王跃祥
- 作品数：36 被引量：147H指数：7
- 供职机构：复旦大学上海医学院分子医学教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部“211”工程上海市科学技术委员会科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 视锥-视杆同源盒基因对斑马鱼光感受器细胞发育的影响被引量：3
- 2008年
- 目的 观察斑马鱼受精卵CRX基因表达下调后，视网膜光感受器细胞外节盘的发育和视蛋白的表达。方法 实验研究。斑马鱼受精卵内显微注射CRX-寡核苷酸，使CRX基因的表达下降。通过眼球的组织学切片、电镜标本和视蛋白RNA探针的原位杂交观察光感受器细胞以及外节盘的发育和视蛋白的表达。结果 视网膜组织学观察，CRX组与对照组、空白组比较，视网膜和光感受器细胞的发育都没有明显差别。电镜观察，对照组和空白组光感受器细胞都有外节盘形成，但是CRX组未发现明显的外节盘结构。对照组和空白组斑马鱼均可在鼻侧视网膜区域观察到视紫红质（rhodopsin，Rho），视锥细胞蓝色视蛋白（SWS1）和紫外线视蛋白（SWS2）3种视蛋白的表达，CRX组3种视蛋白的表达明显减少。结论 CRX基因影响斑马鱼光感受器细胞外节盘的发育和视蛋白的表达。
- 张艳琼王跃祥徐格致宋后燕王文吉
- 关键词：反式激活因子类光感受器发育斑马鱼
- 斑马鱼发育遗传学研究进展被引量：21
- 2004年
- 斑马鱼是研究发育和遗传的极有价值的模式生物。斑马鱼遗传筛选发现了许多控制脊椎动物发育的新基因,这些基因涉及器官形成的分子机制。本文就斑马鱼心血管系统及血液系统发育遗传学研究进展作一综述。
- 王跃祥钟涛宋后燕
- 关键词：斑马鱼发育遗传学血细胞血管形成
- 人血管内皮细胞生长因子重组腺病毒及其制备方法和应用
- 本发明属生物技术领域，具体涉及一种人血管内皮细胞生长因子重组腺病毒及其制备方法和应用。本发明应用RT－PCR方法，扩增人VEGF<Sub>121</Sub>cDNA基因片段，构建VEGF<Sub>121</Sub>cDN...
- 宋后燕王跃祥杨健
- 文献传递
- 乙醇干扰斑马鱼心血管系统的发育
- 人类胚胎期乙醇暴露对心血管系统有严重致畸作用。实验中，用不同浓度的乙醇处理斑马鱼胚胎，发现能够干扰其胚胎循环系统的建立，半数有效浓度(EC50)为182.5mmol/L。乙醇短暂暴露实验显示圆顶期为敏感时间窗，400mm...
- 钱林溪王跃祥蒋璆钟涛宋后燕
- 关键词：乙醇致畸作用斑马鱼血管形成
- 文献传递
- 肌肉细胞特异性增强因子2A（MEF2A）在斑马鱼心脏和体节发育中的作用
- 肌肉细胞特异性增强因子2基因(Myocytespecifific-enhancerfactor2，MEF2)广泛存在于果蝇、斑马鱼、小鼠和人类中。在小鼠和人类中，MEF2基因家族至少存在4个成员：MEF2A,MEF2B,...
