王雅丽 作品数:25 被引量:39 H指数:4 供职机构: 江苏大学附属人民医院 更多>> 发文基金: 江苏省医学重点人才培养基金 镇江市科技支撑计划(社会发展)项目 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
骨髓增生异常综合征患者FH IT基因启动子甲基化改变 <正>FHIT 基因(Fragile Histidine Triad)是 Ohta 等于1996年发现的一个候选抑癌基因,其后的研究揭示 FHIT 基因异常与肿瘤的发生发展密切相关,最近的资料揭示 FHIT 启动子高度甲... 姚冬明 钱军 许文荣 林江 韩兰秀 王雅丽 江云伟 费霞 岑建农 陈子兴关键词:骨髓增生异常综合征 文献传递 建立实时定量PCR检测急性早幼粒细胞白血病三种PML/RARα基因转录本 <正>急性早幼粒细胞白血病(APL)是急性髓系白血病(AML)中的一个特殊亚型,约占 AML 患者的10%~15%。90%以上 APL 患者具有特征性的染色体易位 t(15;17)(q22;q12-21), 该易位导致融... 林江 韩兰秀 钱军 王雅丽 钱震 杨小飞 盛晓静 姚冬明关键词:PCR 白血病 早幼粒细胞 急性 融合基因 文献传递 四种基因甲基化特异性PCR引物设计探讨 2009年 目的:对甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)引物设计进行探讨。方法:使用Methyl PrimerExpress Software Version 1.0软件、"methprimer"和"MSPprimer"的网上在线软件设计的引物以及参照国外文献的MSP引物对CCAAT/增强子结合蛋白ζ(CEBPζ),CCAAT/增强子结合蛋白δ(CEBPδ)、脆性组氨酸三联体(FHIT)和死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因启动子进行MSP扩增,然后对其MSP产物进行测序验证以比较MSP引物设计的可靠性。结果:对于CEBPζ,CEBPδ,FHIT和DAPK启动子基因所设计的MSP引物经MSP后均获得了所需要的目的条带,但经测序鉴定Methyl Primer Express和methprimer设计的CEBPδ,CEBPζ-1的MSP扩增产物为假阳性产物,而MSPprimer设计的CEBPζ-2的MSP产物为正确序列。结论:MSP引物设计的质量是保证MSP扩增成功的关键因素。 林江 姚冬明 钱军 许文荣 钱震 朱照辉 陈芹 王雅丽 肖高飞关键词:甲基化特异性PCR 引物 高分辨率熔解曲线分析法检测急性髓系白血病c-kit基因突变 被引量:3 2011年 目的 应用高分辨率熔解(HRM)曲线分析法检测急性髓系白血病(AML)患者c-kit基因常见突变N822K和D816V.方法 对21例t(8;21)阳性AML患者骨髓标本的c-kit基因第17号外显子进行PCR扩增、HRM突变检测及DNA测序验证.结果 HRM分析发现21例患者中6例(28.6%)的c-kit基因扩增产物出现异常熔解曲线,经测序验证1例为D816V杂合子突变,5例为N822K杂合子突变.结论 HRM分析是一种简便、快速、特异和高通量的c-kit基因突变筛查方法. 姚冬明 钱军 林江 陈芹 肖高飞 王雅丽 钱震 纪润璧 李云 杨静关键词:DNA突变分析 急性髓系白血病PRAME基因转录本的定量研究 被引量:1 2010年 目的探讨黑色素瘤优先表达抗原(preferentially expressed antigen of melanoma,PRAME)基因转录本在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者中的表达和临床意义。方法建立荧光染料EvaGreen实时定量聚合酶链反应(real—time quantitative PCR,RQ~PCR)对56例初诊AMI,患者和20例对照的骨髓单个核细胞标本中PRAME转录本进行检测,分析其临床相关性。结果PRAME转录本含量在对照组和AMI,患者中分别为0~1.46%(中位0.18%)和0~21618.09%(中位9.79%)(P〈0.01);FAB亚型中M1、M2、M3和M4患者中PRAME转录本含量较对照组明显增高,而M5患者与对照组差异无统计学意义。PRAME转录本含量与染色体预后分组显著负相关(r=-0.438,P=0.001),低危组患者中PRAME转录本含量显著高于中危组和高危组患者。AML—M2患者中t(8;21)易位阳性者PRAME转录本含量(135.06%~21618.09%,中位2201.88%)明显高于无t(8;21)易位者(0.14%~1696.30%,中位17.97%)(P=0.002)。对1例AML患者不同阶段的标本检测发现诱导缓解后PRAME转录本明显下降,复发时又明显升高。