在大肠杆菌BL21(DE3)中表达编码盘基网柄菌中gp150蛋白C末端的基因,得到含有gp150蛋白C末端肽段及6个组氨酸标签的融合蛋白。通过镍柱亲和层析纯化得到纯度在90%以上的目的蛋白,用于免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。所得抗体经Western blot检测有较好的抗gp150的特异性,ELISA法测定效价达1:128 000后用于免疫共沉淀,从发育16 h的盘基网柄菌细胞全蛋白中成功分离出两个与gp150蛋白相互作用的蛋白质。通过质谱分析鉴定,分别为40S ribosomal protein S3(RPS3)蛋白和40S ribosomal protein S24(RPS24)蛋白,两蛋白在细胞周期调控、细胞发育及凋亡过程中有着重要作用。实验结果提示在盘基网柄菌多细胞发育中gp150蛋白可能与RPS3和RPS24发生相互作用,借此调节了细胞分化和发育。
