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沈珝琲: 作品数：69 被引量：66H指数：4; 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金卫生部科技专项基金更多>>; 相关领域：生物学医药卫生历史地理更多>>

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CRE和AP-1元件参与人hsp90β基因的表达被引量：3: 2000年; 为了进一步阐明人热休克蛋白90β（hsp90β）基因的表达调控机制，本文对hsp90β基因调控序列中的CRE和AP－1元件进行了研究。构建了含有这两个元件的系列删切报告基因质粒，通过转染Jurkat细胞，检测并分析报告基因的活性。结果表明，CRE和AP-1元件均不同程度地参与了hsp90β基因的组成性、PHA激活和热诱导表达。; 刘秉胜吴宁华沈珝琲; 关键词：HSP90Β基因基因表达

JDP2:一种参与组蛋白乙酰化的转录因子被引量：1: 2007年; Jun二聚化蛋白-2(Jun dimerization protein-2,JDP2)是转录因子复合体AP-1的抑制性组分。JDP2能形成同源二聚体或与c-Jun、JunB、JunD、ATF-2等形成异源二聚体,抑制AP-1的转录激活作用。同时JDP2还能募集组蛋白去乙酰基酶,或直接与组蛋白结合,抑制组蛋白的乙酰化,通过改变染色质结构调控基因转录。J D P2通过在D N A、染色质多个水平调控基因的转录,在细胞的多种生理或病理活动中发挥着重要作用。; 吴萌张业沈珝琲; 关键词：组蛋白乙酰化表观遗传调控

JMJD6参与调节肿瘤抑制因子p53的转录活性: 2012年; 目的确定JMJD6与转录因子p53的相互作用,研究JMJD6对p53转录活性的影响,并通过鉴定JMJD6的赖氨酸羟化酶活性探讨其可能的作用机制。方法免疫共沉淀技术和GST pull-down实验分析JMJD6和p53的相互作用及其作用区域;荧光素酶双报告基因系统检测JMJD6对p53靶基因启动子活性的影响;体外羟基化实验和质谱鉴定JMJD6的羟化酶活性。结果 JMJD6与p53相互作用,并由p53的C端结构域介导;JMJD6参与激活p53的转录活性;JMJD6具有赖氨酸羟化酶活性,可以催化组蛋白H4发生羟基化。结论赖氨酸羟化酶JMJD6可以结合肿瘤抑制因子p53并参与调节其转录活性。; 张艳君程谟斌代辉沈珝琲张业; 关键词：P53

维生素D_3、9-顺式维甲酸及其相应核受体对hsp90β基因表达的调控: 2000年; 目的　研究维生素 D3(VD3)、9-顺式维甲酸 (9- cis- RA)及其相应核受体对 hsp90 β基因表达的调控作用。方法　采用 DEAE- Dextran方法将人 hsp90 β基因调控片段 (- 10 39bp/ +15 31bp)介导的荧光素酶 (L uc)报告基因质粒 β1.11转染 Jurkat细胞 ,并用 VD3和 9- cis- RA分别或同时刺激细胞 ,或将质粒 β1.11及野生型维生素D3受体 (VDR)或 /和维甲酸 X受体 α(RXRα)真核表达质粒共转染 Jurkat细胞 ,检测细胞裂解液中荧光素酶活性 ;用 Western印迹分析方法检测经 VDR真核表达质粒转染或用 VD3和 9- cis- RA刺激的 Jurkat细胞中内源性Hsp90β蛋白的改变 ;通过电泳迁移率变更分析 (EMSA)实验 ,检测 VDR和 RXR能否与含有 hsp90β基因第一内含子中维生素 D3应答元件 (i VDRE)的双链寡核苷酸片段发生特异结合。结果　 VD3和 9- cis- RA可分别低水平诱导hsp90β基因表达 ,而两种配体同时加入有协同作用。 VDR或 RXRα分别转染只能较弱地抑制 hsp90β基因表达 ,二者共转染能增强其抑制作用。 EMSA实验证实 ,VDR和 RXR都可特异结合于 i VDRE上。结论　 VD3和 9- cis- RA这两条信号途径共同参与 hsp90β基因的启动子活性调节。; 张洪美吴宁华沈珝琲; 关键词：维生素D3 9-顺式维甲酸基因表达

用酵母单杂交系统筛选人IL-2Rα基因NIRS元件结合蛋白的cDNA被引量：1: 2005年; 目的筛选与白细胞介素2受体(IL2R)α基因NIRS元件相互作用的结合蛋白。方法采用酵母单杂交体系从HTLV1转化的人外周血淋巴细胞MATCHMAKERcDNA文库中筛选与NIRS相互作用的蛋白。结果经过筛选并排除假阳性后有9个阳性克隆仍保持His+表型和βgal活性;测序后分析发现它们分别属于4个不同蛋白的cDNA克隆。其中一个是已知的反式作用因子Ku抗原,另一个是RNA聚合酶Ⅰ的转录终止因子。它们的C末端分别含有SAP和SANTDNA结合结构域。结论在Jurkat细胞中存在与NIRS元件相互作用的结合蛋白,相关的研究正在进行中。; 盛德乔陆瑜李宏帆吴宁华沈珝琲; 关键词：结合蛋白人IL-2 白细胞介素2受体 DNA结合结构域 HTLV-1 反式作用因子

