琚铭
- 作品数：4 被引量：27H指数：3
- 供职机构：南京农业大学农学院作物遗传与种质创新国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划长江学者和创新团队发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 35S启动子甲基化引起棉花转基因沉默(英文)被引量：14
- 2008年
- 用带PBI121质粒的农杆菌LBA4404菌株转化泗棉3号胚性愈伤组织,获得的再生植株进一步对gus和nptⅡ基因进行PCR跟踪检测,共得到97株阳性转基因植株。GUS组织化学检测发现,97株转基因幼苗中有10株GUS检测阴性,嫁接后,只成活一株。利用来源于同一愈伤系的GUS检测阳性植株作为对照,对这一GUS检测阴性的植株进行gus基因沉默机理研究。Southern分析表明,该GUS检测阴性植株与GUS检测阳性植株有相同拷贝数。GUS组织化学检测和RT-PCR分析显示,gus基因在GUS检测阴性植株中没有表达,而nptⅡ基因在这两株转基因棉花中都表达。用限制性内切酶-PCR法分析35S启动子区甲基化发现:GUS检测阴性植株35S启动子区TATA box的HapII/MspI酶切位点发生甲基化,而GUS检测阳性植株该位点没有甲基化。以上研究表明,这株gus沉默的转基因棉花可能是由于其35S启动子区甲基化引起的。
- 王海海吴慎杰李飞飞陈天子蒋彦婕琚铭赵君吕艳辉张天真郭旺珍
- 关键词：甲基化转基因沉默转基因棉花
- 转蚕丝心蛋白基因改良了棉花纤维品质被引量：7
- 2009年
- 利用农杆菌介导法将蚕丝心蛋白基因(fibroin)导入陆地棉品系WC,共获得了9块愈伤组织系的30株再生植株.PCR检测、卡那霉素抗性筛选和GUS组织化学分析均为阳性的有17株.经连续4代的卡那霉素抗性筛选和PCR检测,在T3代获得了6个转化事件的转基因纯系.Southern blot和Northern blot结果表明,fibroin已整合到6个纯合株系基因组,且能稳定遗传和表达.扫描电子显微镜和纤维品质检测结果显示,所有转基因纯合株系棉纤维的转曲数和纤维伸长率比对照明显增加,部分株系比强度提高,说明蚕丝心蛋白基因在棉纤维中特异表达影响了棉纤维的结构和品质,可以获得纤维品质改良的株系,有望在生产上得到应用.
- 李飞飞吴慎杰吕芬妮陈天子琚铭王海海蒋彦婕张洁郭旺珍张天真
- 关键词：陆地棉纤维品质
- 棉纤维相关基因时空表达与纤维品质关联分析及β-1，4-葡糖苷酶基因的转基因功能验证
- 几千个基因在棉纤维发育过程中起作用，相关基因的分离鉴定以及功能研究起步较晚，但进展很快。
本试验从已经报道的纤维发育相关基因中选出10个在棉纤维发育中优势表达的基因，以14个纤维品质具有差异的棉花品种(或品系)...
- 琚铭
- 关键词：棉纤维纤维品质
- 文献传递
- 棉纤维发育相关基因时空表达与纤维品质的关联分析被引量：4
- 2009年
- 以14个纤维品质差异的棉花品种(或品系)为材料,研究10个纤维发育相关基因时空表达变化与纤维品质的关系,为阐明棉纤维发育相关基因与纤维品质形成关系提供理论基础。利用实时荧光定量PCR技术检测10个基因在14个供试品种(或品系)不同纤维发育时期的相对表达量,结果表明,虽然遗传背景完全不同,但它们具有某些共同表达特征。GhExp1、GhCIPK1、GhSus1、GhSusA1和GhPL这5个基因都是在纤维伸长期优势表达;GhACT1、GhRacA和GhRacB是在纤维伸长前期和次生壁加厚期高表达;而GhCelA1和GhcelA3是在纤维伸长后期和次生壁加厚期优势表达。这些基因表达谱与纤维品质关联分析显示,GhRacA在23DPA高表达且表达量与纤维品质显著正相关,其余基因在低表达时其表达量与纤维品质呈显著性相关,而在高表达时其表达量与纤维品质无相关性。GhExp1在20DPA的表达量与纤维比强度和整齐度呈显著负相关,与伸长率呈极显著正相关;GhPL在23DPA的表达量与纤维长度呈显著负相关;GhRacA在5DPA和23DPA的表达量均与伸长率呈极显著正相关;GhRacB在10DPA的表达量与长度和整齐度呈显著负相关;GhCelA1基因在5DPA的表达量与纤维长度呈显著正相关,与马克隆值呈显著负相关,在10DPA的表达量与马克隆值呈显著正相关,与伸长率达到极显著正相关,与比强度呈显著负相关,与长度和整齐度呈极显著负相关;GhCIPK1、GhACT1、GhSus1、GhSusA1和GhCelA3这5个基因在纤维发育各时期的表达量与纤维品质各指标未检测到相关性。
- 琚铭王海棠王立科李飞飞吴慎杰朱华玉张天真郭旺珍
- 关键词：棉花纤维品质荧光实时定量PCR
