李飞飞
- 作品数：8 被引量：73H指数：5
- 供职机构：南京农业大学农学院作物遗传与种质创新国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划长江学者和创新团队发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 转蚕丝心蛋白基因改良了棉花纤维品质被引量：7
- 2009年
- 利用农杆菌介导法将蚕丝心蛋白基因(fibroin)导入陆地棉品系WC,共获得了9块愈伤组织系的30株再生植株.PCR检测、卡那霉素抗性筛选和GUS组织化学分析均为阳性的有17株.经连续4代的卡那霉素抗性筛选和PCR检测,在T3代获得了6个转化事件的转基因纯系.Southern blot和Northern blot结果表明,fibroin已整合到6个纯合株系基因组,且能稳定遗传和表达.扫描电子显微镜和纤维品质检测结果显示,所有转基因纯合株系棉纤维的转曲数和纤维伸长率比对照明显增加,部分株系比强度提高,说明蚕丝心蛋白基因在棉纤维中特异表达影响了棉纤维的结构和品质,可以获得纤维品质改良的株系,有望在生产上得到应用.
- 李飞飞吴慎杰吕芬妮陈天子琚铭王海海蒋彦婕张洁郭旺珍张天真
- 关键词：陆地棉纤维品质
- 果胶盐裂解酶基因（Ghpel）在棉纤维发育中的功能分析
- ＜正＞果胶盐裂解酶（Pectate lyase,PEL）可以专一的降解去酯化果胶（de-esterified pectins）,对细胞壁的松弛、细胞的伸长和果实成熟起重要作用。
- 王海海吴慎杰李飞飞蒋彦婕张庆虎吕芬妮张天真郭旺珍
- 文献传递
- 插皮接技术在棉花再生植株嫁接中的应用被引量：13
- 2006年
- 首次将插皮接技术用于棉花再生植株的嫁接。详细介绍了它的操作过程和实用技巧．该法要求简单，操作方便．成活率高；成活后砧芽枝摘心留叶有利于接穗良好生长发育。在砧木适合的嫁接时期、成活率和生长速率等方面与劈接法作了比较。结果表明：插皮接对砧木和接德粗细比例无严格要求，从而延长了砧木可使用的时期。砧木生长过程中适合劈接的时间有一周左右（3～5片真叶），而在此以后的较长时间内均适合于插吱接（4～5片真叶直到开花期）；由于形成层吻合好。使用的砧木较大，有较发达的根系。在高成活率的前提下相对缩短了再生植株成活的时间。再生植株嫁接前不练苗。在嫁接后采取新的保湿和透气策略，使练苗和嫁接同期进行。有效缩短了再生植株缓苗时间。
- 吴慎杰李飞飞张天真
- 关键词：嫁接棉花再生植株
- 新疆棉花4个主栽品种的体细胞胚胎发生及植株再生被引量：30
- 2008年
- 以新疆4个主栽棉花品种新陆中20、新陆早24、新陆早33和03298为材料,通过不同浓度的激素组合成功地诱导获得了体细胞胚并进一步发育成苗。研究发现,所用的4种激素组合均能有效诱导愈伤组织,其中又以0.02mgL-1或0.10mgL-1KT和0.1mgL-12,4-D组合的诱导效果最佳;两个诱导措施有利于胚性愈伤组织的产生,即沿中柱纵切棉花下胚轴切段,并以纵切面接触培养基;愈伤组织诱导培养基中KNO3用量加倍。挑选黄绿色、灰绿色或浅绿色的质地疏松的愈伤组织继代于无激素且KNO3含量加倍的培养基中可产生胚性愈伤组织,并在高比例KT/2,4-D(0.05mgL-1或0.10mgL-1KT和0.01mgL-12,4-D)促进下发育成胚。借助在培养基上垫滤纸产生干燥作用,并间隔使用强透气效果的棉塞对培养三角瓶进行透气处理,体细胞胚可成熟发育并产生根系发达的正常再生植株。应用此法,4个实验材料在6～8个月内即可获得大量再生苗。
- 陈天子吴慎杰李飞飞郭旺珍张天真
- 关键词：棉花体细胞胚胎植株再生
- 陆地棉农杆菌介导法共转化以及转兔角蛋白和蚕丝心蛋白基因改良纤维品质的研究
- 农杆菌介导的遗传转化效率高，且T-DNA插入相对稳定，易获得目的基因稳定表达和表型正常的植株，一直是生产转基因棉花的主流技术。通过此方法获得的抗虫棉和抗除草剂棉花已在全球得到了广泛应用。抗虫棉除了单价的Bt基因之外，双价...
