公共文化服务平台

共 4 条记录，以下是 1-4

全选清除导出

排序方式：

血管内皮钙黏附素下调对食管鳞癌细胞血管生成拟态、增殖和凋亡的影响被引量：1: 2012年; 背景:血管内皮钙黏附素(VE-cad)作为血管生成拟态的重要调控分子在多种高侵袭性肿瘤中均存在表达,参与肿瘤的发生、发展过程。前期研究发现食管鳞癌细胞中亦存在VE-cad表达。目的:探讨微小RNA(miRNA)干扰技术下调VE-cad对食管鳞癌细胞血管生成拟态形成、细胞增殖和凋亡的影响及其可能机制。方法:将已成功构建的VE-cad miRNA干扰质粒稳定转染Eca109、TE13细胞,同时设置阴性对照组(转染空质粒)和空白对照组(未转染)。荧光显微镜观察单克隆转染效率,三维培养观察细胞管腔样结构形成的能力,RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测VE-cad、EphA2、LN5γ2 mRNA和蛋白表达,MTT法和流式细胞术分别检测细胞增殖和凋亡。结果:荧光显微镜显示Eca109、TE13细胞稳定转染效率均达90%以上。与阴性对照组和空白对照组相比,干扰组细胞管腔样结构数目明显减少(P<0.01),VE-cad、EphA2、LN5γ2 mRNA和蛋白表达明显受抑(P<0.01),细胞增殖能力明显下降(P<0.05),凋亡率明显增高(P<0.05)。结论:miRNA干扰技术能有效抑制食管鳞癌细胞Eca109、TE13的VE-cad表达。VE-cad通过下调EphA2和LN5γ2表达抑制血管生成拟态的体外形成,并影响细胞增殖和凋亡。VE-cad可能成为食管鳞癌分子靶向治疗的新靶点。; 王璐施瑞华王频丁宗励朱宏凌亭生华杰冯亚东; 关键词：食管肿瘤 RNA干扰血管生成拟态细胞增殖

HIF-1α、EphA2表达对食管鳞癌细胞体外三维培养的影响被引量：1: 2011年; 目的:探讨肿瘤细胞缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、上皮细胞激酶(EphA2)对食管鳞癌血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)的影响及两者之间的关系。方法:HIF-1α、EphA2干扰质粒分别转染食管癌Eca109细胞和TE13细胞;RT-PCR、Western blot分别检测转染细胞中HIF-1α、EphA2的抑制效率;体外三维培养模拟血管生成拟态模型观察HIF-1α、EphA2抑制后细胞管状结构数量变化。结果:HIF-1α表达抑制伴随有EphA2表达下调,而EphA2表达抑制对HIF-1α表达无明显影响。HIF-1α、EphA2 miRNA干扰质粒能有效抑制Eca109和TE13中HIF-1α、EphA2的mRNA表达,无论HIF-1α或EphA2表达抑制,均能导致三维培养中管状结构数量下降。但HIF-1α抑制对管状结构的影响要强于EphA2。结论:HIF-1α、EphA2与食管癌血管生成拟态密切相关。EphA2表达调控可能是HIF-1α参与肿瘤细胞VM的形成机制之一,此外还可能存在其他调控途径。; 王频王璐丁宗励曾楷峰金海林朱宏施瑞华; 关键词：食管鳞癌血管生成拟态 RNA干扰

EphA2在缺氧条件下的表达及其对食管癌细胞体外三维培养的影响被引量：1: 2011年; 目的:探讨在正常氧分压和缺氧条件下,食管癌细胞中上皮细胞激酶A2(EphA2)表达变化及其对体外三维培养的影响.方法:正常氧分压及缺氧条件下培养食管癌Eca109及TE13细胞,RT-PCR及Western blot分别监测细胞中EphA2表达的变化;EphA2m i R NA干扰质粒转染E c a109和T E13细胞后,采用Matrigel体外三维培养观察正常氧分压和缺氧条件下,Eca109及TE13细胞在抑制EphA2表达前后管腔形成数量的变化.结果:缺氧条件下Eca109和TE13细胞中EphA2表达明显增加(P<0.05).Matrigel体外培养中,缺氧条件下其管腔形成数量明显高于正常氧分压下(P<0.05).miRNA有效抑制EphA2表达后,在正常氧分压和缺氧条件下,管腔数量明显下降,但常氧条件下数量减少更为明显(P<0.01).结论:缺氧环境能诱导肿瘤细胞EphA2高表达,并导致体外三维培养模型中管腔数量增加,抑制EphA2表达能够阻断此现象的发生,提示EphA2在缺氧条件下血管生成拟态形成过程中发挥重要作用.; 王频王璐丁宗励曾楷峰金海林朱宏施瑞华; 关键词：食管鳞癌血管生成拟态

HIF-1α沉默对食管鳞癌血管生成拟态相关基因影响的体内研究被引量：2: 2011年; 目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因沉默对人食管鳞癌细胞体内血管生成拟态相关基因表达的影响。方法:将食管鳞癌Eca109细胞株分为空白对照组(未转染组)、阴性对照组(转染空质粒组)和实验组(稳定转染重组质粒pGCsi-shHIF-1α组),接种裸鼠,观测裸鼠皮下移植瘤生长情况;HE染色观察各组肿瘤的异型性及坏死情况;免疫组化和Western blot法检测HIF-1α与上皮细胞激酶(EPHA2)、血管上皮钙黏附素(VE-cadherin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在肿瘤组织中的蛋白表达;RT-PCR检测移植瘤组织中HIF-1α与EPHA2、VE-cadherin、MMP-2的mRNA表达。结果:实验组出瘤时间延迟,生长速度减慢,移植瘤体积及重量明显减少(P<0.05);HE染色示肿瘤异型性减少,坏死显著增多;免疫组化及Western blot发现实验组HIF-1α蛋白表达完全沉默,EPHA2、VE-cadherin表达明显减少(P<0.05);RT-PCR提示实验组中HIF-1α及EPHA2、VE-cadherin、MMP2的mRNA含量均有不同程度减少,其中EPHA2、VE-cadherin减少明显(P<0.05)。结论:HIF-1α沉默能显著抑制食管鳞癌裸鼠移植瘤的生长,并能有效抑制移植瘤血管生成拟态相关基因EPHA2和VE-cadherin的表达,HIF-1α有可能通过以上2个位点参与食管鳞癌血管生成拟态的调控。; 王璐王频丁宗励曾楷峰金海林朱宏施瑞华; 关键词：血管生成拟态缺氧诱导因子-1Α 食管鳞癌移植瘤

全选清除导出

共1页<1>

王频

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

王频

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