毕静
- 作品数：5 被引量：1H指数：1
- 供职机构：复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 结核分枝杆菌核糖体蛋白丙氨酸乙酰转移酶过表达菌株的构建及分析
- 2021年
- rim I基因编码的核糖体蛋白丙氨酸乙酰转移酶(ribosomal-protein-alanine acetyltransferase,RimI)为结核分枝杆菌GCN5相关N-乙酰转移酶家族成员,其在结核分枝杆菌中的生物学功能尚不十分清楚。为探索RimI的生物学特性及其对结核分枝杆菌致病性的影响,本研究以耻垢分枝杆菌为模式菌,构建过表达结核分枝杆菌rimI基因的重组菌株Msm∷pMV261-rimI。分别培养Msm∷pMV261-rimI菌株和对照Msm∷pMV261菌株,分析两者生长速率、菌落形态和生物膜形成的差异,以及耐受低氧、低pH值、H 2O 2、二硫苏糖醇(dithiothreitol,DTT)和0.05%~1%十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)等逆环境的能力;并将两种菌株分别接种于鼠巨噬细胞RAW264.7,观察两者在巨噬细胞内的存活能力。结果表明,相较于对照菌株,过表达rimI的菌株在生长前中期速率降低,生物膜早期成膜变缓,但不影响生物膜的后期成熟。同时,过表达rimI的菌株抵抗低氧、低pH值、H 2O 2等逆环境的能力增强,在巨噬细胞内的存活能力增强。结果提示,rimI基因对分枝杆菌的生物膜形成、抗逆性及细胞内生存具有重要作用,可能与结核分枝杆菌的毒力密切相关。
- 陈润白嘉诚狄玉昌钱嘉宁毕静张雪莲
- 关键词：结核分枝杆菌乙酰转移酶毒力
- 具有抗结核活性的化合物及其制备方法和应用
- 本发明属于生物医药技术领域，涉及具有抗结核活性的化合物，具体涉及式(I)结构的抑制结核杆菌生长的硫脲类化合物及其制备方法和应用。经体外结核杆菌的抑制试验证实，本发明制得的化合物不仅具有显著好的抗敏感结核杆菌活性MIC？0...
- 张雪莲王洪海罗如松滕丽艳毕静
- 文献传递
- 原核生物中蛋白质乙酰化修饰的研究进展被引量：1
- 2013年
- 近来发现,除组蛋白外,大量非组蛋白也存在赖氨酸乙酰化,并广泛参与细胞分化、细胞代谢等重要生理活动,赖氨酸乙酰化已成为生命科学领域研究的前沿热点。已有很多研究证据表明原核生物也普遍存在蛋白质乙酰化修饰现象,而且涉及中心代谢和中间代谢的很多代谢酶都存在乙酰化修饰现象。为更好了解乙酰化修饰在细菌中的重要性,对目前原核生物中蛋白质乙酰化修饰研究内容和最新进展进行综述,归纳原核生物蛋白赖氨酸位点的可逆乙酰化在中心代谢途径等重要生理活动中的调控作用。
- 毕静张雪莲
- 关键词：乙酰化赖氨酸原核生物
- 具有抗结核活性的化合物及其制备方法和应用
- 本发明属于生物医药技术领域，涉及具有抗结核活性的化合物，具体涉及式(I)结构的抑制结核杆菌生长的硫脲类化合物及其制备方法和应用。经体外结核杆菌的抑制试验证实，本发明制得的化合物不仅具有显著好的抗敏感结核杆菌活性MIC 0...
- 张雪莲王洪海罗如松滕丽艳毕静
- 文献传递
- 乙酰化修饰调控结核杆菌异柠檬酸裂合酶的研究
- 2015年
- 目的:探索结核杆菌异柠檬酸裂合酶(ICL)蛋白322位点赖氨酸(Lys322)的乙酰化修饰对蛋白功能的调控作用。方法:构建结核杆菌ICL蛋白原核表达载体p ET28a-icl,并对Lys322位点进行定点突变为精氨酸(Arg,R)和谷氨酰胺(Glu,Q),体外表达纯化获得重组蛋白ICLWT、ICL322R和ICL322Q。通过Western blotting和酶活性测定来揭示Lys322位点突变前后对蛋白的乙酰化修饰水平及蛋白功能的影响。结果:Western blotting检测发现大肠杆菌表达体系获得的ICLWT、ICL322R和ICL322Q蛋白均有较高水平的蛋白赖氨酸乙酰化修饰信号,较ICLWT,ICL322R和ICL322Q突变蛋白的酶活性分别下降了大约50%和70%。结论:在大肠杆菌的表达体系中,ICL蛋白可以获得乙酰化修饰。ICL322Q突变蛋白酶活性的显著下降,揭示Lys322位点乙酰化修饰对ICL蛋白的功能存在负向调控。为未来深入探索赖氨酸乙酰化修饰对结核杆菌代谢,潜伏感染的调控作用奠定了基础。
- 李瑶瑶毕静王艺红秦云贺张雪莲
- 关键词：乙酰化修饰定点突变