- 王跃祥
- 关键词：心脏收缩刺猬骨形态蛋白-2渥曼青霉素斑马鱼
- Tbx1基因功能下调影响斑马鱼Tbx20和Tbx2表达被引量：3
- 2009年
- 目的采用吗啡啉修饰反义寡核苷酸显微注射方法下调斑马鱼Tbx1基因表达,研究斑马鱼Tbx1基因功能下调对其他两个T盒基因Tbx20和Tbx2表达的影响。方法采用吗啡啉修饰的反义寡核苷酸显微注射方法抑制斑马鱼Tbx1基因表达,分别将2.5、5、8、10 ng吗啡啉反义寡核苷酸在斑马鱼0-4细胞期注入胚胎,并构建Tbx20,骨形成蛋白2b(Bmp2b)和Tbx2反义RNA探针,进行整体原位杂交,观察Tbx1基因下调对Tbx20、Bmp2b及Tbx2表达的影响。结果Tbx1吗啡啉寡核苷酸显微注射组胚胎表现出鳃弓、耳囊、心血管系统和胸腺的发育异常。Tbx1基因下调导致Tbx20的表达出现改变,Tbx20在心脏的表达与对照组相比明显下调,神经元的表达范围明显缩小;Tbx1基因功能下调会导致Bmp2b在心脏和咽囊的表达减低,Bmp2b在后部咽囊的表达较前部咽囊减低得更为明显;Tbx1基因功能下调胚胎,Tbx2在鳃弓的表达模式发生改变,48 hpf,Tbx2在鳃弓的表达出现从后向前逐渐减低,鳃弓的表达范围较对照组明显缩小。结论Tbx1在发育过程中,会对其他T盒基因,如Tbx20和Tbx2具有激活或抑制的调控作用。Tbx1对Tbx20的作用可能是通过影响Bmp2b的途径,继发地影响Tbx20的表达。Tbx1基因功能下调,会改变Tbx2在鳃弓的表达模式。
- 张立凤桂永浩王跃祥蒋璆宋后燕
- 关键词：斑马鱼TBX2
- hand2基因对斑马鱼胚胎发育影响的实验研究被引量：3
- 2008年
- 目的观察hand2在斑马鱼胚胎内的表达情况,验证显微注射吗啡啉修饰的反义寡核苷酸(Morpholi-no oligonucleotides,MO)使hand2表达下调的有效性。观察hand2表达下调后斑马鱼胚胎发育的异常表型,初步探讨hand2在斑马鱼胚胎发育中的作用,为利用斑马鱼开展hand2的功能研究提供线索。方法采用胚胎整体原位杂交的方法观察hand2在斑马鱼胚胎内的表达情况。利用向斑马鱼受精卵显微注射MO的方法使hand2表达下调,并进行hand2表达下调的效率验证。将斑马鱼单细胞受精卵分为4组进行显微注射,即对照MO(Con MO)注射组、hand2MO注射组、hand2-GFP mRNA注射组和hand2-GFP mRNA+hand2MO注射组。在荧光显微镜下观察hand2-GFP mRNA注射组和hand2-GFP mRNA+hand2MO注射组的荧光表达情况以验证hand2表达下调的效率。在显微镜下观察hand2MO注射组斑马鱼胚胎的各器官发育情况并进行评定。结果hand2在斑马鱼胚胎的侧板中胚层、咽弓、心脏和鳍有较强表达。hand2-GFP mRNA注射组在8hpf(hours post fertilization)时胚胎有较强的荧光表达,而hand2-GFP mRNA+hand2MO注射组胚胎几乎无荧光表达。与Con MO注射组相比,hand2MO注射组斑马鱼胚胎的心脏、血管、血细胞、鳍以及体节有明显的发育异常。结论向斑马鱼受精卵显微注射hand2MO的方法可有效的使hand2表达下调。hand2在斑马鱼胚胎的心脏、血管、血细胞、鳍以及体节的发育过程中有重要作用。
- 孙淑娜桂永浩宋后燕蒋璆王跃祥
- 关键词：斑马鱼胚胎发育
- 二维电泳分析胎儿酒精综合征斑马鱼模型蛋白表达谱被引量：1
- 2011年