人IL-2受体α链cDNA5′端缺失变异次级克隆的构建: 1990年; 在机体的免疫应答过程中,IL-2和IL-2高亲和力受体的相互作用,具有非常重要的意义。高亲和力IL-2受体是由α和β两条链构成的复合物,α链被诱导表达,β链持续表达。现已表明。; 王劲松杨贵贞沈珝琲; 关键词：免疫应答受体 CDNA

真核RNA聚合酶Ⅱ无细胞体外转录体系的构建及其应用: 1993年; 近年来,研究真核基因的转录调控已成为分子生物学的热点之一。为了研究 DNA 元件或蛋白质因子在转录过程中的作用,建立无细胞体外转录体系是十分必要的。到目前为止,发现至少有六种必需的蛋白质因子参与 RNA 聚合酶Ⅱ的起始转录。绝大部分RNA 聚合酶Ⅱ的无细胞转录体系来自哺乳动物或果蝇的组织培养细胞的提取物。本文研究了人的白介素-2受体α链基因(IL-2Rα)在 HeLa 细胞提取物中的转录。; 王永俊琦祖和沈珝琲; 关键词：无细胞

精氨酸甲基转移酶CARM1 shRNA慢病毒表达质粒的构建及稳定敲低CARM1的小鼠畸胎瘤P19细胞系的建立: 2014年; 目的构建慢病毒表达小鼠CARM1基因shRNA的质粒,观察其在小鼠畸胎瘤P19细胞中对CARM1的表达抑制效率。验证CARM1 shRNA慢病毒表达质粒,进一步筛选得到稳定敲低CARM1的小鼠畸胎瘤P19细胞系。方法设计并且合成针对小鼠CARM1 mRNA不同部位的4组shRNA序列,以AgeⅠ和EcoRⅠ克隆入pLKO.1慢病毒载体中,得到含shRNA的慢病毒表达质粒。氨苄青霉素筛选后,DNA测序鉴定结果。鉴定正确的质粒大量制备后,与慢病毒包装辅助质粒psPAX2、pMD2.G共同转染HEK293T细胞,包装得到具有感染能力的慢病毒。将含病毒的培养基上清感染P19细胞后,经嘌呤霉素筛选获得CARM1稳定敲低的P19细胞系,并用Western blot法和实时荧光定量PCR进行鉴定。结果测序鉴定表明4组CARM1 shRNA慢病毒表达质粒构建成功。Western blot法检测和实时荧光定量PCR分析结果显示4组CARM1 shRNA慢病毒表达载体中的2组可有效地抑制小鼠畸胎瘤P19细胞中CARM1基因的表达,即pLKO.1/CARM1 shRNA2、pLKO.1/CARM1 shRNA3有明显的抑制效果。结论成功构建了针对CARM1基因的shRNA的慢病毒表达质粒并筛选得到稳定敲低CARM1表达的P19细胞系,为进一步研究CARM1基因的功能奠定了基础。; 冯炯杨光辉沈珝琲张业; 关键词：SHRNA 慢病毒

NeuroD在神经细胞分化中的调控作用被引量：1: 2008年; 神经分化因子(NeuroD)是一种含bHLH结构域的结合E-box的转录调控因子,主要参与神经细胞分化过程和胰腺发生、功能维持。近年来的研究表明,NeuroD的表达受细胞因子调控或某些化学因子影响,同时与多种蛋白,如Brg1,AK1和Htt等共同调节下游基因表达,进而调控细胞周期和神经细胞分化进程。这些研究为NeuroD参与细胞分化进程,糖尿病和其他神经性疾病的发生提供了依据。; 方洪波张业沈珝琲; 关键词：NEUROD 胰腺全反式维甲酸

稳定表达SirT7对其转染的P19细胞的增殖抑制作用被引量：1: 2009年; 目的构建稳定表达SirT7的P19细胞系并探讨Ⅲ类组蛋白去乙酰基酶SirT7在该细胞中对细胞增殖和细胞周期的影响。方法将SirT7的真核表达质粒转染进入P19细胞,并利用筛选标记筛选出稳定克隆,采用Western blot、流式细胞仪等方法观察SirT7对P19细胞生长和细胞周期的影响。结果稳定表达Sirt7 P19细胞系细胞生长速度减慢,流式细胞仪荧光分析呈现明显的G1/S期阻滞。结论SirT7可导致P19细胞的周期阻滞,并抑制细胞的增殖。; 吕建祎张业沈珝琲; 关键词：细胞增殖细胞周期

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