沙桂华
- 作品数：11 被引量：38H指数：4
- 供职机构：北京协和医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
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- 绒毛膜癌氟尿苷耐药细胞系的建立及其胸苷合成酶的表达被引量：6
- 2009年
- 目的建立对氟尿苷（FUDR）耐药的绒毛膜癌（绒癌）细胞系，鉴定其生物学特性，并探讨胸苷合成酶（TS）在绒癌FUDR耐药细胞中的表达。方法采用间断诱导法诱导绒癌细胞系JeG-3，建立绒癌FUDR耐药细胞系JeG-3／FUDRA（诱导浓度为2．3×10^-3mol／L）。倒置显微镜观察细胞形态；活细胞计数（CCK-8）法观察敏感细胞和耐药细胞的生长和耐药指数；化学发光法测定培养液中的激素水平；流式细胞仪检测细胞周期比例和染色体倍性；荧光定量PCR技术检测不同浓度FUDR（2．3×10^-3 、5．1×10^-5、5．1×10^-7mol／L）诱导的JeG-3细胞（JeG-3／FUDRA、JeG-3／FUDRC、JeG-3／FUDRE）中TSmRNA的表达。结果（1）绒癌耐药细胞系JeG-3／FUDRA的建立及生物学鉴定：历时10个月成功建立了绒癌耐药细胞系JeG-3／FUDRA，其耐药指数为31．62。与JeG-3亲本细胞相比，JeG-3／FUDRA耐药细胞的形态发生明显改变，细胞生长明显减慢（P〈0．05），群体倍增时间明显延长[分别为（27．4±0．8）和（47．3±2．1）h，P〈0．01]；G2／M期细胞比例明显下降[分别为（27±6）％和（9±3）％，P〈0．05]，G0／G1期细胞比例明显增加[分别为（29±3）％和（63±7）％，P〈0．01]；染色体数目明显增加[分别为（76±5）和（143±5）条，P〈0．01]；其培养液中人绒毛膜促性腺激素（hCG）水平明显下降[分别为（29．1±9．9）和（8．9±0．9）mU／ml，P〈0．05]，孕酮水平明显下降[分别为（31±8）和（16±3）ng／ml，P〈0．05]。（2）耐药细胞中TS mRNA的表达：经低浓度FUDR诱导后，JeG-3／FUDRE细胞中TS mRNA的表达水平下调；随着FUDR诱导浓度的增加和作用时间的延长，细胞中TS mRNA的表达水平逐渐恢复，其中JeG-3／FUDRC细胞中TSmRNA表达水平和JeG-3亲本细胞比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；而JeG-3／FUDRA细胞中TS mRNA表达水平则明显高于JeG-3亲�
- 韩冰向阳沙桂华张浩刘欣
- 关键词：绒毛膜癌氟尿苷胸苷酸合酶
- 子宫内膜异位症体外组织学模型的构建被引量：8
- 2008年
- 目的:分析子宫内膜与腹膜黏附的细胞学行为及分子生物学表现,探索子宫内膜组织培养条件及子宫内膜组织与腹膜组织黏附的培养条件。方法:对比观察气液面培养和培养基中培养对于子宫内膜组织及子宫内膜组织黏附腹膜的影响,子宫内膜黏附腹膜后分别于1h,6h,12h,24h,1h～6天收集标本用光镜观察子宫内膜与腹膜黏附发生的时间,黏附部位的细胞学行为。结果:子宫内膜组织气液平面培养较培养基中培养组织结构维持好,离体培养时间长;子宫内膜组织接种腹膜组织离体培养3d后能观察到子宫内膜基质细胞明显侵袭腹膜间皮层,黏附处大部分腹膜间皮层缺损,可以通过腺体和基质细胞与腹膜间皮面黏附。结论:子宫内膜组织与腹膜组织共培养于气液平面培养效果好。
- 阳艳军冷金花董喆沙桂华郎景和
- 关键词：子宫内膜腹膜子宫内膜异位症
- 卵巢非赘生性囊肿的内分泌改变被引量：6
- 2001年
- 沙桂华林守清
- 关键词：内分泌
- 子宫内膜异位症发病新学说的临床实践和评价
- 朗景和冷金花戴毅刘珠凤孙大为朱兰樊庆泊沙桂华刘海元谭先杰
- 该成果属于妇产科学领域。近年来，该成果所属研究团队对子宫内膜异位症(简称内异症)的临床诊断和治疗进行了全面研究，2003年基于大量的基础研究的发现提出了的内异症“在位内膜决定论”对内异症传统发病机制提出有力的补充和修正，...