- 目的 利用二维电泳分析乙醇诱导斑马鱼胚胎发育畸形的可能分子机制。方法采用400mmol／L乙醇在斑马鱼胚胎圆顶期处理3h，观察乙醇导致的斑马鱼胚胎发育畸形；通过二维凝胶电泳分析受精卵期、圆顶期、胚盾期和5体节期的胚胎总蛋白，采用差减分析法减少母源性蛋白的干扰，比较5-体节期正常对照组和乙醇处理组斑马鱼胚胎蛋白表达谱的改变；通过原位杂交验证二维电泳的分析结果。结果400mmol／L乙醇处理导致62％的胚胎产生体轴发育障碍和60％的胚胎产生独眼畸形。二维电泳分析结果显示，400mmol／L乙醇处理会导致受精后12h（12hourspostfertilization，12hpf）斑马鱼胚胎胶原蛋白2al和TARDNA结合蛋白表达分别下调81％和73％。随后原位杂交显示，胶原蛋白2al在乙醇处理组胚胎体轴的表达明显下调；24hpf乙醇处理胚胎胶原蛋白2al在胚胎体轴的表达水平逐渐恢复正常，但神经管结构受到严重影响。结论乙醇处理后斑马鱼胚胎发育畸形可能是由于乙醇干扰了胚胎发育过程中胶原蛋白2al和TARDNA结合蛋白的表达；其中乙醇对胶原蛋白2al在轴中胚层早期表达的干扰，可能是导致发育后期体轴和神经管畸形的重要原因。
- 钱林溪孙淑娜蔡威王跃祥蒋缪宋后燕
- 关键词：斑马鱼胎儿酒精综合征蛋白质组
- 桔梗皂苷对斑马鱼心功能及胚胎发育的影响被引量：12
- 2006年
- 目的探索桔梗总苷对斑马鱼心律及胚胎发育的影响。方法从中药饮片提取桔梗总苷,用不同浓度的桔梗总苷对不同发育阶段的斑马鱼胚胎进行处理,观察该药对斑马鱼心律及心脏发育的影响。结果桔梗总苷处理后发现,斑马鱼心率减缓但未出现心律失常;心脏功能相关的离子通道基因表达水平略有降低;高浓度(10mg·L-1)的桔梗总苷处理导致斑马鱼胚胎的死亡与畸形的比例显著增加,同时干扰了斑马鱼胚胎的发育过程。结论桔梗不能引起心律失常,但高浓度用药导致心率迟缓、心功能下降以及致畸致死效应。
- 董永新王跃祥钱林溪蒋璆刘学飞宋后燕
- 关键词：斑马鱼发育
- 视黄醛脱氢酶2抑制剂对斑马鱼胚胎心脏发育的影响被引量：3
- 2010年
- 目的利用新型模式生物斑马鱼，采用外源性视黄醛脱氢酶2抑制剂——对二乙氨基苯甲醛（4-diethylaminobenzaldehyde，DEAB），建立维甲酸（retinoicacid，RA）缺乏的斑马鱼模型，探讨其对斑马鱼胚胎心脏发育的影响。方法在斑马鱼胚胎受精后5、8、10．3h，分别用1×10^-6、5×10^-6、10×10^-6、25×10^-6mol／L的DEAB处理，在解剖显微镜下实时观察胚胎发育的全过程，在受精后5h给予1×10^-9mol／L外源性RA干预，观察其对DEAB致畸的拮抗作用。通过胚胎心脏表型观察、心率和心室收缩分数比较以及心脏特异分子标记——心房利钠肽A基因整体原位杂交实验分析RA缺乏对胚胎心脏发育的影响。结果外源性DEAB处理后，胚胎生存率随着处理浓度增加而降低，随着处理时间点后移而升高。当DEAB浓度≥5×10^-6mol／L时，斑马鱼畸胎率为100％，异常表型一致，并能被1×10^-6mol／L外源性RA有效援救。RA缺乏时斑马鱼心脏表现出管状心脏、无向右环化或环化不完全、房室分化异常及房室管区血液反流。与野生型胚胎相比，DEAB处理后斑马鱼胚胎心率和心室收缩分数降低，心房利钠肽A基因表达改变，在心室部位表达清晰强烈，在心房部位表达明显减弱。结论DEAB影响胚胎发育有剂量依赖性和时效性，其致畸作用能被外源性RA有效拮抗。RA缺乏影响心脏早期发育的多个重要环节，导致心脏收缩功能受损。心脏心房利钠肽A基因表达受RA信号调控。
- 侯佳桂永浩王跃祥张立凤宋后燕
- 关键词：维甲酸斑马鱼心脏胚胎发育