结论PRAME转录本在AML患者中高表达,是患者预后良好的一个标记,可用于AML患者的随访监测。 朱照辉 钱军 林江 姚冬明 钱震 王雅丽 陈芹 韩兰秀 肖高飞关键词:实时定量聚合酶链反应 急性髓系白血病 骨髓增生异常综合征患者中死亡相关蛋白激酶基因的启动子甲基化改变 死亡相关蛋白激酶(death-associated protein kinase,DAPK)是一种160kDa、钙调蛋白依赖的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,它是一种正性细胞凋亡调节因子、通过多种途径诱导肿瘤细胞凋亡。动物模型研... 钱军 王雅丽 姚冬明 林江 韩兰秀 钱震 朱照辉 杨小飞 吴朝阳关键词:DAPK基因 骨髓增生异常综合征 DNA甲基化 文献传递 黏着斑激酶相关性鸟苷三磷酸酶调节因子基因启动子甲基化特异性PCR法的建立与初步应用 被引量:1 2009年 目的建立甲基化特异性PCR(MSP)技术检测黏着斑激酶相关性鸟苷三磷酸酶调节因子(GRAF)基因启动子甲基化。方法设计针对GRAF基因启动子的MSP引物,建立MSP检测体系,对不同DNA模板进行检测,评价方法的特异性、重复性和灵敏度;对10例急性髓系白血病(AML)标本进行检测。结果建立的MSP方法仅能扩增出甲基化阳性模板,不能扩增出未甲基化阳性模板和未硫化处理的DNA模板;检测不同稀释度的甲基化阳性模板,其最大灵敏度可达2%;在不同时间进行MSP检测的结果均一致;对10例AML患者的初步检测发现7例存在着GRAF基因启动子甲基化。结论成功建立了检测GRAF基因启动子甲基化的MSP方法,有良好的特异性、灵敏度和重复性,可用于临床AML标本的批量检测。 钱震 林江 钱军 姚冬明 王雅丽 韩兰秀 朱照辉 肖高飞关键词:甲基化特异性PCR 甲基化 EvaGreen实时定量PCR检测急性髓系白血病GRAF基因表达 被引量:1 2010年 目的 研究急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)中粘着斑激酶相关性鸟苷三磷酸酶调节因子(GTPase regulator associated with the focal adhesion kinase,GRAF)基因的表达及其临床意义.方法 建立EvaGreen染料法实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative PCR,RQ-PCR),对71例AML患者和21例良性血液病患者中GRAF转录本水平进行检测,分析其临床相关性.结果 所建立的EvaGreen RQ-PCR方法具有良好的特异性、重复性,敏感度达102拷贝/μL.AML患者中GRAF转录本水平(0.01%~169.75%,中位3.82%)较对照组(14.49%~126.85%,中位56.04%)显著降低(P〈0.05),GRAF基因表达量与患者性别、年龄、外周血白细胞计数、血红蛋白、血小板计数、FAB亚型、染色体核型分组均无相关性(P〉0.05).结论 AML患者中GRAF基因表达下调,可能与其发病有关. 钱震 林江 钱军 姚冬明 王雅丽 韩兰秀 朱照辉 肖高飞关键词:急性髓系白血病 实时定量聚合酶链反应 慢性粒细胞白血病患者死亡相关蛋白激酶基因甲基化 被引量:6 2008年 死亡相关蛋白激酶(DAPK)是一种新发现的抑癌基因,编码蛋白为钙调蛋白依赖的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。DAPK是一种正性细胞凋亡调节因子,通过多种途径诱导肿瘤细胞凋亡。动物实验结果表明DAPK能够在肿瘤发育的早期阶段抑制细胞转化、并且能够抑制晚期转移事件。此外,对造血系统肿瘤的研究揭示伯基特淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、弥漫大B细胞淋巴瘤、急性髓系白血病、骨髓增生异常综合征、慢性淋巴细胞白血病、多发性骨髓瘤存在着较高频率的DAPK基因启动子甲基化。目前对慢性粒细胞白血病(CML)的相关研究甚少,我们应用甲基化特异性PCR(MSP)对CML患者DAPK基因启动子甲基化状况进行了检测,现将结果报道如下。 钱军 姚冬明 林江 王雅丽 许文荣 韩兰秀 盛晓静 杨小飞 吴朝阳关键词:慢性粒细胞白血病 死亡相关蛋白激酶 基因甲基化 白血病患者 基因启动子甲基化 弥漫大B细胞淋巴瘤 慢性淋巴细胞白血病 急性髓系白血病患者中GRAF基因启动子甲基化改变的研究 <正>粘着斑激酶相关性鸟苷三磷酸酶调节因子(GTPase regulator associated with the focal adhesion kinase,GRAF)是一个抑癌基因,位于染色体5q31,其转录mPN... 钱军 钱震 林江 姚冬明 陈芹 李云 纪润璧 杨静 肖高飞 王雅丽文献传递