- 关键词：
- 关键词：子宫内膜异位症手术治疗
- C1QBP基因在绒毛膜癌耐药细胞株中的表达及其与耐药的关系
- 2014年
- 目的 检测补体成分1Q亚成分结合蛋白（C1QBP）基因在绒毛膜癌（绒癌）耐药细胞株及其亲本细胞株中的表达差异,探讨以C1QBP基因为靶向的RNA干扰能否有效逆转绒癌耐药细胞株对相应化疗药物的耐药性.方法 （1）通过实时荧光定量PCR技术、蛋白印迹法和细胞免疫荧光法检测绒癌耐药细胞株,即氟脲嘧啶脱氧核苷（FUDR）耐药细胞株JeG-3/FUDR、甲氨蝶呤（MTX）耐药细胞株JeG-3/MTX、依托泊苷（VP-16）耐药细胞株JeG-3/VP、放线菌素D（ACTD,又称KSM）耐药细胞株JeG-3/KSM细胞,以及亲本细胞株JeG-3细胞中C1QBP mRNA和蛋白的表达及蛋白定位.（2）靶向构建C1QBP基因的短发夹状RNA（shRNA）,包装成C1QBP基因RNA干扰（RNAi）慢病毒表达载体,即C 1QBP-RNAi-LV,转染绒癌耐药细胞,实时荧光定量PCR技术及蛋白印迹法检测转染后绒癌耐药细胞株JeG-3/FUDR细胞和亲本细胞株JeG-3细胞中C1QBP mRNA和蛋白的表达,活细胞计数（CCK-8）法检测各绒癌耐药细胞的药物敏感性的变化.结果 （1）转染前绒癌耐药细胞株JeG-3/FUDR、JeG-3/MTX、JeG-3/VP、JeG-3/KSM细胞中C1QBP mRNA表达水平分别为2.520±0.680、1.770±0.230、1.940±0.090、1.740±0.350,均明显高于亲本细胞株JeG-3细胞（为1.000）,差异均有统计学意义（P＜0.05）.4种绒癌耐药细胞中C1QBP蛋白表达强度均高于亲本细胞株JeG-3细胞;绒癌耐药细胞和亲本细胞中均存在C1QBP蛋白的表达,均定位于细胞内的线粒体.（2）转染后绒癌耐药细胞株JeG-3/FUDR细胞中C1QBP mRNA表达水平下调了93.1％（P＜0.01）,C1QBP蛋白表达完全被抑制.（3）转染后绒癌耐药细胞株JeG-3/FUDR、JeG-3/MTX、JeG-3/VP和JeG-3/KSM细胞的耐药指数较其相应RNAi阴性对照分别下降了86.3％、93.9％、92.8％和89.9％,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 C1QBP基因在绒癌耐药细胞株中表达明显增高,沉默C1QBP基因表达可以有效逆转绒癌耐药细�
- 沈晓燕韩冰沈芸杨隽钧任彤沙桂华向阳
- 关键词：绒毛膜癌载体蛋白质类线粒体蛋白质类RNA干扰
- 雌孕激素联用对人子宫内膜内皮细胞血管形成能力影响的体外研究
- 育龄期妇女的子宫内膜和卵巢周期性血管形成是唯一发生于成人体内的生理性血管形成,研究子宫内膜和卵巢的血管形成特征及其调控因素对深入认识某些妇科特有疾病的发病机制有重要的意义。雌孕激素通过周期性的变化调控着子宫内膜的月经后修...
- 沙桂华林守清
- 文献传递
- 性激素补充治疗与子宫出血
- 2002年
- 沙桂华林守清
- 关键词：雌激素孕激素发病率出血性激素补充治疗子宫出血
- 不同浓度的17-β雌二醇作用下骨膜来源的成骨细胞雌激素受体及雌激素相关受体基因的表达
- 目的:研究雌激素受体及雌激素相关受体基因在骨膜来源的成骨细胞的表达及其与不同浓度雌激素作用的关系。方法:采用来自Wistar大鼠颅骨骨膜的成骨细胞,分别给与9个不同浓度雌激素及对照作用后,提取细胞的总RNA,采用半定量的...
- 黄曼婷林守清沙桂华
- 文献传递
- 女性生殖内分泌功能检测的方法学进展被引量：3
- 2002年
- 沙桂华林守清
- 关键词：基因突变影像学检测甾体激素垂体促性腺激素激素受体生物学效应
- 子宫内膜异位症与正常子宫内膜黏附过程的形态学分析被引量：3
- 2009年
- 目的:分析子宫内膜异位症(endometriosis,EM)和正常对照子宫内膜与腹膜黏附过程的特征。方法:将EM和非EM患者的子宫内膜与腹膜自身及交叉接种共培养后,用组织学方法和透射电镜观察EM患者和非EM患者的子宫内膜组织和腹膜组织的特征。结果:患者和正常对照来源的子宫内膜与腹膜之间的黏附过程在黏附发生的时间和组织学检查中无明显区别。透射电镜检查表明,EM患者来源的子宫内膜表现出代谢活跃的特征。结论:子宫内膜和腹膜自身的特征决定了异位内膜能够很快与腹膜黏附。EM和非EM患者的黏附过程无明显区别。
- 阳艳军冷金花董喆沙桂华郎景和
- 关键词：子宫内膜异位症透射电子显微镜
