潘鹭翔
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 宿主蛋白LSm1-7复合体在登革病毒RNA复制中作用的初步研究
- 目的：探讨LSm1-7复合体在登革病毒(DENV) RNA复制中的作用。方法：DENV感染HepG2细胞后，在不同时间点(2hr、24hr、36hr、48hr)收集细胞和提取总mRNA，实时定量PCR (RT-qPCR)...
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- 关键词：登革病毒核糖核酸基因复制宿主蛋白
- 文献传递
- 宿主蛋白LSm1-7复合体在登革病毒RNA复制中作用的初步研究
- 目的探讨LSm1-7复合体在登革病毒(DENV)RNA复制中的作用。方法 DENV感染HepG2细胞后,在不同时间点(2、24、36、48 h)收集细胞和提取总mRNA,实时定量PCR(RT-qPCR)分析LSm-1表达...
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- 关键词：登革病毒宿主蛋白
- 宿主蛋白LSm1-7复合体在登革病毒RNA复制中的作用研究被引量：2
- 2013年
- 目的探讨LSm1-7复合体在登革病毒(DENV)RNA复制中的作用。方法 DENV感染HepG2细胞后,在不同时间点(2、24、36、48h)收集细胞和提取总mRNA,实时定量PCR(RT-qPCR)分析LSm1表达水平;将LSm1的siRNA和非特异对照siRNA两次转染HepG2细胞后感染DENV-2,24h后收集细胞,提取总mRNA,RT-qPCR分析LSm1表达水平与病毒RNA表达水平;利用LSm1抗体与dsRNA抗体对DENV感染细胞进行免疫荧光染色,激光共聚焦分析LSm1与dsRNA共定位情况。结果与2h比较,随着时间的推移,DENV-2 RNA和LSm1 RNA水平逐渐升高;与对照组siNC比较,siLSm1组LSm1 RNA水平明显降低,沉默效率达78.2%;与对照组siNC比较,siLSm1组DENV RNA含量降低35.6%;LSm1-7复合体在DENV感染HepG2细胞后募集到核周围,与DENV dsRNA共定位。结论 LSm1-7复合体可能作为DENV复制复合物的组成部分,正调控DENV RNA的复制。
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- 关键词：登革病毒宿主蛋白RNA复制
- Clusterin蛋白在大肠杆菌中的表达及其多抗制备
- 2013年
- 目的:在大肠杆菌中表达Clusterin蛋白,并制备其兔抗Clusterin蛋白的多克隆抗体。方法:从MCF-7细胞提取mRNA,逆转录为cDNA,以此为模板PCR扩增Clusterin编码基因;将Clusterin编码区cDNA插入的pRSET-A原核表达载体,构建pRSET-A-clusterin;将重组质粒转化BL21(DE3)感受态细菌,以IPTG诱导6×His-Clusterin融合蛋白的表达,经亲和纯化柱与凝胶柱进行层析纯化。经SDS-PAGE和Western-blot鉴定后,将纯化的融合蛋白与弗氏佐剂混合制备成油包水悬液,常规免疫新西兰大白兔制备多抗,Western-blot检测该抗体识别内源性clusterin的特异性。结果:成功构建了Clusterin蛋白的原核表达载体pRSETA-clusterin;经表达并纯化的Clusterin蛋白纯度达到98%以上,免疫新西兰大白兔后制备得到了特异性的抗Clusterin的多抗。结论:成功地表达并纯化了Clusterin蛋白,并制备了特异性抗Clusterin多抗。
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- 关键词：CLUSTERIN原核表达蛋白纯化多抗
- 宿主蛋白LSm1-7复合体在登革病毒RNA复制中作用的初步研究
- 目的:探讨LSm1-7复合体在登革病毒(DENV)RNA复制中的作用。【方法】DENV感染HepG2细胞后,在不同时间点(2hr、24hr、36hr、48hr)收集细胞和提取总mRNA,实时定量PCR(RT-qPCR)分...
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- 文献传递