- 李飞飞
- 关键词：农杆菌介导棉花
- 35S启动子甲基化引起棉花转基因沉默(英文)被引量：13
- 2008年
- 用带PBI121质粒的农杆菌LBA4404菌株转化泗棉3号胚性愈伤组织,获得的再生植株进一步对gus和nptⅡ基因进行PCR跟踪检测,共得到97株阳性转基因植株。GUS组织化学检测发现,97株转基因幼苗中有10株GUS检测阴性,嫁接后,只成活一株。利用来源于同一愈伤系的GUS检测阳性植株作为对照,对这一GUS检测阴性的植株进行gus基因沉默机理研究。Southern分析表明,该GUS检测阴性植株与GUS检测阳性植株有相同拷贝数。GUS组织化学检测和RT-PCR分析显示,gus基因在GUS检测阴性植株中没有表达,而nptⅡ基因在这两株转基因棉花中都表达。用限制性内切酶-PCR法分析35S启动子区甲基化发现:GUS检测阴性植株35S启动子区TATA box的HapII/MspI酶切位点发生甲基化,而GUS检测阳性植株该位点没有甲基化。以上研究表明,这株gus沉默的转基因棉花可能是由于其35S启动子区甲基化引起的。
- 王海海吴慎杰李飞飞陈天子蒋彦婕琚铭赵君吕艳辉张天真郭旺珍
- 关键词：甲基化转基因沉默转基因棉花
- 棉纤维发育相关基因时空表达与纤维品质的关联分析被引量：5
- 2009年
- 以14个纤维品质差异的棉花品种(或品系)为材料,研究10个纤维发育相关基因时空表达变化与纤维品质的关系,为阐明棉纤维发育相关基因与纤维品质形成关系提供理论基础。利用实时荧光定量PCR技术检测10个基因在14个供试品种(或品系)不同纤维发育时期的相对表达量,结果表明,虽然遗传背景完全不同,但它们具有某些共同表达特征。GhExp1、GhCIPK1、GhSus1、GhSusA1和GhPL这5个基因都是在纤维伸长期优势表达;GhACT1、GhRacA和GhRacB是在纤维伸长前期和次生壁加厚期高表达;而GhCelA1和GhcelA3是在纤维伸长后期和次生壁加厚期优势表达。这些基因表达谱与纤维品质关联分析显示,GhRacA在23DPA高表达且表达量与纤维品质显著正相关,其余基因在低表达时其表达量与纤维品质呈显著性相关,而在高表达时其表达量与纤维品质无相关性。GhExp1在20DPA的表达量与纤维比强度和整齐度呈显著负相关,与伸长率呈极显著正相关;GhPL在23DPA的表达量与纤维长度呈显著负相关;GhRacA在5DPA和23DPA的表达量均与伸长率呈极显著正相关;GhRacB在10DPA的表达量与长度和整齐度呈显著负相关;GhCelA1基因在5DPA的表达量与纤维长度呈显著正相关,与马克隆值呈显著负相关,在10DPA的表达量与马克隆值呈显著正相关,与伸长率达到极显著正相关,与比强度呈显著负相关,与长度和整齐度呈极显著负相关;GhCIPK1、GhACT1、GhSus1、GhSusA1和GhCelA3这5个基因在纤维发育各时期的表达量与纤维品质各指标未检测到相关性。
- 琚铭王海棠王立科李飞飞吴慎杰朱华玉张天真郭旺珍
- 关键词：棉花纤维品质荧光实时定量PCR
- 利用农杆菌介导法转化泗棉3号的研究被引量：12
- 2007年
- 泗棉3号农艺性状优良,是20世纪90年代长江流域棉区的主栽品种,利用基因工程导入外源基因进行直接改良,可以迅速获得新的品种或育种材料。以陆地棉泗棉3号的下胚轴为外植体,建立了高效的转化体系,得到了大量的转基因植株。泗棉3号的出愈率和分化率显著高于模式品种Coker312,同时它出现分化中心的主要形态不同于Coker312,其胚性愈伤组织主要来源于两类初生愈伤组织。对泗棉3号的胚性愈伤组织进行GUS检测,以及对再生植株叶片进行PCR检测后,阳性植株嫁接于温室。在温室用2063.98μmolL-1的卡那霉素点涂叶片检测nptII基因的表达和取叶片进行gus基因的组织化学检测,同时通过Southernblot分析检测,证明目的基因成功地整合到泗棉3号基因组中。
- 吴慎杰李飞飞陈天子张洁郭旺珍张天真
- 关键词：泗棉3号
