秦英
- 作品数：31 被引量：70H指数：4
- 供职机构：中国医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省科学技术计划项目“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 潮霉素抗性转基因BDF1小鼠模型的建立被引量：1
- 2007年
- 目的建立具有潮霉素(hygromycin)抗性转基因BDF1小鼠,用于制备携有hygromycin抗性筛选标志ES阳性细胞克隆的饲养层。方法通过显微注射的方法,将含有潮霉素B磷酸转移酶基因片段(5.1kb)导入BDF1受精卵雄原核中,共注射169枚受精卵,然后将129枚受精卵细胞植入同期受孕的受体母鼠输卵管内。结果共产生37只转基因小鼠,经PCR和Southern检测获得9只阳性小鼠,对一只子代鼠进行RT-PCR检测证明hyg基因已经在肾、肌肉、脾内表达。结论成功的建立具有潮霉素抗性的BDF1转基因鼠,该模型动物可以为基因敲除研究提供良好的基础条件。
- 张梅英董婉维汪瑛杨葳李兆阳周生来于洋王惟秦英郑志红王禄增
- 关键词：潮霉素饲养层转基因
- 清洁级C57BL/6剖腹产和正常产仔鼠成活率和生长的比较观察被引量：4
- 1999年
- 本文对半屏障系统下清洁级Ｃ５６ＢＬ／６小鼠进行剖腹取胎，用触诊法确定妊娠鼠的临产期，剖腹产仔鼠成活率为８９５２％，部腹产和正常产仔鼠出生体重差异不显著（Ｐ＞００５）。用ＩＣＲ母鼠代乳与正常产的仔鼠１～４周龄同期体重比较差异显著或极显著（Ｐ＜００５或Ｐ＜００１），４周龄头长、体长比较无显著差异（Ｐ＞００５）。
- 张梅英秦英王太一
- 关键词：仔鼠剖腹产C57BL/6诊法
- 具G418抗性NIH3T3细胞饲养层的制备(英文)
- 2006年
- 背景:建立具有抗药(新霉素或潮霉素)性的饲养层细胞是转染外源目的基因胚胎干细胞阳性克隆的筛选必备条件。建成的具有抗药性的NIH3T3细胞系可用于胚胎干细胞其他目的基因的筛选。目的:建立具有G418抗性的NIH3T3细胞系,用于转染pTet-on基因的胚胎干细胞阳性细胞克隆筛选的饲养层。设计:细胞培养观察及DNA检测。单位:中国医科大学实验动物部。材料:NIH3T3细胞由中国医科大学细胞生物教研室惠赠,pWL/neo质粒为美国哈佛大学医学院金壮教授惠赠。G418、白血病抑制因子(胚胎干细胞GRO106U/mL)、DMEM为GIBCOBRL产品,丝裂霉素-C、DIG标记及检测试剂盒为Roche产品,脂质体为Invitrogen产品,均购自沈阳联星生物技术有限公司。方法:①通过脂质体转染的方法,将含有neo基因的质粒pWL/neo导入NIH3T3细胞中。②将细胞传至25mL培养瓶中,加入梯度浓度的G418继续培养,通过观察细胞生长及死亡情况测定G418对NIH3T3细胞最小致死量。③将转染的细胞进行传代,挑取单个细胞的克隆至24孔培养板继续进行筛选扩增,选用正常的NIH3T3细胞加入相同剂量的G418的选择性培养基作为筛选的阴性对照。④采用较低的细胞密度铺板,加入含最小致死量G418的DMEM培养基进行再次筛选;同时选用正常的NIH3T3细胞为对照,使用含有最小致死量G418及未加G418的DMEM培养基进行培养,采用光学显微镜对G418抗性NIH3T3细胞进行观察。⑤选用具有G418抗性的NIH3T3细胞和小鼠胚胎成纤维细胞分别作为饲养层细胞进行传代,采用光学显微镜对培养后胚胎干细胞-D3细胞进行观察,并制备细胞DNA,对其进行PCR和southernblot鉴定。主要观察指标:①G418对NIH3T3细胞最小致死量的测定结果。②G418抗性NIH3T3细胞的筛选结果。③G418抗性NIH3T3细胞的生长观察结果。④胚胎干细胞-D3细胞生长观察结果及G418抗性NIH3T3细胞的鉴定。结果:①G418对NIH3
- 张梅英李华董婉维杨葳汪瑛秦英王禄增王太一
- 关键词：转染饲养层胚胎干细胞抗药性
- 5-脂氧化酶转基因小鼠模型的制备
- 目的建立5-脂氧化酶转基因小鼠,用于动脉粥样硬化的发病机制的研究。方法通过显微注射的方法,将5-脂氧化酶基因片段（6.8kb）导入BDF1受精卵雄原核中,共注射166枚受精卵,然后将90枚受精卵细胞植入同期受孕的受体母鼠...
