翟春媛
- 作品数:9 被引量:17H指数:3
- 供职机构:东北农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金:哈尔滨市科技创新人才研究专项资金黑龙江省自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 猪TLR4基因的变异位点分析被引量:6
- 2011年
- Toll样受体4(TLR4)主要识别革兰氏阴性菌表面的脂多糖,其基因变异可能改变宿主对脂多糖(LPS)的免疫反应。研究利用克隆、测序的方法在TLR4基因的外显子3寻找变异位点,并利用PCR-SSCP方法对寻找到的部分错义突变进行群体遗传学分析,确定不同基因型在猪种间的分布规律。结果表明:共寻找到11个点突变,其中8个是错义突变,分别导致蛋白质多肽链141、168、204、321、343、516、535、567位氨基酸发生了L/Q、P/L、L/H、R/H、Q/K、F/S、L/F、L/P替代;对其中3个错义突变位点(611 bp、962 bp、1 027 bp)的群体遗传学分析表明,在各多态位点,基因型的分布在野猪、北京黑猪、民猪、杜洛克、长白猪和大白猪6个中外猪种间存在极显著差异(P<0.01)。
- 翟春媛杨秀芹李海涛李金铃刘娣
- 关键词:PCR-SSCP
- 猪TLR4基因2个突变位点的PCR-SSCP分析被引量:3
- 2012年
- 为了研究Toll样受体4(TLR4)的多态性与动物对相关病原的免疫力的相关性,试验选择北京黑猪、长白猪、野猪、杜洛克猪、大白猪、民猪6个中外猪种,利用PCR-SSCP和克隆测序方法对TLR4基因第3外显子1 824位点的G/A和3'UTR 208位点的T/C多态进行群体遗传学分析。结果表明:1 824位点北京黑猪与野猪、民猪、杜洛克猪、长白猪和大白猪的基因型分布存在显著差异(P<0.05);3'UTR 208位点基因型分布在猪种间存在极显著差异(P<0.01)。
- 陈月婵翟春媛刘娣杨秀芹
- 猪呼吸道上皮细胞的体外原代培养研究
- 2010年
- 为探索猪呼吸道上皮细胞体外的原代培养,对胶原酶Ⅳ+胰酶消化法、胰酶消化法、胶原酶Ⅳ和胰酶消化结合组织块培养法以及组织块培养法等4种分离细胞的方法进行了比较,同时比较了不同浓度胎牛血清的培养基所培养细胞的纯度及成活率,采用差速贴壁法纯化细胞并对所得的上皮细胞进行冻存复苏研究。结果表明:组织块培养法培养获得的细胞数量和纯度极显著高于胰酶消化法(P<0.01),胶原酶Ⅳ+胰酶消化法获得的细胞成活率显著高于胰酶消化法;含有5%血清的培养基培养的细胞成活率及纯度均高于用10%血清培养(P<0.01),冻存1个月后的细胞复苏率为85%。
- 翟春媛杨秀芹李海涛刘娣
- 关键词:呼吸道上皮细胞细胞培养冷冻保存
- 猪TLR3基因A1116T点突变功能初步分析被引量:2
- 2011年
- 为了确定猪TLR3基因A1116T错义突变的生物学效应,研究其与猪疾病抗性/易感性的关系,本研究采用重叠延伸PCR和定点突变技术构建不同等位基因的真核表达载体,采用双荧光素酶检测分析系统及Real-timePCR方法在体外培养的细胞中研究不同等位基因在信号转导中的作用。成功地构建了野生型和突变型TLR3的真核表达载体,双荧光素酶检测分析表明突变型活化转录因子NF-κB、激活ISRE的能力都减弱;Real-time PCR分析表明突变型诱导转录IL-6的能力下降。结果表明该点突变影响猪TLR3的信号转导能力。
- 邢明伟翟春媛李海涛杨秀芹
- 关键词:突变信号转导
- 猪TLR3基因变异位点分析被引量:3
- 2011年
- 为了研究TLR3基因突变对介导机体天然免疫和获得性免疫能力的影响及各等位基因在猪群体间的分布规律,试验采用PCR产物克隆测序的方法在TLR3基因外显子3上寻找多态位点,并利用PCR-SSCP和PCR-RFLP方法对选定的突变位点进行群体遗传学分析。结果表明:在所检测出的8个SNPs中,有A1116T和C1647T 2个多态位点,各基因型在野猪、民猪、杜洛克、长白猪和大白猪等猪种中的分布存在着极显著差异(P<0.01)。
- 李海涛翟春媛刘娣杨秀芹
- 关键词:SNPSPCR-RFLPPCR-SSCP
- 猪TLR4基因的突变与功能分析
- TLR4/(Toll-like receptor 4/)是九十年代末发现的,是TLRs受体家族中的一员,属于一型跨膜蛋白结构,分为胞外区、跨膜区和胞内区,胞外区是富含亮氨酸重复序列/(leucine-rich repea...
- 翟春媛
- 关键词:PCR-SSCPLPSNF-ΚBIL-6
- 文献传递
- 猪TLR4基因可变剪接体的鉴定被引量:6
- 2011年
- 为合理、有效地利用民猪资源进行抗病育种,本研究利用重叠延伸RT-PCR结合巢式PCR法扩增民猪TLR4基因,寻找可变剪接体;利用竞争性RT-PCR方法研究各可变剪接体的组织表达情况。获得了猪TLR4基因3个可变剪接体(其中2个是未见报道的),并且鉴定出一类特殊的剪接模式——外显子内部的部分片段被单独剪除,该类型在动物中尚属首次发现;组织表达分析表明3个可变剪接体普遍表达。TLR4基因存在着复杂的剪接机制,也暗示着其功能的复杂性。
- 杨秀芹翟春媛李海涛刘娣
- 关键词:民猪可变剪接
- 野猪Toll样受体基因的结构和功能鉴定被引量:1
- 2011年
- Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是介导天然免疫和获得性免疫的病原模式识别受体(Pattern recognition receptor,PRRs),能识别表达在病原微生物上高度保守的病原相关分子模式(Pathogen associated molecular patterns,PAMPs),并通过一定的信号转导途径引起核内相关基因的表达,启动和调节机体的免疫反应。
- 杨秀芹李海涛徐扬翟春媛马建章刘娣
- 关键词:野猪克隆
- 猪TLR4基因的变异位点分析
- R4主要识别革兰氏阴性菌表面的脂多糖(LPS),当细菌入侵宿主细胞后,其表面的脂多糖激活TLR4介导的信号转导通路,诱导多种细胞因子的表达,激活免疫反应,清除病原体。TLR4基因突变可影响其功能,因此,TLR4基因的多态...
- 翟春媛杨秀芹李海涛李金铃刘娣
- 关键词:基因遗传变异基因多态性细胞因子信号转导