生物学杂志
  • 1篇生物技术通讯
  • 1篇生命科学研究
  • 1篇中国人兽共患...
  • 1篇中国畜牧兽医...

年份

  • 1篇2006
  • 3篇2004
  • 2篇2003
6 条 记 录,以下是 1-6
排序方式:
志贺毒素A/B(ShT-A/B)亚单位基因的克隆与序列分析被引量:3
2003年
应用PCR技术从Ⅰ型痢疾志贺茵(Shigella dysenteriae type Ⅰ)中,分别扩增出约895bp和225bp的成熟ShT-A,B基因片段,直接克隆至pGEM-T载体中,经蓝白斑筛选、PCR和双酶切鉴定正确后,命名为pGEM-ShTA_2和pGEM-ShTB_3。测序结果表明,插入的片段是ShT-A,ShT-B,且与GenBank中ShT-A,B核酸序列完全一致,从而为重组ShT-A,B的表达研究奠定了基础。
喻华英王景林高丰康琳吴东林赵金红
关键词:基因克隆
A型肉毒毒素轻链基因的克隆及其结构分析被引量:2
2003年
以文献报道的A型肉毒毒素基因全序列为标准,设计并合成一对引物,自肉毒梭菌基因组中扩增出肉毒毒素轻链基因片段,并将扩增产物与pGEM-T载体在体外连接,构建测序重组质粒,进行测序和基因结构分析。PCR扩增获得了产物为1364bp的DNA片段,测序结果与DNA数据库对照检索分析证明,此基因片段与GenBank中的A型肉毒毒素LC基因的一致性达99.9%以上,可以认为克隆的基因为A型肉毒毒素LC基因。
贾宏丽赵金红王景林康琳
关键词:A型肉毒毒素轻链基因克隆基因结构毒性肉毒梭菌
志贺毒素B(ShT-B)亚单位在两种表达载体中表达形式分析
2004年
用KpnⅠ和HindⅢ双酶切pGEMTB3克隆质粒,得到大小约为225bp的ShTB基因片段,分别将其插入到经双酶切的pQE40和pQE30表达载体中,构建了2个ShTB的重组表达质粒pQE40B3和pQE30B2,分别转化到E.coliM15,经IPTG诱导后,重组质粒目的蛋白均得到表达。其中,pQE40B3表达蛋白约占菌体总蛋白的37%,主要为包涵体形式。pQE30B2表达蛋白约占菌体总蛋白的16%,主要为可溶性形式,约9.2%。为重组抗原的制备提供了必要的物质基础。
喻华英王景林高丰康琳吴东林赵金红
志贺毒素B(ShT-B)亚单位在两种表达载体中表达形式的分析
2004年
用KpnⅠ和HindⅢ双酶切pGEM -TB3 克隆质粒 ,得到为大小约为 2 2 5bp的ShT -B基因片段 ,分别将其插入到经双酶切的 pQE4 0和 pQE30表达载体中 ,构建了两个ShT -B的重组表达质粒pQE4 0 -B3 和 pQE30 -B2 ,分别转化到E .coliM15。经IPTG诱导后 ,重组质粒目的蛋白均得到表达。其中 ,pQE4 0 -B3 和pQE30 -B2 ,分别化到E .coliM 15 ,经IPTG诱导后 ,重组质粒目的蛋白均得到表达。其中 ,pQE4 0 -B3 表达蛋白约占菌体总蛋白的 37% ,主要为包涵体形式。pQE30 -B2 表达蛋白约占菌体总蛋白的 16 % ,主要为可溶性形式 ,约 9 2 %。为重组抗原的制备提供了必要的物质基础。
喻华英王景林高丰康琳吴东林赵金红
志贺毒素B(ShT-B)在E.coli中的融合表达及特异性抗体制备被引量:3
2004年
用KpnⅠ、Hind Ⅲ酶切克隆载体pGEM-ShTB3,然后亚克隆入带有二氢叶酸还原酶(DHFR)的融合表达栽体pQE40,构建重组质粒pQE40-ShTB,转化到E。coli M15中,经IPTG诱导,实现了ShTB-DHFR融合蛋白的高表达,表达量约占菌体总蛋白的21.9%,为包涵体形式,在变性条件下,包涵体蛋白经螯合镍离子的次氨基三乙酸(Ni-NTA)亲和柱一步纯化,得到了纯度为90.5%的重组ShT-B.以纯化的shTB-DHFR融合蛋白免疫昆明鼠,并结合腹腔注射S180细胞,成功制备了抗ShTB腹水多克隆抗体,效价达1:1×10^6间接ELISA和Westem印迹结果表明,抗ShT-B多抗与重组蛋白和天然ShT均有特异性结合,本试验结果为毒素检测方法的研究奠定了基础。
喻华英王景林高丰康琳赵金红吴东林
关键词:志贺菌抗体制备二氢叶酸还原酶克隆载体
志贺毒素B(ShT-B)亚单位在两种表达载体中表达形式的分析
用Kpn Ⅰ和HindⅢ双酶切pGEM-TB3克隆质粒,得到为大小约为225bp的ShT-B基因片段,分别将其插入到经双酶切的pQE40和pQE30表达载体中,构建了两个ShT-B的重组表达质粒pQE40-B3和pQE3...
喻华英王景林高丰康琳吴东林赵金红
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