- 张梅英杨葳李兆阳周生来于洋王惟秦英郑志红王禄增
- 关键词：潮霉素饲养层转基因
- 文献传递
- 非小细胞肺癌患者血小板参数变化的临床研究被引量：2
- 2012年
- 目的探讨血小板参数检测在非小细胞肺癌患者中的临床意义。方法应用全自动血细胞分析仪检测经确诊的非小细胞肺癌患者的血小板参数。结果肺癌组血小板参数显著高于健康对照组(P<0.01);TNM分期越晚,外周血血小板计数越高(P<0.01);肺癌组血小板参数增高例数显著高于健康对照组(P<0.01)。结论血小板参数增高与肺癌的关系密切,测定血小板参数可作为肿瘤发生、发展及预后判断的参考指标。
- 曲卓慧王耀辉秦英
- 关键词：肺肿瘤血小板
- 抗G418小鼠胚胎干细胞饲养层的制备被引量：8
- 2005年
- 目的:建立具有G418抗性的 3T3细胞系,用于转染pTet on基因的ES阳性细胞克隆筛选的饲养层。方法: 通过脂质体转染的方法,将含有neo基因的质粒pWL/neo导入 3T3细胞中,利用G418的药物选择特性,对转染细胞进行压力筛选,并对其进行PCR鉴定。结果:经 500μg/ml的G418压力筛选后,获得了抗G418细胞克隆。抗性 3T3细胞的形态和生长速度与正常 3T3细胞没有差异,用特异性核苷酸引物检测抗性细胞基因组DNA,可以扩增出对应的核苷酸片段,Southernblot鉴定结果表明neo基因片段已整合入G418抗性 3T3细胞中。结论:成功地培育了G418抗性的 3T3细胞,为进行pTet on基因转染ES细胞的阳性细胞克隆筛选奠定了基础。
- 张梅英李华董婉维杨葳汪瑛秦英王禄增王太一
- 关键词：3T3细胞饲养层胚胎干细胞
- 抗菌肽转基因小鼠模型的建立被引量：7
- 2005年
- 目的:制备抗菌肽转基因小鼠模型。方法:显微注射pcDNA3. 1 -PCMG到FVB小鼠受精卵雄原核中,注射存活胚胎移植到假孕母鼠输卵管内发育产生子代小鼠。结果:在生出的 119只小鼠中经PCR和Southernblot检测到 7只阳性。结论:通过显微注射法使外源基因pcDNA3. 1 -PCMG在FVB小鼠基因组中得到整合,为抗菌肽抗菌谱的研究,抗病毒、抗肿瘤机制的研究提供有价值的抗病动物模型。
- 李华董婉维孙强张梅英汪瑛杨葳秦英史晓萍王禄增
- 关键词：抗菌肽显微注射法转基因小鼠
- 替吉奥联合奥沙利铂对比mFOLFOX6方案一线治疗进展期胃癌的临床观察被引量：3
- 2014年
- 目的观察评价替吉奥联合奥沙利铂一线治疗进展期胃癌的有效性和安全性。方法 72例组织病理学确诊的进展期胃癌患者随机分为两组,试验组36例患者给予替吉奥联合奥沙利铂方案,对照组36例患者给予mFOLFOX6方案,两组患者于治疗6周后评价疗效及不良反应。结果试验组和对照组的有效率（RR）分别为55.6%和50.0%,临床获益率（DCR）分别为88.9%和86.1%,两组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。两组主要的不良反应是血液学毒性、胃肠道反应、神经毒性和肝功能损伤,大多数为Ⅰ-Ⅱ度,仅在胃肠道反应方面对照组明显高于试验组,差异有统计学意义（P〈0.05）,其余不良反应两组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论替吉奥联合奥沙利铂方案一线治疗进展期胃癌近期疗效较好,不良反应较轻,尤其胃肠道反应的发生概率大大降低,该方案值得临床上进一步推广研究和应用。
- 曲卓慧王跃辉秦英
- 关键词：5-氟尿嘧啶奥沙利铂进展期胃癌
- 沈阳市小鼠肠道蠕虫感染情况调查
- 1997年
- 为了解沈阳市普通级昆明小鼠寄生虫感染情况，对市内不同区５个单位的小鼠肠道内寄生虫进行了调查。结果发现有短膜壳绦虫（小肠及结肠），隐藏管状线虫（盲肠）及四翼无刺线虫（结肠）。感染率在９５％～１００％，而三种分别的感染率为３０％～７０％、５３％～１００％及４０％～１００％。
- 秦英戴显声张艳华陈玲王太一
- 关键词：小鼠肠道蠕虫感染寄生虫感染绦虫盲肠
- 具潮霉素B抗性的NIH3T3细胞饲养层的制备
- 2005年
- [目的]建立具有潮霉素B(hygromycinB)抗性的3T3细胞系,用于转染目的基因(pTRE2-human-Ins)的ES阳性细胞克隆筛选的饲养层。[方法]通过脂质体转染的方法,将含有潮霉素B磷酸转移酶基因(hyg)的质粒pHyg导入NIH3T3细胞中,利用潮霉素B的药物选择特性,对转染细胞进行压力筛选,并对其进行PCR和southernblot鉴定。[结果]经300ug/ml的潮霉素B压力筛选后,获得了抗性细胞克隆。抗性NIH3T3细胞的形态和生长速度与正常NIH3T3细胞没有差异,特异性核苷酸引物检测抗性细胞基因组DNA,可以扩增出相应的核苷酸片段,Southernblot鉴定结果表明潮霉素基因片段已整合入潮霉素抗性NIH3T3细胞。[结论]本实验通过脂质体介导的方法成功地培育了潮霉素B抗性的NIH3T3细胞,为进行目的基因(pTRE2-human-Ins)转染ES细胞的阳性细胞克隆筛选打下了基础。
- 张梅英李华董婉维杨葳秦英汪瑛周生来于洋王惟王太一王禄增
- 关键词：转染ES细胞
